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超嗜热古菌Thermococcus siciuli HJ21高温酸性α-淀粉酶基因的分泌表达及应用研究

摘要第1-4页
Abstract第4-7页
第一章 绪论第7-15页
   ·海洋超嗜热微生物与海洋嗜热酶第7-8页
     ·海洋超嗜热微生物第7-8页
     ·海洋嗜热酶第8页
   ·耐高温α-淀粉酶第8-10页
     ·双酶法制糖与α-淀粉酶第9页
     ·耐高温α-淀粉酶生产菌的筛选及相关研究进展第9-10页
   ·酵母表达系统第10-13页
     ·酵母表达系统概述第10-11页
     ·解脂耶罗威亚酵母表达系统第11-13页
   ·本课题的立题背景与研究内容第13-15页
第二章 材料与方法第15-25页
   ·材料第15-17页
     ·菌株与质粒第15页
     ·培养基与溶液第15-16页
     ·主要试剂第16-17页
     ·主要仪器与设备第17页
   ·方法第17-25页
     ·α-淀粉酶活力的测定第17页
     ·菌体生长量的测定第17页
     ·蛋白质含量的测定第17-18页
     ·古菌基因组 DNA、质粒 DNA、酵母基因组 DNA 的提取第18页
     ·感受态细胞的制备第18页
     ·α-淀粉酶基因的克隆第18-20页
     ·解脂耶罗威亚酵母表达体系的构建第20-22页
     ·α-淀粉酶基因的表达第22页
     ·重组酶的酶学性质第22-23页
     ·重组菌株的发酵条件第23页
     ·重组α-淀粉酶的水解效果第23-25页
第三章 结果与讨论第25-41页
   ·表达质粒 pINA1317-amy 的构建第25-26页
   ·α-淀粉酶基因的转化及阳性转化子的筛选第26-27页
   ·活性α-淀粉酶的表达第27-29页
   ·重组α-淀粉酶的性质研究第29-31页
     ·最适反应温度及温度稳定性第29-30页
     ·最适反应 pH 及 pH 稳定性第30-31页
   ·重组菌培养条件研究第31-37页
     ·不同碳源对产酶的影响第31-32页
     ·糖蜜浓度对产酶的影响第32-33页
     ·无机盐对产酶的影响第33-34页
     ·初始 pH 对产酶的影响第34-35页
     ·装液量对产酶的影响第35页
     ·培养时间对产酶的影响第35-36页
     ·正交试验优化发酵条件第36-37页
   ·不同因素对重组α-淀粉酶液化玉米淀粉的影响第37-41页
     ·液化时间对淀粉液化的影响第37-38页
     ·酶用量对淀粉液化的影响第38页
     ·液化温度对淀粉液化的影响第38-39页
     ·粉浆初始浓度对淀粉液化的影响第39-40页
     ·初始 pH 对淀粉液化的影响第40-41页
主要结论与展望第41-43页
 主要结论第41-42页
 展望第42-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-51页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第51页

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