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美国红鱼清道夫受体SRCR和巨噬细胞迁移抑制因子MIF的表达和功能学研究

致谢第1-5页
摘要第5-6页
ABSTRACT第6-8页
目录第8-13页
第一章 文献综述第13-43页
   ·红鱼简介第13-14页
     ·形态特征第13页
     ·生活习性第13页
     ·繁殖习性第13-14页
   ·鱼类免疫系统简介第14-22页
     ·鱼类免疫系统的发生第14-15页
     ·鱼类免疫器官第15-16页
     ·非特异性免疫第16-20页
       ·非特异性体液免疫第16-18页
       ·非特异性细胞免疫第18-20页
     ·特异性免疫第20-22页
       ·特异性体液免疫第20-21页
       ·特异性细胞免疫第21-22页
     ·清道夫受体和SRCR超家族(SRCR-SF)第22-34页
     ·SRCR超家族结构第24-26页
     ·SRCR家族功能第26-27页
     ·SR-A结构及其免疫作用第27-28页
     ·MARCO结构及其免疫作用第28-31页
     ·SCARA5结构及功能第31页
     ·其他SRCR家族成员第31-34页
   ·MIF第34-43页
     ·MIF的结构和生物活性第34-35页
     ·MIF细胞来源和组织分布第35-36页
     ·MIF和先天性免疫第36-37页
     ·MIF和获得性免疫第37-38页
     ·MIF与炎症第38-40页
       ·MIF在动脉粥样硬化中的作用第38-39页
       ·MIF和败血病第39-40页
     ·MIF和肿瘤第40-41页
     ·MIF在肥胖和2型糖尿病中的作用第41-43页
第二章 红鱼一种清道夫受体SoSRCRP1基因的克隆及功能分析第43-83页
   ·材料和方法第43-70页
     ·实验动物及菌株来源第43页
     ·试剂第43-44页
     ·仪器第44-45页
     ·引物第45-46页
     ·SoSRCRP1基因的克隆第46页
     ·序列分析第46页
     ·原核蛋白表达载体构建第46-52页
       ·SoSRCRP1中SRCR功能域的基因扩增第47-48页
       ·感受态细胞制备第48-49页
       ·TA克隆第49-50页
       ·质粒酶切第50-51页
       ·表达载体构建连接第51-52页
     ·蛋白突变载体构建第52-53页
     ·原核表达系统重组蛋白表达及纯化第53-61页
       ·原核表达系统重组蛋白表达第53-54页
       ·SDS-PAGE第54-56页
       ·重组蛋白的纯化第56-61页
     ·抗rSoSRCRP1多克隆抗体的制备第61-64页
       ·多克隆抗体制备第61-62页
       ·ELISA检测血清效价第62页
       ·Westernblot第62-64页
     ·荧光定量PCR分析鱼组织中的SoSRCRP1表达第64-68页
       ·SoSRCRP1在红鱼中的组织特异性表达第64-65页
       ·病原刺激后SoSRCRP1的表达第65页
       ·SoSRCRP1在头肾细胞中的表达第65-68页
     ·SoSRCRP1的亚细胞定位第68页
     ·rSoSRCRP1蛋白结合细菌能力检测第68-70页
       ·ELISA检测重组蛋白结合活性第68-69页
       ·荧光显微镜检测结合活性第69-70页
   ·实验结果第70-80页
     ·SoSRCRP1的序列分析第70页
     ·重组蛋白SoSRCRP1(rSoSRCRP1)和抗rSoSRCRP1血清的制备.60第70-73页
     ·SoSRCRP1在红鱼组织中的表达第73-75页
     ·SoSRCRP1在头肾细胞中的表达及定位第75-77页
     ·rSoSRCRP1同病原细菌的结合第77-79页
     ·SRCR中保守结构对rSoSRCRP1细菌结合能力的影响第79-80页
   ·讨论第80-83页
第三章 红鱼MIF调控免疫细胞迁移并参与病原介导的免疫反应第83-96页
   ·材料和方法第83-87页
     ·实验动物及菌株来源第83页
     ·试剂第83页
     ·仪器第83页
     ·序列分析第83页
     ·原核蛋白表达载体pEtMif和pEtOmp257构建第83-84页
     ·蛋白诱导及纯化第84页
     ·内毒素去除第84-85页
     ·抗rSoMIF多克隆抗体的制备第85页
     ·荧光定量PCR分析鱼组织中的rSoMIF表达第85页
     ·rSoMIF对细胞迁移的影响第85-86页
     ·rSoMIF在体内的影响第86-87页
   ·实验结果第87-94页
     ·SoMIF的序列分析第87-89页
     ·制备纯化重组蛋白SoMIF(rSoMIF)和抗rSoMIF血清第89页
     ·rSoMIF内毒素去除第89页
     ·SoMIF在鱼组织中的表达第89-91页
     ·SoMIF在头肾白细胞中的表达第91页
     ·rSoMIF对单核细胞和淋巴细胞迁移的影响第91-93页
     ·rSoMIF对鱼体宿主免疫反应的影响第93-94页
   ·讨论第94-96页
结论第96-98页
参考文献第98-120页
个人简历第120-121页
博士期间发表文章第121页

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