| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 英文缩写说明 | 第10-12页 |
| 第1章 前言 | 第12-21页 |
| ·林可霉素简介 | 第12页 |
| ·林可酰胺类抗生素的应用 | 第12-14页 |
| ·林可霉素生物合成 | 第14-18页 |
| ·林可霉素生物合成基因簇 | 第14-16页 |
| ·林可霉素生物合成途径 | 第16-17页 |
| ·林可霉素生物合成中推定的甲基化基因 | 第17页 |
| ·林可霉素生物合成中推定的调控基因 | 第17-18页 |
| ·PPL支路途径相关的抗生素 | 第18-19页 |
| ·立题依据及研究内容 | 第19-21页 |
| ·立题依据 | 第19-20页 |
| ·研究内容 | 第20-21页 |
| 第2章 材料和方法 | 第21-34页 |
| ·实验材料 | 第21-25页 |
| ·菌株与质粒 | 第21-22页 |
| ·引物 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·药品及试剂 | 第23页 |
| ·主要溶液和缓冲液 | 第23-24页 |
| ·培养基及培养条件 | 第24-25页 |
| ·抗生素及其使用浓度 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-34页 |
| ·菌种的培养和保藏 | 第25-26页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第26页 |
| ·大肠杆菌质粒转化 | 第26页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取(UNIQ-10柱式质粒小量抽提试剂盒) | 第26-27页 |
| ·DNA片段的回收(XA014-2B DNA片段快速纯化回收试剂盒) | 第27页 |
| ·DNA的酶切 | 第27-28页 |
| ·质粒与外源片段的连接 | 第28页 |
| ·PCR反应 | 第28-29页 |
| ·S.lincolnensis总DNA的提取 | 第29页 |
| ·大肠杆菌与S.lincolnensis属间接合转移 | 第29-30页 |
| ·发酵验证突变菌的获得 | 第30页 |
| ·S.lincolnensis出发菌及突变菌的发酵 | 第30-31页 |
| ·杯碟法测定发酵液生物效价单位 | 第31-32页 |
| ·发酵液的HPLC及LC-MS分析 | 第32-34页 |
| 第3章 倍增基因orf25、orf12提高林可霉素A产量和纯度的初步研究 | 第34-50页 |
| ·甲基化基因orf25、orf12的双中断 | 第34-38页 |
| ·突变菌LIN-DWJ的获得和验证 | 第34-35页 |
| ·突变菌LIN-DWJ的发酵验证 | 第35-38页 |
| ·甲基化基因orf25的单独倍增 | 第38-43页 |
| ·携带甲基化基因orf25重组质粒的构建 | 第38-39页 |
| ·突变菌LIN-W的获得和验证 | 第39-41页 |
| ·突变菌LIN-W的发酵验证 | 第41-43页 |
| ·甲基化基因orf25、orf12的共同倍增 | 第43-49页 |
| ·携带甲基化基因orf25和orf12的重组质粒的构建 | 第43-45页 |
| ·突变菌LIN-WJ的获得和验证 | 第45-46页 |
| ·突变菌LIN-WJ的发酵验证 | 第46-49页 |
| ·本章小结 | 第49-50页 |
| 第4章 倍增基因orf22、orf29和基因簇1E8提高林可霉素A产量和纯度的初步研究 | 第50-62页 |
| ·调控基因orf22的单独倍增 | 第50-54页 |
| ·携带调控基因orf22的重组质粒的构建 | 第50页 |
| ·突变菌LIN-Q的获得和验证 | 第50-53页 |
| ·突变菌LIN-Q的发酵验证 | 第53-54页 |
| ·调控基因orf29的单独倍增 | 第54-58页 |
| ·携带调控基因orf29的重组质粒的构建 | 第54-55页 |
| ·突变菌LIN-U的获得和验证 | 第55-57页 |
| ·突变菌LIN-U的发酵验证 | 第57-58页 |
| ·基因簇1E8的单独倍增 | 第58-61页 |
| ·突变株L1N-1E8的获得和验证 | 第58-59页 |
| ·突变株LIN-1E8的发酵验证 | 第59-61页 |
| ·本章小结 | 第61-62页 |
| 第5章 结论与展望 | 第62-64页 |
| ·结论 | 第62页 |
| ·展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附录一 | 第68-69页 |
| 附录二 | 第69-70页 |
| 附录三 | 第70-71页 |
| 附录四 | 第71-72页 |
| 附录五 | 第72-73页 |
| 附录六 | 第73-74页 |
| 附录七 | 第74-75页 |
| 附录八 | 第75页 |
