| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-18页 |
| 前言 | 第18-27页 |
| 参考文献 | 第25-27页 |
| 第一部分 用于基因分析的无胶筛分毛细管电泳法的建立 | 第27-57页 |
| 1． 前言 | 第27-30页 |
| 2． 实验部分 | 第30-32页 |
| 2．1 仪器与试剂 | 第30-31页 |
| 2．2 毛细管内壁的处理 | 第31页 |
| 2．2．1 聚丙烯酰胺化学键合涂层柱的制备 | 第31页 |
| 2．2．2 未涂渍的毛细管的处理 | 第31页 |
| 2．3 筛分介质的配制 | 第31-32页 |
| 2．4 DNA片段的毛细管电泳分离 | 第32页 |
| 3． 结果与讨论 | 第32-49页 |
| 3．1 激光诱导荧光检测-毛细管电泳装置 | 第32-33页 |
| 3．2 检测装置性能优化 | 第33-34页 |
| 3．3 毛细管柱对分离的影响 | 第34-36页 |
| 3．4 筛分介质的浓度对分离的影响 | 第36-38页 |
| 3．5 电场强度对分离的影响 | 第38-39页 |
| 3．6 荧光嵌入剂溴化乙锭浓度对分离的影响 | 第39-40页 |
| 3．7 电泳温度对分离的影响 | 第40-42页 |
| 3．8 DNA在羟丙基甲基纤维素筛分介质中毛细管电泳迁移行为研究 | 第42-47页 |
| 3．9 电泳迁移时间重现性 | 第47-48页 |
| 3．10 DNA片段的定量 | 第48-49页 |
| 小结 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 第二部分 转基因大豆Roundup Ready的多重PCR-无胶筛分毛细管电泳检测方法研究 | 第57-90页 |
| 1 前言 | 第57-60页 |
| 2 实验部分 | 第60-64页 |
| 2．1 材料和方法 | 第60-62页 |
| 2．1．1 标准物质和样品 | 第60页 |
| 2．1．2 试剂 | 第60-61页 |
| 2．1．3 主要耗材和仪器 | 第61页 |
| 2．1．4 引物合成及PCR产物全序列测定 | 第61-62页 |
| 2．2 实验方法 | 第62-64页 |
| 2．2．1 多重PCR引物的选择原则 | 第62页 |
| 2．2．2 DNA提取和浓度测定 | 第62-63页 |
| 2．2．2．1 DNA提取 | 第62-63页 |
| 2．2．2．2 DNA浓度测定 | 第63页 |
| 2．2．3 多重PCR反应体系及反应条件 | 第63页 |
| 2．2．4 PCR产物的电泳分析 | 第63-64页 |
| 3 结果与讨论 | 第64-86页 |
| 3．1 样品DNA提取 | 第64-66页 |
| 3．2 引物的选择 | 第66-68页 |
| 3．2．1 转基因大豆Roundup Ready外源DNA序列信息 | 第66页 |
| 3．2．2 寡核苷酸引物的设计 | 第66-68页 |
| 3．3 多重PCR扩增体系的优化 | 第68-73页 |
| 3．3．1 退火温度的选择 | 第68-69页 |
| 3．3．2 不同引物对浓度的选择 | 第69-71页 |
| 3．3．3 Mg~(2+)浓度选择 | 第71-73页 |
| 3．4 PCR产物片段长度的确定 | 第73-74页 |
| 3．5 方法性能指标 | 第74-80页 |
| 3．5．1 多重PCR扩增结果序列分析 | 第74-76页 |
| 3．5．2 方法特异性 | 第76-77页 |
| 3．5．3 方法检测限 | 第77-80页 |
| 3．6 实际样品检测 | 第80-86页 |
| 3．6．1 多重PCR-无胶筛分毛细管电泳法检测 | 第80-82页 |
| 3．6．1．1 快速筛选 | 第80-82页 |
| 3．6．1．2 半定量分析 | 第82页 |
| 3．6．2 实时荧光定量PCR检测 | 第82-86页 |
| 参考文献 | 第86-90页 |
| 第三部分 转基因玉米MON810的多重PCR-无胶筛分毛细管电泳检测方法研究 | 第90-121页 |
| 1． 前言 | 第90-91页 |
| 2． 材料与方法 | 第91-92页 |
| 2．1 材料 | 第91-92页 |
| 2．1．1 标准物质和样品 | 第91页 |
| 2．1．2 试剂 | 第91页 |
| 2．1．3 仪器和主要耗材 | 第91页 |
| 2．1．4 引物合成及PCR产物全序列测定 | 第91-92页 |
| 2．2 方法 | 第92页 |
| 2．2．1 多重PCR引物的选择原则 | 第92页 |
| 2．2．2 DNA提取和浓度测定 | 第92页 |
| 2．2．3 多重PCR反应体系及反应条件 | 第92页 |
| 2．2．4 PCR产物的电泳分析 | 第92页 |
| 3． 结果与讨论 | 第92-119页 |
| 3．1 样品DNA提取 | 第92-93页 |
| 3．2 引物的选择 | 第93-100页 |
| 3．3 多重PCR扩增体系的优化 | 第100-119页 |
| 3．3．1 退火温度的选择 | 第100-103页 |
| 3．3．2 不同引物对浓度的选择 | 第103-105页 |
| 3．3．3 Mg~(2+)浓度选择 | 第105-108页 |
| 3．4 方法性能指标 | 第108-115页 |
| 3．4．1 方法准确度 | 第108-109页 |
| 3．4．2 方法特异性 | 第109-112页 |
| 3．4．3 方法检测限 | 第112-115页 |
| 3．5 实际样品检测 | 第115-119页 |
| 3．5．1 多重PCR-无胶筛分毛细管电泳法检测 | 第115-117页 |
| 3．5．1．1 快速检测 | 第115-116页 |
| 3．5．1．2 半定量分析 | 第116-117页 |
| 3．5．2 实时荧光定量PCR检测 | 第117-119页 |
| 小结 | 第119页 |
| 参考文献 | 第119-121页 |
| 综述 转基因食品的检测和定量技术 | 第121-147页 |
| 1 引言 | 第121-123页 |
| 2 检测方法和定量技术的发展 | 第123-142页 |
| 2．1 DNA分析方法 | 第123-135页 |
| 2．1．1 DNA提取方法 | 第124-125页 |
| 2．1．2 PCR(Polymerase Chain Reaction)检测 | 第125-127页 |
| 2．1．3 检测限(Limit of Detection，LOD) | 第127-128页 |
| 2．1．4 转基因定性PCR检测 | 第128-130页 |
| 2．1．5 转基因定量PCR检测 | 第130-134页 |
| 2．1．5．1 QC-PCR | 第131页 |
| 2．1．5．2 实时PCR | 第131-134页 |
| 2．1．6 PCR指纹图谱分析 | 第134-135页 |
| 2．1．7 质谱检测PCR产物 | 第135页 |
| 2．2 蛋白分析 | 第135-137页 |
| 2．2．1 免疫分析 | 第136-137页 |
| 2．2．1．1 原理 | 第136-137页 |
| 2．2．1．2 缺点 | 第137页 |
| 2．3 转基因检测其它技术 | 第137-142页 |
| 2．3．1 色谱法 | 第137-138页 |
| 2．3．2 近红外光谱 | 第138页 |
| 2．3．3 微流控装置和基因芯片分析DNA | 第138-141页 |
| 2．3．4 纳米级转基因分析 | 第141-142页 |
| 参考文献 | 第142-147页 |
| 致谢 | 第147-148页 |
