| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-28页 |
| ·抗坏血酸过氧化物酶(APX)同工酶的酶学研究 | 第9-11页 |
| ·APX 同工酶的酶学特征 | 第9-10页 |
| ·APX 同工酶催化部位的结构研究 | 第10-11页 |
| ·高等植物中APX 同工酶的编码基因的研究 | 第11-15页 |
| ·APX 的核酸信息研究 | 第11-12页 |
| ·APX 组成结构特点 | 第12-13页 |
| ·APX 同工酶基因的表达调控 | 第13-14页 |
| ·APX 基因在异质系统的表达特征 | 第14-15页 |
| ·APX 同工酶的生物进化 | 第15-16页 |
| ·APX 同工酶对非生物胁迫的防御功能 | 第16-21页 |
| ·植物抗氧化胁迫的研究 | 第16-20页 |
| ·APX 抗氧化胁迫的机制 | 第20-21页 |
| ·农杆菌介导的植物遗传转化 | 第21-24页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化的原理 | 第22-23页 |
| ·植物表达载体pBI121 | 第23-24页 |
| ·农杆菌转化的优缺点 | 第24页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第24-25页 |
| ·本实验的技术路线 | 第25-28页 |
| 第2章 材料与方法 | 第28-47页 |
| ·实验材料 | 第28-33页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第28页 |
| ·各种酶制剂及试剂盒 | 第28页 |
| ·实验所需试剂及培养基的配制 | 第28-31页 |
| ·主要实验仪器 | 第31-32页 |
| ·实验所需引物序列 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-47页 |
| ·植物材料的培养及RNA 的提取 | 第33页 |
| ·水稻APX3，APX4 基因功能区序列的克隆 | 第33-37页 |
| ·正义及反义植物表达载体的构建 | 第37-42页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌DH5α及阳性克隆的筛选与鉴定 | 第42页 |
| ·电转化将植物正反义表达载体转化到根癌农杆菌中 | 第42-43页 |
| ·根癌农杆菌介导的模式植物烟草的遗传转化 | 第43-44页 |
| ·转基因再生植株的分子生物学检测 | 第44-45页 |
| ·水稻APX3、APX4 基因的生物信息学分析 | 第45-46页 |
| ·水稻APX3 与APX4 基因差异分析 | 第46-47页 |
| 第3章 结果与分析 | 第47-74页 |
| ·植物材料的培养及RNA 的提取 | 第47页 |
| ·水稻APX3，APX4 基因功能区序列的克隆 | 第47-50页 |
| ·RT-PCR 扩增APX3、APX4 基因ORF 片段 | 第47-48页 |
| ·目的基因APX3、APX4 的阳性克隆的鉴定 | 第48-50页 |
| ·正义及反义植物表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌 DH5α及阳性克隆的筛选与鉴定 | 第51-53页 |
| ·重组质粒阳性克隆的PCR 鉴定 | 第51-53页 |
| ·电转化将植物正反义表达载体转化到根癌农杆菌中 | 第53-55页 |
| ·阳性克隆的PCR 鉴定 | 第53-54页 |
| ·阳性克隆的质粒提取及质粒的PCR | 第54-55页 |
| ·根癌农杆菌介导的模式植物烟草的遗传转化 | 第55-57页 |
| ·烟草转基因再生体系的建立 | 第55-56页 |
| ·烟草的遗传转化 | 第56-57页 |
| ·转基因再生植株的分子生物学检测 | 第57-59页 |
| ·APX3 在转基因烟草基因组DNA 的PCR 鉴定 | 第57-58页 |
| ·APX4 在转基因烟草基因组DNA 的PCR 鉴定 | 第58-59页 |
| ·水稻APX3、APX4 基因的生物信息学分析 | 第59-74页 |
| ·水稻APX3 基因的生物信息学分析 | 第59-65页 |
| ·水稻APX4 基因的生物信息学分析 | 第65-71页 |
| ·水稻APX3 与APX4 基因差异分析 | 第71-74页 |
| 第4章 讨论 | 第74-77页 |
| ·RT-PCR 法克隆APX3、APX4 基因 | 第74页 |
| ·植物表达载体构建策略 | 第74-75页 |
| ·植物表达载体构建中的酶切问题 | 第75页 |
| ·烟草分化培养基的优化 | 第75-76页 |
| ·未来实验构想 | 第76-77页 |
| 结论 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 附录 | 第87-91页 |
| 致谢 | 第91-92页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第92页 |
