1 引言 | 第1-22页 |
1.1 本研究的目的和意义 | 第10-14页 |
1.1.1 食品工业 | 第11-12页 |
1.1.2 医药工业 | 第12页 |
1.1.3 生物方面 | 第12-13页 |
1.1.4 其他方面 | 第13页 |
1.1.5 葡萄糖酸的应用 | 第13-14页 |
1.2 国内外研究现状及进展 | 第14-21页 |
1.2.1 关于GOD发现的历史过程 | 第14页 |
1.2.2 葡萄糖氧化酶的来源 | 第14-15页 |
1.2.3 关于葡萄糖氧化酶酶活力测定的研究 | 第15-16页 |
1.2.4 产酶菌株的筛选、育种及产酶优化的研究 | 第16-17页 |
1.2.5 葡萄糖氧化酶的提取、纯化及酶学性质的研究 | 第17-20页 |
1.2.6 酶制剂的研究进展 | 第20页 |
1.2.7 关于酶的固定化及分子水平的研究 | 第20-21页 |
1.3 主要内容和总体目标 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-30页 |
2.1 试验材料 | 第22-23页 |
2.1.1 试验菌株 | 第22页 |
2.1.2 主要培养基 | 第22页 |
2.1.3 主要试剂 | 第22页 |
2.1.4 仪器设备 | 第22-23页 |
2.2 葡萄糖氧化酶的发酵 | 第23-24页 |
2.2.1 斜面培养 | 第23页 |
2.2.2 孢子悬液制备 | 第23页 |
2.2.3 摇瓶发酵试验 | 第23页 |
2.2.4 模拟发酵 | 第23-24页 |
2.3 葡萄糖氧化酶的提取纯化 | 第24-26页 |
2.3.1 工作方案 | 第24页 |
2.3.2 菌丝体制备 | 第24页 |
2.3.3 粗酶液制备 | 第24-25页 |
2.3.4 粗酶液浓缩 | 第25页 |
2.3.5 硫酸铵盐析 | 第25页 |
2.3.6 脱盐 | 第25页 |
2.3.7 离子交换层析 | 第25页 |
2.3.8 分子筛层析 | 第25-26页 |
2.3.9 PAGE电泳鉴定 | 第26页 |
2.4 分析测定方法 | 第26-30页 |
2.4.1 可溶性蛋白的测定 | 第26-27页 |
2.4.2 酶活测定方法 | 第27页 |
2.4.3 分子量测定 | 第27-28页 |
2.4.4 酶蛋白含糖量的测定 | 第28-29页 |
2.4.5 pH对酶活性的影响 | 第29页 |
2.4.6 pH稳定性 | 第29页 |
2.4.7 温度对酶活性的影响 | 第29页 |
2.4.8 热稳定性 | 第29页 |
2.4.9 金属离子及一些化学物质对酶活的影响 | 第29页 |
2.4.10 酶蛋白动力学常数 | 第29-30页 |
3 结果与分析 | 第30-43页 |
3.1 葡萄糖氧化酶的提取纯化 | 第30-36页 |
3.1.1 菌丝体破碎 | 第30页 |
3.1.2 粗酶液制备 | 第30-31页 |
3.1.3 粗酶液浓缩 | 第31页 |
3.1.4 硫酸铵沉淀 | 第31-32页 |
3.1.5 Sephedex G-25脱盐 | 第32页 |
3.1.6 DEAE-32纤维素离子交换层析 | 第32-33页 |
3.1.7 真空冷冻浓缩 | 第33页 |
3.1.8 Sephadex G-100分子筛层析 | 第33-34页 |
3.1.9 PAGE电泳鉴定 | 第34-35页 |
3.1.10 酶的分离纯化结果 | 第35-36页 |
3.2 葡萄糖氧化酶的酶学性质 | 第36-43页 |
3.2.1 酶的分子量 | 第36页 |
3.2.2 酶的糖基化程度 | 第36页 |
3.2.3 pH值对酶活性的影响 | 第36-38页 |
3.2.4 酶的pH稳定性 | 第38页 |
3.2.5 温度对酶活性的影响 | 第38-40页 |
3.2.6 酶的热稳定性 | 第40页 |
3.2.7 金属离子及一些化学物质对酶活的影响 | 第40-41页 |
3.2.8 酶蛋白动力学常数 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-46页 |
4.1 葡萄糖氧化酶粗酶液的制备 | 第43-44页 |
4.2 葡萄糖氧化酶的纯化 | 第44-45页 |
4.3 葡萄糖氧化酶的酶学性质 | 第45-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
6 参考文献 | 第47-54页 |
7 在读期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
8 作者简历 | 第55-56页 |
9 致谢 | 第56页 |