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黑曲霉A9葡萄糖氧化酶的提取纯化及其酶学性质研究

1 引言第1-22页
 1.1 本研究的目的和意义第10-14页
  1.1.1 食品工业第11-12页
  1.1.2 医药工业第12页
  1.1.3 生物方面第12-13页
  1.1.4 其他方面第13页
  1.1.5 葡萄糖酸的应用第13-14页
 1.2 国内外研究现状及进展第14-21页
  1.2.1 关于GOD发现的历史过程第14页
  1.2.2 葡萄糖氧化酶的来源第14-15页
  1.2.3 关于葡萄糖氧化酶酶活力测定的研究第15-16页
  1.2.4 产酶菌株的筛选、育种及产酶优化的研究第16-17页
  1.2.5 葡萄糖氧化酶的提取、纯化及酶学性质的研究第17-20页
  1.2.6 酶制剂的研究进展第20页
  1.2.7 关于酶的固定化及分子水平的研究第20-21页
 1.3 主要内容和总体目标第21-22页
2 材料与方法第22-30页
 2.1 试验材料第22-23页
  2.1.1 试验菌株第22页
  2.1.2 主要培养基第22页
  2.1.3 主要试剂第22页
  2.1.4 仪器设备第22-23页
 2.2 葡萄糖氧化酶的发酵第23-24页
  2.2.1 斜面培养第23页
  2.2.2 孢子悬液制备第23页
  2.2.3 摇瓶发酵试验第23页
  2.2.4 模拟发酵第23-24页
 2.3 葡萄糖氧化酶的提取纯化第24-26页
  2.3.1 工作方案第24页
  2.3.2 菌丝体制备第24页
  2.3.3 粗酶液制备第24-25页
  2.3.4 粗酶液浓缩第25页
  2.3.5 硫酸铵盐析第25页
  2.3.6 脱盐第25页
  2.3.7 离子交换层析第25页
  2.3.8 分子筛层析第25-26页
  2.3.9 PAGE电泳鉴定第26页
 2.4 分析测定方法第26-30页
  2.4.1 可溶性蛋白的测定第26-27页
  2.4.2 酶活测定方法第27页
  2.4.3 分子量测定第27-28页
  2.4.4 酶蛋白含糖量的测定第28-29页
  2.4.5 pH对酶活性的影响第29页
  2.4.6 pH稳定性第29页
  2.4.7 温度对酶活性的影响第29页
  2.4.8 热稳定性第29页
  2.4.9 金属离子及一些化学物质对酶活的影响第29页
  2.4.10 酶蛋白动力学常数第29-30页
3 结果与分析第30-43页
 3.1 葡萄糖氧化酶的提取纯化第30-36页
  3.1.1 菌丝体破碎第30页
  3.1.2 粗酶液制备第30-31页
  3.1.3 粗酶液浓缩第31页
  3.1.4 硫酸铵沉淀第31-32页
  3.1.5 Sephedex G-25脱盐第32页
  3.1.6 DEAE-32纤维素离子交换层析第32-33页
  3.1.7 真空冷冻浓缩第33页
  3.1.8 Sephadex G-100分子筛层析第33-34页
  3.1.9 PAGE电泳鉴定第34-35页
  3.1.10 酶的分离纯化结果第35-36页
 3.2 葡萄糖氧化酶的酶学性质第36-43页
  3.2.1 酶的分子量第36页
  3.2.2 酶的糖基化程度第36页
  3.2.3 pH值对酶活性的影响第36-38页
  3.2.4 酶的pH稳定性第38页
  3.2.5 温度对酶活性的影响第38-40页
  3.2.6 酶的热稳定性第40页
  3.2.7 金属离子及一些化学物质对酶活的影响第40-41页
  3.2.8 酶蛋白动力学常数第41-43页
4 讨论第43-46页
 4.1 葡萄糖氧化酶粗酶液的制备第43-44页
 4.2 葡萄糖氧化酶的纯化第44-45页
 4.3 葡萄糖氧化酶的酶学性质第45-46页
5 结论第46-47页
6 参考文献第47-54页
7 在读期间发表的学术论文第54-55页
8 作者简历第55-56页
9 致谢第56页

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