| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-14页 |
| 前言 | 第14-15页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-30页 |
| 第一章 副溶血弧菌的分子生物学研究进展 | 第16-20页 |
| 1 基因组DNA | 第16页 |
| 2 质粒 | 第16-17页 |
| 3 鞭毛基因系统 | 第17页 |
| 4 致病因子 | 第17-19页 |
| ·溶血毒素 | 第17-18页 |
| ·尿素酶 | 第18-19页 |
| ·黏附因子 | 第19页 |
| ·侵袭力 | 第19页 |
| 5 结语 | 第19-20页 |
| 第二章 副溶血弧菌基因分型和检测的研究进展 | 第20-25页 |
| 1 基因分型的研究进展 | 第20-22页 |
| ·脉冲场凝胶电泳分析(PFGE) | 第20-21页 |
| ·随机扩增多态性DNA分析(RAPD) | 第21页 |
| ·限制性片段长度多态性分析(RFLP) | 第21页 |
| ·核糖体分型(Ribotyping) | 第21页 |
| ·编码极性鞭毛的基因位点RFLP分析(Flalocus RFLP分析) | 第21-22页 |
| ·ERIC-PCR分型技术 | 第22页 |
| 2 基因检测方法的研究进展 | 第22-24页 |
| ·基因探针 | 第22-23页 |
| ·常规PCR方法 | 第23页 |
| ·多重PCR方法 | 第23-24页 |
| ·荧光定量PCR技术 | 第24页 |
| 3 结语 | 第24-25页 |
| 第三章 基因探针及其在食品微生物学上的应用 | 第25-30页 |
| 1 DNA杂交的基本原理 | 第25-26页 |
| 2 探针的种类及其选择 | 第26页 |
| ·克隆探针 | 第26页 |
| ·人工合成的探针 | 第26页 |
| ·RNA探针 | 第26页 |
| 3 探针的标记及其检测 | 第26页 |
| 4 杂交方法 | 第26-27页 |
| 5 PCR技术与基因探针的结合使用 | 第27页 |
| 6 基因探针在食品微生物学中的应用 | 第27-29页 |
| 7 结论 | 第29-30页 |
| 第二篇 实验研究 | 第30-68页 |
| 第四章 应用PCR方法检测副溶血弧菌的耐热溶血 | 第31-37页 |
| 1 材料和方法 | 第31-33页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·引物的设计和合成 | 第32页 |
| ·菌株的分离和鉴定 | 第32页 |
| ·PCR | 第32页 |
| ·特异性试验 | 第32-33页 |
| ·敏感性试验 | 第33页 |
| ·实际食品检验及用经典方法验证 | 第33页 |
| 2 结果 | 第33-35页 |
| ·PCR的特异性 | 第33页 |
| ·PCR的敏感性 | 第33-34页 |
| ·实际样品检测结果 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35页 |
| 4 结论 | 第35-37页 |
| 第五章 应用地高辛标记的寡聚核酸探针 | 第37-42页 |
| 1 材料与方法 | 第37-39页 |
| ·材料 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| 2 结果 | 第39-41页 |
| ·待检DNA片断的获取 | 第39-40页 |
| ·斑点杂交实验的特异性 | 第40页 |
| ·试验灵敏度 | 第40页 |
| ·杂交法与经典检测方法的比较 | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41-42页 |
| 第六章 基于TaqMan探针的Real-time PCR方法 | 第42-50页 |
| 1 材料和方法 | 第42-44页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·引物和TaqMan探针的设计和合成 | 第43页 |
| ·细菌记数方法和分离鉴定 | 第43页 |
| ·Real-time PCR | 第43-44页 |
| ·制作标准曲线 | 第44页 |
| ·食品样品中副溶血弧菌的定量检测 | 第44页 |
| 2 结果 | 第44-47页 |
| ·Real-time PCR的特异性 | 第44-45页 |
| ·Real-time PCR的敏感性 | 第45-47页 |
| ·海产品中副溶血弧菌的Real-time PCR检测结果 | 第47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 4 结论 | 第49-50页 |
| 第七章 双重Real-time PCR方法同步定量检测食品中的副溶血弧菌和金黄色葡萄球菌 | 第50-57页 |
| 1 材料和方法 | 第50-53页 |
| ·菌株 | 第50页 |
| ·培养基 | 第50页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第50-51页 |
| ·引物和TaqMan探针的设计和合成 | 第51页 |
| ·细菌记数方法和分离鉴定 | 第51-52页 |
| ·Real-time PCR | 第52页 |
| ·制作标准曲线 | 第52页 |
| ·干扰实验 | 第52页 |
| ·人工布菌样品中副溶血弧菌和金黄色葡萄球菌的定量检测 | 第52-53页 |
| ·食品样品中副溶血弧菌和金黄色葡萄球菌的定量检测 | 第53页 |
| 2 结果 | 第53-55页 |
| ·Real-time PCR的特异性和敏感性 | 第53-54页 |
| ·干扰实验 | 第54页 |
| ·人工布菌样品副溶血弧菌和金黄色葡萄球菌DNA的检测 | 第54页 |
| ·各类食品中副溶血弧菌和金黄色葡萄球菌的定量检测结果 | 第54-55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 第八章 副溶血弧菌不同检测方法的对比研究 | 第57-60页 |
| 1 材料和方法 | 第57-60页 |
| ·样品来源 | 第57页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-60页 |
| 第九章 2005～2006年华东沿海地区海产品及环境水样中副溶血弧菌污染情况的调查分析 | 第60-68页 |
| 1 材料和方法 | 第60-63页 |
| ·样品采集及处理 | 第60-61页 |
| ·培养基 | 第61页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第61页 |
| ·模板DNA的提取 | 第61-62页 |
| ·寡聚核苷酸探针杂交方法定性检测 | 第62页 |
| ·Real-time PCR定量检测 | 第62页 |
| ·统计分析 | 第62-63页 |
| 2 结果 | 第63-65页 |
| ·海产品中副溶血弧菌的分布情况 | 第63页 |
| ·不同海产品中副溶血弧菌的检出情况 | 第63页 |
| ·不同地区副溶血弧菌的检出率 | 第63-64页 |
| ·海产品中副溶血弧菌的季节分布情况 | 第64-65页 |
| ·环境水样中副溶血弧菌检出情况 | 第65页 |
| 3 讨论 | 第65-68页 |
| 第十章 全文结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 攻读专业博士期间发表和完成的学术论文 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
