| ACKNOWLEDGEMENTS | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-9页 |
| Chapter Ⅰ Introduction | 第9-19页 |
| ·Structure and mechanism of V-ATPases | 第9-11页 |
| ·Function of V-ATPases | 第11-12页 |
| ·Regulation of V-ATPases | 第12-15页 |
| ·RAVE complex | 第15-17页 |
| ·The purpose of this study | 第17-19页 |
| Chapter Ⅱ Materials and methods | 第19-43页 |
| ·Materials | 第19-26页 |
| ·Strains | 第19页 |
| ·Reagents | 第19页 |
| ·Mediums | 第19页 |
| ·Solutions | 第19-25页 |
| ·Equipments | 第25-26页 |
| ·Methods | 第26-43页 |
| ·Yeast genomic DNA extraction | 第26页 |
| ·Primer design | 第26-28页 |
| ·PCR for constructing FLAG tag to the 5’-end of Rav1 | 第28-31页 |
| ·PCR for constructing FLAG tag to the 3’-end of Rav1 | 第31-33页 |
| ·PCR for constructing FLAG tag to the 3’-end of Rav2 | 第33-36页 |
| ·Yeast transformation | 第36-37页 |
| ·Screening recombinant strains | 第37-39页 |
| ·Purifying RAVE complex | 第39-40页 |
| ·Western blot | 第40-41页 |
| ·MALDI-TOF | 第41-43页 |
| Chapter Ⅲ Results | 第43-55页 |
| ·Yeast genomic DNA extraction | 第43页 |
| ·Constructing FLAG tag to the 5’-end of Rav1 | 第43-46页 |
| ·Constructing FLAG tag to the 3’-end of Rav1 | 第46-48页 |
| ·Constructing FLAG tag to the 3’-end of Rav2 | 第48-50页 |
| ·Purification of the RAVE complex | 第50-55页 |
| Chapter Ⅳ Discussion and Conclusion | 第55-56页 |
| Recommendations | 第56-57页 |
| Publication | 第57-58页 |
| References | 第58-60页 |
| Appendix | 第60-62页 |
