致谢 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
目录 | 第8-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-43页 |
·红鱼简介 | 第13-14页 |
·形态特征 | 第13页 |
·生活习性 | 第13页 |
·繁殖习性 | 第13-14页 |
·鱼类免疫系统简介 | 第14-22页 |
·鱼类免疫系统的发生 | 第14-15页 |
·鱼类免疫器官 | 第15-16页 |
·非特异性免疫 | 第16-20页 |
·非特异性体液免疫 | 第16-18页 |
·非特异性细胞免疫 | 第18-20页 |
·特异性免疫 | 第20-22页 |
·特异性体液免疫 | 第20-21页 |
·特异性细胞免疫 | 第21-22页 |
·清道夫受体和SRCR超家族(SRCR-SF) | 第22-34页 |
·SRCR超家族结构 | 第24-26页 |
·SRCR家族功能 | 第26-27页 |
·SR-A结构及其免疫作用 | 第27-28页 |
·MARCO结构及其免疫作用 | 第28-31页 |
·SCARA5结构及功能 | 第31页 |
·其他SRCR家族成员 | 第31-34页 |
·MIF | 第34-43页 |
·MIF的结构和生物活性 | 第34-35页 |
·MIF细胞来源和组织分布 | 第35-36页 |
·MIF和先天性免疫 | 第36-37页 |
·MIF和获得性免疫 | 第37-38页 |
·MIF与炎症 | 第38-40页 |
·MIF在动脉粥样硬化中的作用 | 第38-39页 |
·MIF和败血病 | 第39-40页 |
·MIF和肿瘤 | 第40-41页 |
·MIF在肥胖和2型糖尿病中的作用 | 第41-43页 |
第二章 红鱼一种清道夫受体SoSRCRP1基因的克隆及功能分析 | 第43-83页 |
·材料和方法 | 第43-70页 |
·实验动物及菌株来源 | 第43页 |
·试剂 | 第43-44页 |
·仪器 | 第44-45页 |
·引物 | 第45-46页 |
·SoSRCRP1基因的克隆 | 第46页 |
·序列分析 | 第46页 |
·原核蛋白表达载体构建 | 第46-52页 |
·SoSRCRP1中SRCR功能域的基因扩增 | 第47-48页 |
·感受态细胞制备 | 第48-49页 |
·TA克隆 | 第49-50页 |
·质粒酶切 | 第50-51页 |
·表达载体构建连接 | 第51-52页 |
·蛋白突变载体构建 | 第52-53页 |
·原核表达系统重组蛋白表达及纯化 | 第53-61页 |
·原核表达系统重组蛋白表达 | 第53-54页 |
·SDS-PAGE | 第54-56页 |
·重组蛋白的纯化 | 第56-61页 |
·抗rSoSRCRP1多克隆抗体的制备 | 第61-64页 |
·多克隆抗体制备 | 第61-62页 |
·ELISA检测血清效价 | 第62页 |
·Westernblot | 第62-64页 |
·荧光定量PCR分析鱼组织中的SoSRCRP1表达 | 第64-68页 |
·SoSRCRP1在红鱼中的组织特异性表达 | 第64-65页 |
·病原刺激后SoSRCRP1的表达 | 第65页 |
·SoSRCRP1在头肾细胞中的表达 | 第65-68页 |
·SoSRCRP1的亚细胞定位 | 第68页 |
·rSoSRCRP1蛋白结合细菌能力检测 | 第68-70页 |
·ELISA检测重组蛋白结合活性 | 第68-69页 |
·荧光显微镜检测结合活性 | 第69-70页 |
·实验结果 | 第70-80页 |
·SoSRCRP1的序列分析 | 第70页 |
·重组蛋白SoSRCRP1(rSoSRCRP1)和抗rSoSRCRP1血清的制备.60 | 第70-73页 |
·SoSRCRP1在红鱼组织中的表达 | 第73-75页 |
·SoSRCRP1在头肾细胞中的表达及定位 | 第75-77页 |
·rSoSRCRP1同病原细菌的结合 | 第77-79页 |
·SRCR中保守结构对rSoSRCRP1细菌结合能力的影响 | 第79-80页 |
·讨论 | 第80-83页 |
第三章 红鱼MIF调控免疫细胞迁移并参与病原介导的免疫反应 | 第83-96页 |
·材料和方法 | 第83-87页 |
·实验动物及菌株来源 | 第83页 |
·试剂 | 第83页 |
·仪器 | 第83页 |
·序列分析 | 第83页 |
·原核蛋白表达载体pEtMif和pEtOmp257构建 | 第83-84页 |
·蛋白诱导及纯化 | 第84页 |
·内毒素去除 | 第84-85页 |
·抗rSoMIF多克隆抗体的制备 | 第85页 |
·荧光定量PCR分析鱼组织中的rSoMIF表达 | 第85页 |
·rSoMIF对细胞迁移的影响 | 第85-86页 |
·rSoMIF在体内的影响 | 第86-87页 |
·实验结果 | 第87-94页 |
·SoMIF的序列分析 | 第87-89页 |
·制备纯化重组蛋白SoMIF(rSoMIF)和抗rSoMIF血清 | 第89页 |
·rSoMIF内毒素去除 | 第89页 |
·SoMIF在鱼组织中的表达 | 第89-91页 |
·SoMIF在头肾白细胞中的表达 | 第91页 |
·rSoMIF对单核细胞和淋巴细胞迁移的影响 | 第91-93页 |
·rSoMIF对鱼体宿主免疫反应的影响 | 第93-94页 |
·讨论 | 第94-96页 |
结论 | 第96-98页 |
参考文献 | 第98-120页 |
个人简历 | 第120-121页 |
博士期间发表文章 | 第121页 |