| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-13页 |
| 第一部分 TRAIL胞外段基因的克隆与表达 | 第13-40页 |
| 1 材料与方法 | 第13-28页 |
| ·材料 | 第13-19页 |
| ·试剂与酶 | 第13页 |
| ·主要试剂及溶液的配制 | 第13-18页 |
| ·主要仪器设备 | 第18-19页 |
| ·载体，细菌菌株与细胞株 | 第19页 |
| ·引物设计 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-28页 |
| ·总RNA 的提取 | 第19-20页 |
| ·RT-PCR 扩增TRAIL 基因 | 第20页 |
| ·回收目的DNA | 第20-21页 |
| ·连接反应 | 第21页 |
| ·转化 | 第21-22页 |
| ·挑取及鉴定克隆 | 第22页 |
| ·质粒提取及酶切鉴定 | 第22页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第22-24页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第24页 |
| ·Western Blot | 第24-26页 |
| ·sTRAIL 蛋白的纯化 | 第26-27页 |
| ·MTT 法检测融合蛋白活性 | 第27页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第27-28页 |
| 2 结果 | 第28-32页 |
| ·RT-PCR 扩增 TRAIL 胞外段基因 | 第28页 |
| ·靶基因序列测定及原核表达载体的构建 | 第28-29页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第29页 |
| ·Western blot | 第29-30页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第30页 |
| ·MTT 法检测融合蛋白活性 | 第30-31页 |
| ·sTRAIL 诱导细胞凋亡 | 第31-32页 |
| 讨论 | 第32-35页 |
| 小结 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 第二部分 抗DR5单克隆抗体mDRA6的人源化改造 | 第40-59页 |
| 1 抗DR5单克隆抗体mDRA6的功能鉴定 | 第40-46页 |
| ·材料与方法 | 第41-43页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-43页 |
| ·结果 | 第43-46页 |
| ·mDRA6 与Jurkat 细胞的结合情况 | 第43页 |
| ·mDRA6 与 TRAIL 竞争结合实验 | 第43-44页 |
| ·mDRA6 对 Jurkat 细胞生长抑制作用 | 第44-45页 |
| ·mDRA6诱导Jurkat细胞凋亡 | 第45-46页 |
| 小结 | 第46页 |
| 2 嵌合抗 DR5 单克隆抗体的构建与表达 | 第46-56页 |
| ·材料与方法 | 第47-50页 |
| ·材料 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-50页 |
| ·结果 | 第50-54页 |
| ·mDRA6 V_H和V_L基因的克隆及序列分析 | 第50-52页 |
| ·嵌合抗体真核表达载体的构建 | 第52-53页 |
| ·嵌合抗体的表达量 | 第53-54页 |
| 讨论 | 第54-56页 |
| 小结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-59页 |
| 综述 | 第59-69页 |
| 英文缩写及中英文对照 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 附录 | 第72页 |