| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-14页 |
| 前言 | 第14-25页 |
| CL 检测方法的研究进展 | 第14页 |
| 半抗原的合成及与蛋白质的偶联 | 第14-18页 |
| 消减免疫 | 第18-19页 |
| 杂交瘤技术 | 第19-20页 |
| 酶联免疫吸附分析法(ELISA)的原理 | 第20-25页 |
| 第一章 CL 完全抗原合成及动物免疫 | 第25-33页 |
| 1 材料 | 第25页 |
| 2 方法 | 第25-27页 |
| ·重氮化法合成CL 完全抗原 | 第25-26页 |
| ·重氮化法合成CL 完全抗原步骤 | 第25-26页 |
| ·CL 完全抗原合成鉴定 | 第26页 |
| ·动物消减免疫 | 第26-27页 |
| ·免疫方法 | 第26-27页 |
| ·检测小鼠血清抗体获得情况 | 第27页 |
| 3 结果 | 第27-31页 |
| ·抗原合成鉴定结果 | 第27-28页 |
| ·动物免疫 | 第28-31页 |
| ·小鼠耐受免疫阶段 | 第28-29页 |
| ·耐受后免疫阶段 | 第29-30页 |
| ·用消减免疫法免疫的小鼠与用常规免疫法免疫的小鼠获得抗体情况比较 | 第30-31页 |
| 4 讨论 | 第31-32页 |
| ·抗原合成 | 第31-32页 |
| ·偶联效果的初步判定 | 第31页 |
| ·结合比 | 第31页 |
| ·关于完全抗原构建中载体蛋白的偶联剂修饰残基问题 | 第31-32页 |
| ·动物免疫 | 第32页 |
| 5 小结 | 第32-33页 |
| 第二章 细胞融合及杂交瘤细胞株的建立 | 第33-46页 |
| 1 材料 | 第33-35页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33页 |
| ·细胞及动物 | 第33页 |
| ·细胞培养液及主要相关溶液配制 | 第33-35页 |
| ·细胞培养液等的配制 | 第33-34页 |
| ·ELISA 用液的配制 | 第34页 |
| ·Giemsa 染液配方 | 第34-35页 |
| 2 方法 | 第35-40页 |
| ·细胞融合 | 第35-38页 |
| ·骨髓瘤细胞系的选择 | 第35页 |
| ·骨髓瘤细胞的复苏 | 第35页 |
| ·骨髓瘤细胞的培养 | 第35页 |
| ·骨髓瘤细胞的传代 | 第35页 |
| ·饲养细胞的制备 | 第35-36页 |
| ·骨髓瘤细胞的制备 | 第36页 |
| ·免疫脾细胞悬液的制备 | 第36-37页 |
| ·脾细胞与骨髓瘤细胞融合 | 第37页 |
| ·融合细胞的培养 | 第37-38页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第38-39页 |
| ·最佳筛选条件的确立 | 第38页 |
| ·山羊抗小鼠IgG-HRP 抗体工作浓度的确定 | 第38页 |
| ·抗原和阳性对照血清最适稀释度的确定 | 第38页 |
| ·间接竞争ELISA 筛选阳性杂交瘤细胞 | 第38页 |
| ·细胞融合率、杂交瘤细胞阳性率计算 | 第38-39页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的有限稀释法克隆 | 第39页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第39-40页 |
| ·细胞染色体分析 | 第40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-43页 |
| ·酶标二抗工作浓度的确定 | 第40页 |
| ·抗原和阳性对照血清最适稀释度确定 | 第40-41页 |
| ·细胞融合及杂交瘤细胞筛选及克隆 | 第41-42页 |
| ·杂交瘤细胞染色体分析结果 | 第42-43页 |
| ·杂交瘤细胞冻存与复苏 | 第43页 |
| 4 讨论 | 第43-45页 |
| ·骨髓瘤细胞系的选择 | 第43页 |
| ·关于细胞融合及融合细胞选择性培养 | 第43-44页 |
| ·关于饲养细胞 | 第44页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆 | 第44页 |
| ·关于细胞污染问题 | 第44-45页 |
| 5 小结 | 第45-46页 |
| 第三章 克伦特罗单克隆抗体生产、纯化及性质鉴定 | 第46-61页 |
| 1 材料 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·仪器 | 第46页 |
| ·动物 | 第46页 |
| 2 方法 | 第46-54页 |
| ·CL 单克隆抗体生产 | 第46-47页 |
| ·腹水型单克隆抗体的生产 | 第46-47页 |
| ·杂交瘤上清生产单抗 | 第47页 |
| ·杂交瘤上清和腹水单克隆抗体浓度的测定 | 第47页 |
| ·腹水的纯化 | 第47-50页 |
| ·盐析 | 第47-49页 |
| ·硫酸铵沉淀步骤 | 第47-48页 |
| ·SDS-PAGE 实验 | 第48页 |
| ·间接竞争 ELISA 法测定抗体活性 | 第48-49页 |
| ·免疫亲和层析柱纯化抗体 | 第49-50页 |
| ·单克隆抗体的保存 | 第50页 |
| ·CL 单克隆抗体的性质鉴定 | 第50-51页 |
| ·间接 ELISA 测定单克隆抗体的亲和常数 | 第50-51页 |
| ·单克隆抗体效价的测定 | 第51页 |
| ·抗体特异性的测定 | 第51-52页 |
| ·单克隆抗体与 BSA 的交叉反应 | 第51-52页 |
| ·与几种结构类似物的交叉反应 | 第52页 |
| ·Western-blot 实验 | 第52-53页 |
| ·Western blot 所用缓冲液的配制 | 第52页 |
| ·Western blot 实验流程 | 第52-53页 |
| ·标准曲线确定 | 第53-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-59页 |
| ·杂交瘤上清和腹水单克隆抗体浓度的测定 | 第54页 |
| ·抗 CL 单克隆抗体纯化结果 | 第54-56页 |
| ·腹水盐析后SDS-PAGE 结果 | 第54-55页 |
| ·腹水盐析后抗体活性（效价）测定结果 | 第55页 |
| ·免疫亲和层析柱纯化抗体后SDS-PAGE 结果 | 第55-56页 |
| ·免疫亲和层析柱纯化抗体后抗体活性鉴定 | 第56页 |
| ·细胞上清及腹水纯化前后抗体效价 | 第56-57页 |
| ·单克隆抗体亲和常数 | 第57页 |
| ·抗体特异性 | 第57-58页 |
| ·与BSA 的交叉反应 | 第57-58页 |
| ·Western-blot 实验 | 第58-59页 |
| ·标准曲线确定 | 第59页 |
| 4 讨论 | 第59-60页 |
| ·抗体纯化后活性降低的原因 | 第59-60页 |
| ·单克隆抗体的保存 | 第60页 |
| 5 小结 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-65页 |
| 论文综述 | 第65-71页 |
| 发表论文全文 | 第71-81页 |
| 个人简历 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |