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硫酸乙酰肝素3-O磺基转移酶V在大肠杆菌中的表达及其酶学性质

摘要第1-4页
Abstract第4-6页
目录第6-8页
第一章 绪论第8-18页
   ·硫酸乙酰肝素及其合成第8-10页
     ·硫酸乙酰肝素第8页
     ·硫酸乙酰肝素的合成途径第8-9页
     ·硫酸乙酰肝素的生物酶法合成第9-10页
     ·硫酸乙酰肝素的生物学功能及其机制第10页
   ·磺基转移酶第10-14页
     ·磺基转移酶第10-11页
     ·硫酸乙酰肝素 3-氧-磺基转移酶(3-OSTs)第11-13页
     ·硫酸乙酰肝素 3-氧-磺基转移酶-V(3-OST-V)第13-14页
   ·大肠杆菌表达体系第14-16页
     ·大肠杆菌表达载体的选择第15页
     ·宿主菌的选择第15-16页
     ·影响外源基因在大肠杆菌中表达的因素第16页
   ·研究意义及研究内容第16-18页
     ·研究意义第16页
     ·研究内容第16-18页
第二章 材料与方法第18-32页
   ·材料第18-19页
     ·菌株及质粒载体第18页
     ·试剂及其来源第18页
     ·培养基第18页
     ·仪器第18-19页
   ·研究方法第19-32页
     ·3-OST-V 的活性测定第19-22页
     ·蛋白质含量测定第22-23页
     ·重组菌 BL21/pET 15b/3-OST-V 的构建第23-27页
     ·重组菌 BL21/pET 15b/3-OST-V 的诱导表达第27-28页
     ·诱导表达条件优化第28页
     ·重组蛋白 3-OST-V 的纯化第28-29页
     ·3-OST-V 的酶学性质第29-32页
第三章 结果与讨论第32-46页
   ·AST-IV 的纯化及其酶学性质第32-35页
     ·AST-IV 的诱导表达及其亲和纯化第32-33页
     ·AST-IV 的酶学性质第33-35页
   ·大肠杆菌重组菌 BL21/pET 15b/3-OST-V 的构建第35-37页
   ·重组菌 BL21/pET 15b/3-OST-V 的诱导表达第37-42页
     ·重组菌 BL21/pET 15b/3-OST-V 的生长曲线第37页
     ·重组菌 BL21/pET 15b/3-OST-V 的诱导表达第37-38页
     ·诱导条件优化第38-42页
   ·重组蛋白 3-OST-V 的纯化第42-43页
   ·重组蛋白 3-OST-V 的酶学性质第43-46页
     ·重组蛋白 3-OST-V 的最适温度及温度稳定性第43-44页
     ·重组蛋白 3-OST-V 的最适 pH 及 pH 稳定性第44页
     ·金属离子对重组蛋白 3-OST-V 酶活性的影响第44-45页
     ·小结第45-46页
第四章 结论及展望第46-48页
   ·结论第46页
   ·展望第46-48页
致谢第48-50页
参考文献第50-55页
附录第55-56页
 附录 1 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第55-56页
 附录 2 缩略词第56页

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