| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-17页 |
| 第一章 引言 | 第17-47页 |
| 1 双歧杆菌和乳杆菌分类鉴定研究进展 | 第17-25页 |
| ·双歧杆菌和乳杆菌在乳酸菌分类体系中的位置 | 第17-19页 |
| ·双歧杆菌和乳杆菌的形态及结构 | 第19页 |
| ·双歧杆菌和乳杆菌的生长条件及生化特性 | 第19页 |
| ·双歧杆菌和乳杆菌的分布特点 | 第19-23页 |
| ·双歧杆菌和乳杆菌鉴定技术 | 第23-25页 |
| ·染色和显微镜技术 | 第23页 |
| ·分离培养技术 | 第23页 |
| ·生理生化鉴定技术 | 第23-24页 |
| ·分子生物学鉴定技术 | 第24-25页 |
| 2 双歧杆菌和乳杆菌的主要生理作用 | 第25-28页 |
| ·营养作用 | 第25-26页 |
| ·提高蛋白质的可消化性 | 第25-26页 |
| ·提供婴幼儿神经系统发育所需的半乳糖 | 第26页 |
| ·提高钙、磷等矿物质的利用率 | 第26页 |
| ·维护肠内B 族维生素的稳定性 | 第26页 |
| ·保健和疾病预防作用 | 第26-28页 |
| ·维持肠道菌群生态平衡，抑制病原菌的生长繁殖 | 第26-27页 |
| ·降低胆固醇的含量，防治心血管疾病 | 第27页 |
| ·分解乳糖，治疗乳糖消化不耐症 | 第27页 |
| ·激活免疫系统，抵抗感染 | 第27页 |
| ·延缓细胞衰老，促进延年益寿 | 第27页 |
| ·清除体内致病物质，防治肿瘤 | 第27-28页 |
| 3 双歧杆菌和乳杆菌制品的研究进展 | 第28-30页 |
| ·双歧杆菌制品 | 第28-29页 |
| ·以双歧杆菌活菌为主的制品 | 第28页 |
| ·以双歧杆菌促进因子为主的保健食品 | 第28页 |
| ·双歧杆菌和双歧因子配合的合生元制剂 | 第28-29页 |
| ·乳杆菌制品 | 第29-30页 |
| ·乳杆菌食品 | 第29页 |
| ·乳杆菌保健品 | 第29-30页 |
| 4 双歧杆菌和乳杆菌的耐药性研究进展 | 第30-45页 |
| ·耐药谱的研究进展 | 第30-31页 |
| ·耐药方式和机理的研究进展 | 第31-38页 |
| ·主动外排系统介导的耐药性研究 | 第32页 |
| ·多重耐药转运系统介导的耐药性研究 | 第32-33页 |
| ·膜通透性改变诱导的耐药性研究 | 第33页 |
| ·酶介导的耐药性研究 | 第33-34页 |
| ·靶位改变产生的耐药性研究 | 第34-35页 |
| ·质粒介导的耐药性研究 | 第35-38页 |
| ·对氟喹诺酮类抗菌药产生耐药性的研究进展 | 第38-41页 |
| ·氟喹诺酮类抗菌药 | 第38-39页 |
| ·拓扑异构酶基因突变介导的耐药机制 | 第39-40页 |
| ·主动外排系统介导的耐药机制 | 第40-41页 |
| ·几种耐药基因检测技术概述 | 第41-45页 |
| ·荧光 PCR 检测点突变 | 第41页 |
| ·SYBY GREEN I 结合熔解曲线分析点突变 | 第41-42页 |
| ·荧光共振能量转移结合探针熔解曲线分析点突变 | 第42-43页 |
| ·反向限制性位点突变分析 | 第43页 |
| ·基因芯片技术 | 第43-44页 |
| ·等位基因特异性扩增技术 | 第44页 |
| ·PCR-ELISA 结合测序检测点突变 | 第44-45页 |
| 5 课题方案设计 | 第45页 |
| 6 课题研究的目的与意义 | 第45-47页 |
| 第二章 奶牛源性双歧杆菌和乳杆菌的分离鉴定及生物学特性研究 | 第47-71页 |
| 1 材料 | 第47-50页 |
| ·样品来源 | 第47页 |
| ·质控菌株 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·实验动物 | 第47页 |
| ·试剂与药品 | 第47-48页 |
| ·PCR 引物 | 第48页 |
| ·溶液配制 | 第48-49页 |
| ·仪器设备 | 第49-50页 |
| 2 方法 | 第50-57页 |
| ·乳犊牛粪便的采集 | 第50页 |
| ·试验菌株的筛选 | 第50页 |
| ·双歧杆菌和植物乳杆菌试验菌株的分离纯化及保存 | 第50页 |
| ·试验菌株形态、生化鉴定及特性研究 | 第50-53页 |
| ·常规鉴定试验 | 第50页 |
| ·细胞壁成份分析 | 第50-52页 |
| ·乳酸和醋酸的气相色谱法色谱分析 | 第52-53页 |
| ·试验菌株的其它生物学特性研究 | 第53-54页 |
| ·试验菌株的生长特性 | 第53页 |
| ·试验菌株耐胆盐试验 | 第53页 |
| ·试验菌株对人工胃液和人工肠液耐受性试验 | 第53页 |
| ·试验菌株毒性实验 | 第53-54页 |
| ·试验菌株 PCR 鉴定 | 第54-56页 |
| ·不同引物的PCR 条件 | 第54-55页 |
| ·菌种制备及DNA 的提取 | 第55页 |
| ·PCR 扩增 | 第55-56页 |
| ·PCR 产物电泳检测 | 第56页 |
| ·试验菌株165RRNA 序列分析 | 第56-57页 |
| ·试验菌株的总DNA 的提取 | 第56页 |
| ·试验菌株165RDNA 序列测定及序列分析 | 第56-57页 |
| 3 结果 | 第57-67页 |
| ·双歧杆菌和乳杆菌的分离 | 第57页 |
| ·试验菌株形态、生化及生物学特性鉴定结果 | 第57-61页 |
| ·试验菌株菌体形态及菌落形态观察 | 第57-59页 |
| ·试验菌株属的鉴定 | 第59-60页 |
| ·试验菌株种的鉴定 | 第60-61页 |
| ·其它生物学特性试验 | 第61-63页 |
| ·生长特性研究结果 | 第61-62页 |
| ·耐人工胃液和肠液的试验结果 | 第62-63页 |
| ·试验菌株毒性实验结果 | 第63页 |
| ·PCR 鉴定 | 第63-64页 |
| ·16SRRNA 序列分析 | 第64-67页 |
| 4 讨论 | 第67-69页 |
| ·关于试验菌株生化鉴定 | 第67-69页 |
| ·关于试验菌株的分子生物学鉴定 | 第69页 |
| 5 小结 | 第69-71页 |
| 第三章 奶牛源性双歧杆菌和乳杆菌的耐药性研究 | 第71-90页 |
| 1 材料 | 第71-72页 |
| ·试验菌株与对照菌株 | 第71页 |
| ·试剂与抗菌药品 | 第71页 |
| ·培养基 | 第71页 |
| ·供试菌液的制备 | 第71页 |
| ·抗菌药物原液的配制 | 第71-72页 |
| ·仪器设备 | 第72页 |
| ·数据处理 | 第72页 |
| 2 方法 | 第72-73页 |
| ·分离菌株对12 种抗菌药的耐药性试验 | 第72-73页 |
| ·对喹诺酮类药物耐药试验菌株的筛选 | 第73页 |
| 3 结果 | 第73-87页 |
| ·分离菌株对12 种抗菌药的耐药性 | 第73-85页 |
| ·12 种抗菌药对分离菌株的抑菌直径 | 第73-75页 |
| ·分离菌株对12 种抗菌药的敏感性 | 第75-77页 |
| ·分离菌株对12 种抗菌药的耐药率 | 第77页 |
| ·不同浓度的抗菌药对试验菌株的抑菌直径 | 第77-81页 |
| ·试验菌株的耐药程度 | 第81-85页 |
| ·试验菌株对3 种氟喹诺酮类药物的耐药性 | 第85-87页 |
| ·3 种喹诺酮类对试验菌株的最小抑菌浓度 | 第85页 |
| ·3 种喹诺酮类对试验菌株的抑菌直径 | 第85-87页 |
| 4 讨论 | 第87-88页 |
| ·试验菌株对12 种抗菌药的耐药性分析 | 第87-88页 |
| ·试验菌株对3 种氟喹诺酮类药物的耐药性分析 | 第88页 |
| 5 小结 | 第88-90页 |
| 第四章 奶牛源性双歧杆菌和乳杆菌对氟喹诺酮类耐药机理的研究 | 第90-102页 |
| 1 材料 | 第90-92页 |
| ·试验菌株与对照菌株 | 第90页 |
| ·抗菌药品 | 第90页 |
| ·试剂 | 第90-91页 |
| ·溶液配制 | 第91-92页 |
| ·主要仪器设备 | 第92页 |
| ·数据处理 | 第92页 |
| 2 方法 | 第92-95页 |
| ·试验菌株的质粒研究 | 第92-93页 |
| ·试验菌株质粒的提取 | 第92-93页 |
| ·试验菌株质粒的琼脂糖凝胶电泳 | 第93页 |
| ·耐氟喹诺酮类试验菌株主动外排系统的测定试验 | 第93-94页 |
| ·耐氟喹诺酮类试验菌株Ⅱ型拓扑异构酶QRDR 基因突变的测定试验 | 第94-95页 |
| ·供试菌液的制备 | 第94页 |
| ·试验菌株DNA 的提取 | 第94页 |
| ·试验菌株DNA 旋转酶gyrA 基因QRDR 突变的测定 | 第94-95页 |
| 3 结果 | 第95-100页 |
| ·质粒提取结果 | 第95-96页 |
| ·主动外排系统证实试验结果 | 第96-97页 |
| ·试验菌株DNA 旋转酶gyrA 基因QRDR 的测定 | 第97-100页 |
| ·试验菌株DNA 旋转酶gyrA 基因片段的PCR 产物电泳结果 | 第97页 |
| ·试验菌株gyrA 基因QRDR 的测序结果 | 第97-98页 |
| ·试验菌株与相关菌株gyrA 基因QRDR 特征比较结果 | 第98-100页 |
| 4 讨论 | 第100-101页 |
| ·关于试验菌株的耐药质粒 | 第100页 |
| ·关于试验菌株主动外排系统确证试验 | 第100页 |
| ·关于耐氟喹诺酮类药物试验菌株gyrA 基因QRDR 突变分析 | 第100-101页 |
| 5 小结 | 第101-102页 |
| 第五章 全文讨论 | 第102-110页 |
| 第六章 全文结论 | 第110-111页 |
| 主要创新之处 | 第111-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 参考文献 | 第113-126页 |
| 附录 | 第126-133页 |
| 附录1 试验菌株对小鼠重要器官组织形态学的影响 | 第126-128页 |
| 附录2 牛津杯法使用的抗生素及药物敏感性标准 | 第128-129页 |
| 附录3 试验菌株16SRDNA 的序列 | 第129-133页 |
| 作者简介 | 第133页 |
