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水稻MOC1基因启动子的克隆与诱导物的筛选

1.前言第1-24页
   ·高等植物的启动子研究概况第9-21页
     ·启动子的概念第9页
     ·启动子的种类第9-10页
     ·启动子克隆的意义第10-11页
     ·植物启动子的结构特点第11-13页
       ·转录起始位点第11页
       ·TATA框第11-12页
       ·CAAT盒第12页
       ·GC框第12页
       ·其它元件第12-13页
     ·启动子的研究、应用概况第13-21页
       ·启动子克隆的主要方法第13-15页
         ·利用启动子探针质粒载体筛选启动子第13-14页
         ·利用PCR技术克隆启动子第14-15页
       ·启动子的研究、应用概况第15-21页
         ·组成型启动子的研究和应用第15-17页
         ·组织特异型启动子的研究与应用第17-18页
         ·诱导型启动子的研究与应用第18-20页
         ·双向启动子、可变启动子和串联启动子的研究与应用第20-21页
   ·水稻分蘖发生机理研究的概况第21-22页
     ·水稻分蘖发生的时期第21页
     ·水稻分蘖发生的一般规律第21-22页
     ·水稻分蘖的分子机理研究第22页
   ·本研究的目的和意义第22-23页
   ·本研究的技术路线第23-24页
2.材料与方法第24-37页
   ·材料与试剂第24页
     ·植物材料第24页
     ·质粒载体及菌种第24页
     ·试剂第24页
   ·方法第24-37页
     ·水稻日本晴基因组DNA的提取第24-25页
     ·扩增MOCl基因5’端761bp启动子区域第25-30页
       ·扩增MOCl基因5’端880bp启动子区域第25-29页
         ·引物设计第25页
         ·PCR扩增第25页
         ·PCR产物回收第25-26页
         ·回收产物与P~(MD)-18T载体连接第26页
         ·连接产物转化大肠杆菌第26-29页
         ·测序第29页
       ·从MOCP2-T-27中扩增761bp启动子序列第29-30页
         ·引物设计第29页
         ·PER扩增第29-30页
         ·PCR产物回收第30页
         ·回收产物与P~(MD)-18T载体连接第30页
         ·连接产物转化大肠杆菌第30页
         ·测序第30页
     ·扩增MOCl基因5’端1961bp启动子区域第30-32页
       ·扩增MOCl基因5’端2052bp启动子区域第30-31页
         ·引物设计第30页
         ·PCR扩增第30-31页
       ·从扩增的MOCl基因5’端2052bp启动子产物中扩增1961bp启动子序列第31-32页
         ·引物设计第31页
         ·PCR扩增第31-32页
       ·PCR产物回收第32页
       ·回收产物MOCP6与P~(MD)-18T载体连接第32页
       ·连接产物转化大肠杆菌第32页
       ·测序第32页
     ·水稻MOCl启动子表达载体的构建第32-34页
       ·761bp启动子表达载体的构建第32-33页
         ·MOCP4-T-12与载体pCAMBIA1301质粒的提取第32页
         ·MOCP4-T-12与载体pCAMBIA1301质粒酶切第32-33页
         ·酶切产物回收第33页
         ·酶切回收产物连接第33页
         ·连接产物转化大肠杆菌第33页
       ·1961bp启动子表达载体的构建第33-34页
         ·MOCP6-T-1与载体pCAMBIA1301质粒的提取第33页
         ·MOCP6-T-1与载体pCAMBIA1301质粒酶切第33页
         ·酶切产物回收第33页
         ·酶切回收产物连接第33-34页
         ·连接产物转化大肠杆菌第34页
     ·启动子表达载体质粒的大量提取和纯化第34-35页
     ·GUS基因瞬时表达检测第35-37页
       ·质粒的准备第35页
       ·胶乳的准备及GUS基因的体外表达第35-37页
3.结果与分析第37-54页
   ·水稻“日本晴”基因组DNA的提取第37页
   ·扩增MOCl基因5’端761bp启动子区域第37-40页
     ·扩增MOCl基因5’端880bp启动子区域第37-39页
     ·从MOCP2-T-27中扩增761bp启动子序列第39-40页
   ·扩增MOCl基因5’端1961bp启动子区域第40-49页
   ·水稻MOCl启动子表达载体的构建第49-50页
   ·GUS基因在胶乳中诱导瞬时表达检测第50-54页
     ·矮壮素诱导的实验结果第50-51页
     ·多效唑诱导的实验结果第51页
     ·GA_3诱导的实验结果第51-52页
     ·NAA诱导的实验结果第52页
     ·KT诱导的实验结果第52-54页
     ·IAA、2,4-D、ABA、乙醇诱导的实验结果第54页
4.讨论第54-56页
   ·MOCl启动子的克隆第54-55页
   ·MOCl启动子顺式作用元件分析第55页
   ·嵌合载体在胶乳中表达第55-56页
5.结论第56-57页
参考文献第57-66页
致谢第66-67页
附录第67-68页

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