| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-22页 |
| ·玉米粗缩病的研究概况 | 第10-13页 |
| ·玉米粗缩病发病概况 | 第10页 |
| ·玉米粗缩病发病症状及危害 | 第10页 |
| ·病原、寄主和传播方式 | 第10-12页 |
| ·玉米粗缩病抗性研究 | 第12页 |
| ·玉米粗缩病抗性鉴定方法 | 第12-13页 |
| ·RNAi在植物中的应用研究 | 第13-17页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第13-14页 |
| ·RNAi在抗病毒中的优势 | 第14-15页 |
| ·RNAi在抗病毒中的应用 | 第15-16页 |
| ·RNAi高效表达载体的构建 | 第16-17页 |
| ·农杆菌介导玉米遗传转化的研究 | 第17-21页 |
| ·农杆菌介导转化的机理 | 第17-18页 |
| ·影响农杆菌介导转化玉米的主要因素 | 第18-20页 |
| ·玉米转化受体系统的研究 | 第20-21页 |
| ·本研究的意义和主要内容 | 第21-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-40页 |
| ·实验材料 | 第22-25页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌株、质粒和引物 | 第22页 |
| ·酶和试剂 | 第22页 |
| ·培养基和抗生素 | 第22-25页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第25-34页 |
| ·目的基因片段的选取和合成 | 第25-26页 |
| ·正向和反向目的片段的获得 | 第26-29页 |
| ·正向目的片段插入到中间载体 | 第29-30页 |
| ·反向目的片段插入到重组子 | 第30-31页 |
| ·RNAi载体的构建 | 第31-34页 |
| ·表达载体转化农杆菌 | 第34-35页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第34页 |
| ·RNAi载体转化到农杆菌感受态细胞 | 第34页 |
| ·阳性菌株的鉴定 | 第34-35页 |
| ·玉米茎尖生长点原位转化 | 第35-36页 |
| ·受体材料的准备 | 第35页 |
| ·农杆菌培养及浸染液制备 | 第35页 |
| ·侵染及培养 | 第35-36页 |
| ·除草剂临界浓度筛选 | 第36页 |
| ·抗性植株筛选与移栽 | 第36页 |
| ·农杆菌介导转化玉米愈伤组织 | 第36-38页 |
| ·玉米胚性愈伤组织的获得 | 第36页 |
| ·农杆菌培养及浸染液制备 | 第36页 |
| ·浸染及共培养 | 第36-37页 |
| ·洗菌及恢复培养 | 第37页 |
| ·抗性愈伤的筛选 | 第37页 |
| ·抗性愈伤的分化与植株再生 | 第37-38页 |
| ·愈伤组织选择压的确定 | 第38页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第38-40页 |
| ·T_0代转基因植株的PCR检测 | 第38-40页 |
| ·T_1代转基因植株的PCR检测 | 第40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-53页 |
| ·目的基因片段的选择 | 第40-41页 |
| ·载体的构建 | 第41-48页 |
| ·MRDV CP基因303 bp反向重复序列中间载体和表达载体 | 第41-43页 |
| ·RBSDV CP基因452 bp反向重复序列中间载体和表达载体 | 第43-46页 |
| ·RBSDV 291 bp反向重复序列中间载体和表达载体 | 第46-48页 |
| ·农杆菌生长曲线的确定 | 第48页 |
| ·农杆菌介导玉米茎尖生长点的转化 | 第48-50页 |
| ·农杆菌菌浓度的影响 | 第48-49页 |
| ·临界浓度和植株抗性筛选 | 第49页 |
| ·抗性植株PCR检测结果 | 第49-50页 |
| ·农杆菌介导玉米愈伤组织的转化 | 第50-53页 |
| ·农杆菌浸染时间的影响 | 第50-51页 |
| ·Basta对愈伤组织的影响 | 第51页 |
| ·不同浓度的头孢霉素Cef对农杆菌的抑制效果 | 第51-52页 |
| ·ABT和IBA对生根的影响 | 第52-53页 |
| ·抗性愈伤组织的获得 | 第53页 |
| 4 讨论 | 第53-56页 |
| ·农杆菌侵染愈伤的时间 | 第53-54页 |
| ·RNAi载体构建 | 第54-55页 |
| ·筛选剂Basta的使用浓度 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
