1.前言 | 第1-24页 |
·高等植物的启动子研究概况 | 第9-21页 |
·启动子的概念 | 第9页 |
·启动子的种类 | 第9-10页 |
·启动子克隆的意义 | 第10-11页 |
·植物启动子的结构特点 | 第11-13页 |
·转录起始位点 | 第11页 |
·TATA框 | 第11-12页 |
·CAAT盒 | 第12页 |
·GC框 | 第12页 |
·其它元件 | 第12-13页 |
·启动子的研究、应用概况 | 第13-21页 |
·启动子克隆的主要方法 | 第13-15页 |
·利用启动子探针质粒载体筛选启动子 | 第13-14页 |
·利用PCR技术克隆启动子 | 第14-15页 |
·启动子的研究、应用概况 | 第15-21页 |
·组成型启动子的研究和应用 | 第15-17页 |
·组织特异型启动子的研究与应用 | 第17-18页 |
·诱导型启动子的研究与应用 | 第18-20页 |
·双向启动子、可变启动子和串联启动子的研究与应用 | 第20-21页 |
·水稻分蘖发生机理研究的概况 | 第21-22页 |
·水稻分蘖发生的时期 | 第21页 |
·水稻分蘖发生的一般规律 | 第21-22页 |
·水稻分蘖的分子机理研究 | 第22页 |
·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
·本研究的技术路线 | 第23-24页 |
2.材料与方法 | 第24-37页 |
·材料与试剂 | 第24页 |
·植物材料 | 第24页 |
·质粒载体及菌种 | 第24页 |
·试剂 | 第24页 |
·方法 | 第24-37页 |
·水稻日本晴基因组DNA的提取 | 第24-25页 |
·扩增MOCl基因5’端761bp启动子区域 | 第25-30页 |
·扩增MOCl基因5’端880bp启动子区域 | 第25-29页 |
·引物设计 | 第25页 |
·PCR扩增 | 第25页 |
·PCR产物回收 | 第25-26页 |
·回收产物与P~(MD)-18T载体连接 | 第26页 |
·连接产物转化大肠杆菌 | 第26-29页 |
·测序 | 第29页 |
·从MOCP2-T-27中扩增761bp启动子序列 | 第29-30页 |
·引物设计 | 第29页 |
·PER扩增 | 第29-30页 |
·PCR产物回收 | 第30页 |
·回收产物与P~(MD)-18T载体连接 | 第30页 |
·连接产物转化大肠杆菌 | 第30页 |
·测序 | 第30页 |
·扩增MOCl基因5’端1961bp启动子区域 | 第30-32页 |
·扩增MOCl基因5’端2052bp启动子区域 | 第30-31页 |
·引物设计 | 第30页 |
·PCR扩增 | 第30-31页 |
·从扩增的MOCl基因5’端2052bp启动子产物中扩增1961bp启动子序列 | 第31-32页 |
·引物设计 | 第31页 |
·PCR扩增 | 第31-32页 |
·PCR产物回收 | 第32页 |
·回收产物MOCP6与P~(MD)-18T载体连接 | 第32页 |
·连接产物转化大肠杆菌 | 第32页 |
·测序 | 第32页 |
·水稻MOCl启动子表达载体的构建 | 第32-34页 |
·761bp启动子表达载体的构建 | 第32-33页 |
·MOCP4-T-12与载体pCAMBIA1301质粒的提取 | 第32页 |
·MOCP4-T-12与载体pCAMBIA1301质粒酶切 | 第32-33页 |
·酶切产物回收 | 第33页 |
·酶切回收产物连接 | 第33页 |
·连接产物转化大肠杆菌 | 第33页 |
·1961bp启动子表达载体的构建 | 第33-34页 |
·MOCP6-T-1与载体pCAMBIA1301质粒的提取 | 第33页 |
·MOCP6-T-1与载体pCAMBIA1301质粒酶切 | 第33页 |
·酶切产物回收 | 第33页 |
·酶切回收产物连接 | 第33-34页 |
·连接产物转化大肠杆菌 | 第34页 |
·启动子表达载体质粒的大量提取和纯化 | 第34-35页 |
·GUS基因瞬时表达检测 | 第35-37页 |
·质粒的准备 | 第35页 |
·胶乳的准备及GUS基因的体外表达 | 第35-37页 |
3.结果与分析 | 第37-54页 |
·水稻“日本晴”基因组DNA的提取 | 第37页 |
·扩增MOCl基因5’端761bp启动子区域 | 第37-40页 |
·扩增MOCl基因5’端880bp启动子区域 | 第37-39页 |
·从MOCP2-T-27中扩增761bp启动子序列 | 第39-40页 |
·扩增MOCl基因5’端1961bp启动子区域 | 第40-49页 |
·水稻MOCl启动子表达载体的构建 | 第49-50页 |
·GUS基因在胶乳中诱导瞬时表达检测 | 第50-54页 |
·矮壮素诱导的实验结果 | 第50-51页 |
·多效唑诱导的实验结果 | 第51页 |
·GA_3诱导的实验结果 | 第51-52页 |
·NAA诱导的实验结果 | 第52页 |
·KT诱导的实验结果 | 第52-54页 |
·IAA、2,4-D、ABA、乙醇诱导的实验结果 | 第54页 |
4.讨论 | 第54-56页 |
·MOCl启动子的克隆 | 第54-55页 |
·MOCl启动子顺式作用元件分析 | 第55页 |
·嵌合载体在胶乳中表达 | 第55-56页 |
5.结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
附录 | 第67-68页 |