摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1 番茄花叶病毒的研究进展 | 第11-13页 |
·病毒的基因组结构 | 第11-12页 |
·病毒编码的各蛋白的功能 | 第12-13页 |
2 植物病毒编码的蛋白与寄主相关因子的相互作用 | 第13-16页 |
·外壳蛋白与寄主因子的相互作用 | 第13-14页 |
·运动蛋白与寄主的相互作用 | 第14-16页 |
·复制酶与寄主因子的相互作用 | 第16页 |
3 酵母双杂交技术在植物病毒学研究中的应用 | 第16-19页 |
4 双分子荧光互补技术在植物病毒学研究中的应用 | 第19-21页 |
5 研究的目的及意义 | 第21-23页 |
第二章 番茄花叶病外壳蛋白与烟草FdⅠ互作区域及互作特异性分析 | 第23-33页 |
1 材料与方法 | 第24-27页 |
·材料 | 第24页 |
·方法 | 第24-25页 |
·酵母双杂交的高效转化 | 第25-27页 |
2 结果分析 | 第27-30页 |
·烟草FdⅠ蛋白的二级结构预测 | 第27页 |
·烟草FdⅠ基因3个功能域的PCR扩增 | 第27-28页 |
·烟草FdⅠ基因3个功能域的克隆 | 第28页 |
·烟草FdⅠ基因3个功能域酵母表达载体的构建 | 第28页 |
·酵母双杂交验证FdⅠ与烟草ToMV CP间的互作 | 第28-29页 |
·酵母双杂交确定ToMV CP与烟草FdⅠ互作部位 | 第29-30页 |
·酵母双杂交分析CMV CP、PVY CP、TRV CP、TMV CP与烟草FdⅠ的互作情况 | 第30页 |
3 讨论 | 第30-33页 |
第三章 ToMV CP与烟草FdⅠ及IP-L在烟草体内的互作分析 | 第33-43页 |
1 材料和方法 | 第34-37页 |
·材料 | 第34页 |
·方法 | 第34-37页 |
·BiFc载体的构建 | 第34-37页 |
2 结果与分析 | 第37-41页 |
·BiFc表达载体的构建 | 第37-38页 |
·重组质粒转化农杆菌 | 第38-39页 |
·农杆菌渗透注射烟草 | 第39-40页 |
·FdⅠ和ToMV CP在烟草体内的互作分析 | 第40-41页 |
3 结论与讨论 | 第41-43页 |
第四章 烟草IP-L原核表达及多抗体制备 | 第43-59页 |
1 材料和方法 | 第43-54页 |
·实验材料 | 第43-44页 |
·实验方法 | 第44-54页 |
2 结果与分析 | 第54-57页 |
·IP-L扩增和原核表达载体的构建 | 第54页 |
·GST-IP-L融合蛋白的诱导表达及表达产物的SDS-PAGE分析 | 第54-55页 |
·GST-IP-L融合蛋白的诱导条件的优化 | 第55-56页 |
·GST-IP-L融合蛋白的纯化 | 第56-57页 |
·抗血清的制备、效价测定和特异性检测 | 第57页 |
3 结论与讨论 | 第57-59页 |
第五章 总结与展望 | 第59-61页 |
1 结论 | 第59页 |
2 本研究的创新点 | 第59-60页 |
3 有待进一步研究的问题 | 第60-61页 |
·烟草FdⅠ还需进行进一步的缺失、突变 | 第60页 |
·ToMV CP和FdⅠ互作的生物学效应研究 | 第60页 |
·ToMV CP与IP-L共定位分析以及互作的影响 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
附录A 本论文所用病毒缩写及中英文对照 | 第69-71页 |
附录B 本论文所用缩写词及中英文对照 | 第71-73页 |
附录C 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第73-75页 |
附录D 常用试剂的配制 | 第75-79页 |
致谢 | 第79-81页 |
在学期间发表和已录用论文及参加课题 | 第81页 |