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胡枝子干旱胁迫下渗透物质变化以及外源基因Sac B对美丽胡枝子的遗传转化研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
缩写词第8-12页
1 文献综述第12-28页
   ·胡枝子研究概况第12-13页
   ·植物抗旱基因工程第13-19页
     ·与植物抗旱相关的物质第13-17页
       ·渗透调节物质,可溶性糖第13-15页
       ·离子和水分通道蛋白第15-16页
       ·Lea蛋白第16-17页
     ·与植物抗旱性相关的调控元件和因子第17-18页
     ·干旱胁迫信号的传导第18页
     ·植物抗旱的基因工程应用第18-19页
   ·果聚糖的生理作用及其合成关键酶基因工程第19-22页
     ·果糖糖代谢的生理作用第20-21页
     ·果聚糖与抗逆性第21-22页
     ·Sac B基因工程第22页
   ·豆科植物再生系统研究第22-24页
     ·直接分化再生系统第22-23页
     ·愈伤组织再生系统第23页
     ·胚状体再生系统第23页
     ·原生质体再生系统第23-24页
     ·离体再生的影响因素第24页
   ·本研究的目的和意义第24-25页
   ·本研究的总体思路第25-28页
2 干旱胁迫条件下胡枝子渗透物质变化第28-38页
   ·材料与方法第28-29页
     ·实验材料第28页
     ·干旱胁迫处理第28页
     ·脯氨酸含量的测定第28-29页
       ·取样第28页
       ·测定第28-29页
     ·可溶性糖含量的测定第29页
       ·取样第29页
       ·测定第29页
     ·可溶性蛋白及热稳定蛋白提取及含量测定第29页
     ·统计的数据与处理第29页
   ·结果与分析第29-35页
     ·干旱胁迫下胡枝子脯氨酸含量变化第29-31页
     ·干旱胁迫下胡枝子可溶性糖含量变化第31-32页
     ·干旱胁迫下胡枝子可溶性蛋白含量变化第32-34页
     ·干旱胁迫下胡枝子热稳定蛋白含量变化第34-35页
   ·讨论第35-38页
3 胡枝子再生系统的建立第38-50页
   ·材料与方法第38-41页
     ·供试材料及试剂第38页
     ·处理方法第38-39页
       ·MS_0基本培养基第38页
       ·无菌苗的培养第38页
       ·不定芽分化第38页
       ·茎段增殖第38-39页
       ·生根第39页
       ·培养条件第39页
     ·培养基配方设计第39-41页
       ·美丽胡枝子子叶节分化培养基的筛选第39页
       ·美丽胡枝子不定芽增殖培养基的筛选第39-40页
       ·美丽胡枝子不定芽生根培养基的筛选第40-41页
       ·数据的分析第41页
   ·结果与分析第41-48页
     ·6-BA,NAA,2,4-D对美丽胡枝子子叶节分化的影响第41-44页
     ·6-BA,NAA对美丽胡枝子不定芽增殖的影响第44-47页
     ·6-BA,NAA对美丽胡枝子不定芽生根的影响第47-48页
   ·讨论第48-50页
4 胡枝子抗生素敏感性试验第50-56页
   ·材料与方法第51-52页
     ·材料与试剂第51-52页
       ·供试材料第51页
       ·主要化学试剂第51页
       ·植物组织培养基第51页
       ·卡那霉素对美丽胡枝子不定芽再生及试管苗生根的影响的处理方法第51-52页
       ·羧苄青霉素(Carb)对美丽胡枝子子叶节不定芽分化的影响第52页
       ·调查项目第52页
   ·结果与分析第52-54页
     ·卡那霉素和羧苄青霉素对美丽胡枝子子叶节不定芽分化的影响第52-53页
     ·卡那霉素和羧苄青霉素对美丽胡枝子子叶节增殖的影响第53页
     ·卡那霉素和羧苄青霉素对美丽胡枝子子叶节不定芽生根的影响第53-54页
   ·讨论第54-56页
5 Sac B基因对胡枝子的遗传转化第56-62页
   ·材料与方法第56-59页
     ·试验材料第56页
     ·菌种与质粒第56页
     ·主要化学试剂第56-57页
     ·培养基成分第57-58页
       ·农杆菌培养基(YEP培养基)第57页
       ·植物组织培养基第57-58页
     ·农杆菌的培养与转化步骤第58页
       ·菌种活化第58页
       ·转化程序第58页
     ·影响农杆菌转化效果的实验设计第58-59页
       ·乙酰丁香酮(AS)第58页
       ·菌液浓度第58-59页
       ·共培养时间第59页
   ·结果与分析第59-61页
     ·乙酰丁香酮(AS)对美丽胡枝子子叶节转化的影响第59页
     ·菌液浓度对美丽胡枝子转化的影响第59-60页
     ·共培养时间对美丽胡枝子转化的影响第60-61页
   ·讨论第61-62页
6 转基因植株的分子检测第62-70页
   ·材料与方法第62-66页
     ·实验材料第62页
     ·实验试剂第62页
     ·转化材料的PCR鉴定第62-64页
       ·DNA 的提取第62-63页
       ·聚合酶链式反应(PCR)检测第63-64页
     ·转化材料的RT-PCR鉴定第64-65页
       ·RNA的提取第64页
       ·RT-PCR(参考TaKaRa AMV kit3.0)第64-65页
       ·RT-PCR反应体系:第65页
       ·RT-PCR反应程序第65页
     ·PCR-Southem 分子杂交第65-66页
       ·DIG-DNA 探针的制备第65页
       ·DIG-DNA Labeling 反应第65页
       ·转模及DNA的固定第65-66页
       ·杂交步骤第66页
       ·洗模第66页
       ·显色反应第66页
   ·结果与分析第66-68页
     ·转基因美丽胡枝子的PCR鉴定第66-67页
     ·转基因美丽胡枝子的PCR-Southem鉴定第67-68页
     ·转基因美丽胡枝子的RT-PCR鉴定第68页
   ·讨论第68-70页
7 转Sac B基因美丽胡枝子的功能验证第70-74页
   ·材料与方法第70页
     ·实验材料第70页
     ·实验设计第70页
       ·美丽胡枝子组培苗对Nacl、PEG的耐性试验第70页
       ·NaCl胁迫下转基因美丽胡枝子生长状况及可溶性糖含量检测第70页
       ·PEG胁迫下转基因美丽胡枝子生长状况及可溶性糖含量检测第70页
       ·可溶性糖含量检测方法第70页
   ·结果分析第70-72页
     ·美丽胡枝子组培苗对Nacl、PEG的耐性试验第70-71页
     ·NaCl胁迫下转基因美丽胡枝子生长状况及可溶性糖含量检测第71页
     ·PEG胁迫下转基因美丽胡枝子生长状况及可溶性糖含量检测第71-72页
   ·讨论第72-74页
8 结论第74-76页
参考文献第76-86页
附图第86-89页
个人简介第89-90页
导师简介第90-91页
获得成果目录清单第91-92页
致谢第92页

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