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玉米木质素合成相关基因在干旱胁迫下的差异表达

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 文献综述第11-35页
   ·植物耐旱的主要机理第11-17页
     ·渗透调节作用第12页
     ·抗氧化防御系统第12-13页
     ·干旱胁迫诱导产生响应蛋白第13-16页
       ·调控蛋白第13-14页
       ·功能蛋白第14-16页
     ·生物膜的修复第16页
     ·代谢途径的改变第16-17页
   ·木质素的研究第17-21页
     ·木质素的功能第17-18页
     ·木质素单体的生物合成第18-21页
       ·单体合成的起始反应第19页
       ·羟基化反应第19页
       ·甲基化反应第19-20页
       ·连接反应第20-21页
       ·还原反应第21页
     ·木质素合成的调控第21页
   ·蛋白质组学研究第21-24页
     ·蛋白质组学的研究方法第22-24页
       ·二维聚丙烯酰胺凝胶电泳第22-23页
       ·蛋白质鉴定的质谱方法第23页
       ·蛋白质的生物信息学分析第23-24页
   ·实时荧光定量PCR第24-28页
     ·目标基因的定量方法第25页
     ·实时荧光定量PCR常见方法第25-27页
     ·实时荧光定量PCR在植物研究中的应用第27-28页
   ·全长cDNA的扩增方法第28-35页
     ·cDNA文库筛选法第28-29页
     ·cDNA末端快速扩增法(RACE)第29-31页
       ·RACE的原理第29-30页
       ·传统RACE的改良第30-31页
     ·电子克隆第31-33页
       ·EST技术的原理和方法第31-32页
       ·电子序列的延伸第32-33页
     ·获得cDNA全长的其他方法第33-35页
2 材料和方法第35-46页
   ·玉米叶片差异蛋白的分析第35-41页
     ·选材及模拟干旱处理第35页
     ·蛋白质样品的提取第35页
     ·样品的浓度测定第35-36页
     ·单向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第36-37页
       ·凝胶的制备第36-37页
       ·电泳及染色方法第37页
     ·蛋白质的二维电泳第37-39页
       ·第一向IEF电泳第37-38页
       ·第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第38-39页
     ·双向电泳图谱分析第39-40页
     ·蛋白质点的切取及酶解第40页
       ·考马斯亮蓝染色凝胶的脱色第40页
       ·酶切第40页
     ·蛋白的质谱鉴定第40页
     ·蛋白质数据库检索第40-41页
     ·电子克隆第41页
   ·CAD和COMT基因mRNA表达差异的定量PCR检测第41-44页
     ·总RNA提取及纯度检测第41-42页
     ·引物设计与合成第42页
     ·cDNA第一链合成第42-43页
     ·定量标准品的制备第43页
     ·PCR反应及分析第43-44页
   ·耐旱性鉴定与叶片木质素含量测定第44-46页
     ·田间耐旱性鉴定第44页
     ·叶片木质素含量测定第44-46页
3 结果与分析第46-55页
   ·玉米叶片差异蛋白的分析第46-51页
     ·干旱诱导产生的蛋白第46-48页
     ·干旱诱导蛋白的匹配蛋白第48-49页
     ·干旱诱导蛋白的编码基因第49-51页
   ·CAD和COMT基因mRNA表达差异第51-53页
     ·CAD基因第51-52页
     ·COMT基因第52-53页
   ·第53-55页
     ·自交系间耐旱性差异第53-54页
     ·各自交系叶片木质素含量及其与耐旱性的关系第54-55页
4 讨论第55-62页
   ·CAD、CYP450和SAMS的生理功能第55-57页
   ·CAD、CYP450和SAMS在木质素合成中的作用第57页
   ·木质素与玉米耐旱关系第57-58页
   ·关于蛋白质双向电泳技术的改进建议第58-62页
     ·提取方法的改进对玉米叶片总蛋白的样品浓度的影响第58页
     ·蛋白质浓度测定体系改进对标准曲线和测定结果的影响第58-60页
     ·不同丙烯酰胺浓度对蛋白质分辨率的影响第60页
     ·两种方法提取的蛋白质样品双向电泳效果比较第60页
     ·技术关键第60-62页
     ·差异标准的制定第62页
结语第62-63页
参考文献第63-68页
致谢第68页

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