摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
缩写词 | 第8-12页 |
1 文献综述 | 第12-28页 |
·胡枝子研究概况 | 第12-13页 |
·植物抗旱基因工程 | 第13-19页 |
·与植物抗旱相关的物质 | 第13-17页 |
·渗透调节物质,可溶性糖 | 第13-15页 |
·离子和水分通道蛋白 | 第15-16页 |
·Lea蛋白 | 第16-17页 |
·与植物抗旱性相关的调控元件和因子 | 第17-18页 |
·干旱胁迫信号的传导 | 第18页 |
·植物抗旱的基因工程应用 | 第18-19页 |
·果聚糖的生理作用及其合成关键酶基因工程 | 第19-22页 |
·果糖糖代谢的生理作用 | 第20-21页 |
·果聚糖与抗逆性 | 第21-22页 |
·Sac B基因工程 | 第22页 |
·豆科植物再生系统研究 | 第22-24页 |
·直接分化再生系统 | 第22-23页 |
·愈伤组织再生系统 | 第23页 |
·胚状体再生系统 | 第23页 |
·原生质体再生系统 | 第23-24页 |
·离体再生的影响因素 | 第24页 |
·本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
·本研究的总体思路 | 第25-28页 |
2 干旱胁迫条件下胡枝子渗透物质变化 | 第28-38页 |
·材料与方法 | 第28-29页 |
·实验材料 | 第28页 |
·干旱胁迫处理 | 第28页 |
·脯氨酸含量的测定 | 第28-29页 |
·取样 | 第28页 |
·测定 | 第28-29页 |
·可溶性糖含量的测定 | 第29页 |
·取样 | 第29页 |
·测定 | 第29页 |
·可溶性蛋白及热稳定蛋白提取及含量测定 | 第29页 |
·统计的数据与处理 | 第29页 |
·结果与分析 | 第29-35页 |
·干旱胁迫下胡枝子脯氨酸含量变化 | 第29-31页 |
·干旱胁迫下胡枝子可溶性糖含量变化 | 第31-32页 |
·干旱胁迫下胡枝子可溶性蛋白含量变化 | 第32-34页 |
·干旱胁迫下胡枝子热稳定蛋白含量变化 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35-38页 |
3 胡枝子再生系统的建立 | 第38-50页 |
·材料与方法 | 第38-41页 |
·供试材料及试剂 | 第38页 |
·处理方法 | 第38-39页 |
·MS_0基本培养基 | 第38页 |
·无菌苗的培养 | 第38页 |
·不定芽分化 | 第38页 |
·茎段增殖 | 第38-39页 |
·生根 | 第39页 |
·培养条件 | 第39页 |
·培养基配方设计 | 第39-41页 |
·美丽胡枝子子叶节分化培养基的筛选 | 第39页 |
·美丽胡枝子不定芽增殖培养基的筛选 | 第39-40页 |
·美丽胡枝子不定芽生根培养基的筛选 | 第40-41页 |
·数据的分析 | 第41页 |
·结果与分析 | 第41-48页 |
·6-BA,NAA,2,4-D对美丽胡枝子子叶节分化的影响 | 第41-44页 |
·6-BA,NAA对美丽胡枝子不定芽增殖的影响 | 第44-47页 |
·6-BA,NAA对美丽胡枝子不定芽生根的影响 | 第47-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
4 胡枝子抗生素敏感性试验 | 第50-56页 |
·材料与方法 | 第51-52页 |
·材料与试剂 | 第51-52页 |
·供试材料 | 第51页 |
·主要化学试剂 | 第51页 |
·植物组织培养基 | 第51页 |
·卡那霉素对美丽胡枝子不定芽再生及试管苗生根的影响的处理方法 | 第51-52页 |
·羧苄青霉素(Carb)对美丽胡枝子子叶节不定芽分化的影响 | 第52页 |
·调查项目 | 第52页 |
·结果与分析 | 第52-54页 |
·卡那霉素和羧苄青霉素对美丽胡枝子子叶节不定芽分化的影响 | 第52-53页 |
·卡那霉素和羧苄青霉素对美丽胡枝子子叶节增殖的影响 | 第53页 |
·卡那霉素和羧苄青霉素对美丽胡枝子子叶节不定芽生根的影响 | 第53-54页 |
·讨论 | 第54-56页 |
5 Sac B基因对胡枝子的遗传转化 | 第56-62页 |
·材料与方法 | 第56-59页 |
·试验材料 | 第56页 |
·菌种与质粒 | 第56页 |
·主要化学试剂 | 第56-57页 |
·培养基成分 | 第57-58页 |
·农杆菌培养基(YEP培养基) | 第57页 |
·植物组织培养基 | 第57-58页 |
·农杆菌的培养与转化步骤 | 第58页 |
·菌种活化 | 第58页 |
·转化程序 | 第58页 |
·影响农杆菌转化效果的实验设计 | 第58-59页 |
·乙酰丁香酮(AS) | 第58页 |
·菌液浓度 | 第58-59页 |
·共培养时间 | 第59页 |
·结果与分析 | 第59-61页 |
·乙酰丁香酮(AS)对美丽胡枝子子叶节转化的影响 | 第59页 |
·菌液浓度对美丽胡枝子转化的影响 | 第59-60页 |
·共培养时间对美丽胡枝子转化的影响 | 第60-61页 |
·讨论 | 第61-62页 |
6 转基因植株的分子检测 | 第62-70页 |
·材料与方法 | 第62-66页 |
·实验材料 | 第62页 |
·实验试剂 | 第62页 |
·转化材料的PCR鉴定 | 第62-64页 |
·DNA 的提取 | 第62-63页 |
·聚合酶链式反应(PCR)检测 | 第63-64页 |
·转化材料的RT-PCR鉴定 | 第64-65页 |
·RNA的提取 | 第64页 |
·RT-PCR(参考TaKaRa AMV kit3.0) | 第64-65页 |
·RT-PCR反应体系: | 第65页 |
·RT-PCR反应程序 | 第65页 |
·PCR-Southem 分子杂交 | 第65-66页 |
·DIG-DNA 探针的制备 | 第65页 |
·DIG-DNA Labeling 反应 | 第65页 |
·转模及DNA的固定 | 第65-66页 |
·杂交步骤 | 第66页 |
·洗模 | 第66页 |
·显色反应 | 第66页 |
·结果与分析 | 第66-68页 |
·转基因美丽胡枝子的PCR鉴定 | 第66-67页 |
·转基因美丽胡枝子的PCR-Southem鉴定 | 第67-68页 |
·转基因美丽胡枝子的RT-PCR鉴定 | 第68页 |
·讨论 | 第68-70页 |
7 转Sac B基因美丽胡枝子的功能验证 | 第70-74页 |
·材料与方法 | 第70页 |
·实验材料 | 第70页 |
·实验设计 | 第70页 |
·美丽胡枝子组培苗对Nacl、PEG的耐性试验 | 第70页 |
·NaCl胁迫下转基因美丽胡枝子生长状况及可溶性糖含量检测 | 第70页 |
·PEG胁迫下转基因美丽胡枝子生长状况及可溶性糖含量检测 | 第70页 |
·可溶性糖含量检测方法 | 第70页 |
·结果分析 | 第70-72页 |
·美丽胡枝子组培苗对Nacl、PEG的耐性试验 | 第70-71页 |
·NaCl胁迫下转基因美丽胡枝子生长状况及可溶性糖含量检测 | 第71页 |
·PEG胁迫下转基因美丽胡枝子生长状况及可溶性糖含量检测 | 第71-72页 |
·讨论 | 第72-74页 |
8 结论 | 第74-76页 |
参考文献 | 第76-86页 |
附图 | 第86-89页 |
个人简介 | 第89-90页 |
导师简介 | 第90-91页 |
获得成果目录清单 | 第91-92页 |
致谢 | 第92页 |