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逆境应答基因OsHSP81和OsCaMBP的克隆与分析

中文摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
第一章 文献综述第14-46页
 1.选择性剪接研究综述第14-31页
   ·选择性剪接研究进展第14-25页
     ·选择性剪接的综合分析技术第14-15页
     ·选择性剪接复杂性分析第15-18页
     ·进化对选择性剪接频率的影响第18页
     ·选择性剪接在功能上的重要意义第18-19页
     ·基因组中的选择性剪接研究第19-20页
     ·选择性剪接网络第20-23页
     ·调控选择性剪接中的编码序列第23-24页
     ·剪接调控与人类疾病第24-25页
   ·选择性剪接在植物逆境基因表达调控中的研究进展第25-30页
     ·信号传导层面的选择性剪接第26-29页
     ·植物抗病基因的选择性剪接第29-30页
   ·结论及展望第30-31页
 2.热激蛋白90在植物中的研究第31-38页
   ·植物生长中的HSP90研究进展第31-33页
   ·HSP90与抗病性第33-36页
   ·HSP90在表型变异中的缓冲作用第36-37页
   ·结论及展望第37-38页
 3.钙调素结合蛋白在植物中的研究第38-45页
   ·CaMBP和CaM结合特性第39页
   ·CaMBP参与的生物学反应第39-44页
     ·植物发育第39-40页
     ·代谢调节第40-41页
     ·细胞骨架功能第41页
     ·激素反应第41-42页
     ·逆境胁迫反应第42-43页
     ·离子吸收第43页
     ·防御反应第43-44页
     ·转录调控第44页
   ·结论及展望第44-45页
 4.本研究的目的和意义第45-46页
第二章 荧光差异显示及逆境(低温)相关基因克隆第46-54页
 1.引言第46-47页
 2.材料与方法第47-50页
   ·植物材料第47页
   ·菌株和质粒第47页
   ·主要培养基第47-48页
   ·主要试剂第48页
   ·主要仪器设备第48页
   ·方法第48-50页
 3.结果与分析第50-52页
   ·RNA质量检测第50-51页
   ·荧光差异显示结果第51页
   ·差异片段亚克隆第51-52页
   ·差异片段测序及同源性分析第52页
 4.讨论第52-54页
第三章 水稻选择性剪接基因OsHSP81功能分析第54-106页
 1 水稻OsHSP81基因的全长cDNA克隆第54-65页
   ·引言第54页
   ·材料与方法第54-57页
     ·植物材料第54-55页
     ·菌株和质粒第55页
     ·主要培养基第55页
     ·主要试剂第55页
     ·主要仪器设备第55页
     ·方法第55-57页
   ·结果与分析第57-63页
     ·OsHSP81基因的克隆及其推测氨基酸序列分析第57-60页
     ·OsHSP81基因选择性剪接的发现第60-61页
     ·OsHSP81-S基因选择性剪接的序列及结构分析第61-63页
   ·讨论第63-65页
 2 水稻OsHSP81基因在不同逆境下选择性剪接模式及表达分析第65-73页
   ·引言第65-66页
   ·材料与方法第66-68页
     ·植物材料第66页
     ·主要试剂第66页
     ·主要仪器设备第66页
     ·方法第66-68页
   ·结果与分析第68-71页
     ·OsHSP81选择性剪接生物信息学分析和逆转录验证第68-69页
     ·OsHSP81和OsHSP81-S不同逆境下选择性剪接诱导表达情况第69-71页
   ·讨论第71-73页
 3 水稻OsHSP81和OsHSP81-S融合蛋白表达及酶活性测定第73-84页
   ·引言第73-74页
   ·材料与方法第74-77页
     ·菌株及质粒第74页
     ·主要试剂及内切酶第74页
     ·主要仪器设备第74页
     ·方法第74-77页
   ·结果与分析第77-82页
     ·融合蛋白的诱导及条件优化第77-78页
     ·融合蛋白的纯化第78-79页
     ·融合蛋白含量测定第79-81页
     ·ATPase酶活性测定第81-82页
   ·讨论第82-84页
 4 水稻OsHSP81和OsHSP81-S的相互作用蛋白研究第84-97页
   ·引言第84-85页
   ·材料与方法第85-90页
     ·菌株和质粒第85-86页
     ·主要培养基第86页
     ·主要试剂及内切酶第86页
     ·主要仪器设备第86页
     ·方法第86-90页
   ·结果与分析第90-94页
     ·cDNA文库的构建第90页
     ·pGBKT7-OsHSP81和pGBKT7-OsHSP81-S重组载体的构建第90页
     ·pGBKT7-OsHSP81和pGBKT7-OsHSP81-S转录活性检测第90-91页
     ·酵母双杂交筛选与OsHSP81和OsHSP81-S相互作用蛋白第91-93页
     ·相互作用蛋白验证第93-94页
   ·讨论第94-97页
 5 水稻OsHSP81和OsHSP81-S转基因载体构建及转化第97-106页
   ·引言第97页
   ·材料与方法第97-102页
     ·植物材料第97页
     ·菌株和质粒第97-98页
     ·主要培养基第98-99页
     ·主要试剂第99页
     ·主要仪器设备第99页
     ·方法第99-102页
   ·结果与分析第102-104页
     ·过量表达正义及反义载体的构建第102页
     ·绿色荧光蛋白载体的构建第102-104页
     ·RNAi载体的构建第104页
     ·农杆菌法转化水稻愈伤组织及植株再生第104页
   ·讨论第104-106页
第四章 水稻钙调素结合蛋白OsCaMBP基因的克隆及表达分析第106-119页
 1 水稻OsCaMBP基因的全长cDNA克隆第106-114页
   ·引言第106-107页
   ·材料与方法第107-108页
     ·植物材料第107页
     ·菌株和质粒第107页
     ·主要培养基第107页
     ·主要试剂第107页
     ·主要仪器设备第107页
     ·方法第107-108页
   ·结果与分析第108-112页
     ·cDNA克隆及序列分析第108-110页
     ·钙调素结合蛋白氨基酸序列相似性分析第110-111页
     ·OsCaMBP基因选择性剪接的发现第111-112页
   ·讨论第112-114页
 2 水稻OsCaMBP基因在不同逆境下的表达分析第114-119页
   ·引言第114页
   ·材料与方法第114-116页
     ·植物材料第114-115页
     ·主要试剂第115页
     ·主要仪器设备第115页
     ·方法第115-116页
   ·结果与分析第116页
     ·OsCaMBP在不同逆境下的表达情况第116页
   ·讨论第116-119页
第五章 综合结论及创新之处第119-121页
附录第121-124页
参考文献第124-135页
致谢第135-136页
博士期间发表和待发表论文第136页

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