| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-18页 |
| ·硫酸乙酰肝素及其合成 | 第8-10页 |
| ·硫酸乙酰肝素 | 第8页 |
| ·硫酸乙酰肝素的合成途径 | 第8-9页 |
| ·硫酸乙酰肝素的生物酶法合成 | 第9-10页 |
| ·硫酸乙酰肝素的生物学功能及其机制 | 第10页 |
| ·磺基转移酶 | 第10-14页 |
| ·磺基转移酶 | 第10-11页 |
| ·硫酸乙酰肝素 3-氧-磺基转移酶(3-OSTs) | 第11-13页 |
| ·硫酸乙酰肝素 3-氧-磺基转移酶-V(3-OST-V) | 第13-14页 |
| ·大肠杆菌表达体系 | 第14-16页 |
| ·大肠杆菌表达载体的选择 | 第15页 |
| ·宿主菌的选择 | 第15-16页 |
| ·影响外源基因在大肠杆菌中表达的因素 | 第16页 |
| ·研究意义及研究内容 | 第16-18页 |
| ·研究意义 | 第16页 |
| ·研究内容 | 第16-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-32页 |
| ·材料 | 第18-19页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第18页 |
| ·试剂及其来源 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·仪器 | 第18-19页 |
| ·研究方法 | 第19-32页 |
| ·3-OST-V 的活性测定 | 第19-22页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第22-23页 |
| ·重组菌 BL21/pET 15b/3-OST-V 的构建 | 第23-27页 |
| ·重组菌 BL21/pET 15b/3-OST-V 的诱导表达 | 第27-28页 |
| ·诱导表达条件优化 | 第28页 |
| ·重组蛋白 3-OST-V 的纯化 | 第28-29页 |
| ·3-OST-V 的酶学性质 | 第29-32页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第32-46页 |
| ·AST-IV 的纯化及其酶学性质 | 第32-35页 |
| ·AST-IV 的诱导表达及其亲和纯化 | 第32-33页 |
| ·AST-IV 的酶学性质 | 第33-35页 |
| ·大肠杆菌重组菌 BL21/pET 15b/3-OST-V 的构建 | 第35-37页 |
| ·重组菌 BL21/pET 15b/3-OST-V 的诱导表达 | 第37-42页 |
| ·重组菌 BL21/pET 15b/3-OST-V 的生长曲线 | 第37页 |
| ·重组菌 BL21/pET 15b/3-OST-V 的诱导表达 | 第37-38页 |
| ·诱导条件优化 | 第38-42页 |
| ·重组蛋白 3-OST-V 的纯化 | 第42-43页 |
| ·重组蛋白 3-OST-V 的酶学性质 | 第43-46页 |
| ·重组蛋白 3-OST-V 的最适温度及温度稳定性 | 第43-44页 |
| ·重组蛋白 3-OST-V 的最适 pH 及 pH 稳定性 | 第44页 |
| ·金属离子对重组蛋白 3-OST-V 酶活性的影响 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第四章 结论及展望 | 第46-48页 |
| ·结论 | 第46页 |
| ·展望 | 第46-48页 |
| 致谢 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附录 | 第55-56页 |
| 附录 1 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55-56页 |
| 附录 2 缩略词 | 第56页 |