| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-46页 |
| ·紧密连接 | 第12-20页 |
| ·紧密连接的构成 | 第13-16页 |
| ·跨膜蛋白 | 第13-15页 |
| ·Claudins | 第13-14页 |
| ·Occludin | 第14页 |
| ·Tricellulin | 第14-15页 |
| ·单次跨膜蛋白 | 第15页 |
| ·胞质斑(The cytoplasmic plaque) | 第15-16页 |
| ·紧密连接的功能 | 第16-18页 |
| ·胞间通路的通透性 | 第16-18页 |
| ·细胞增殖，极化和分化 | 第18页 |
| ·紧密连接和疾病 | 第18-20页 |
| ·通透性损伤 | 第19-20页 |
| ·紧密连接蛋白成为病原菌的靶标 | 第20页 |
| ·粘性连接 | 第20-25页 |
| ·Cadherin | 第22-23页 |
| ·Cadherin-catenin 复合物 | 第23页 |
| ·cadherin 同nectin 的合作 | 第23-25页 |
| ·缝隙连接（通讯连接） | 第25-32页 |
| ·缝隙连接胞间通道的动态调节 | 第26-30页 |
| ·快速调节： | 第27-29页 |
| ·慢调节 | 第29-30页 |
| ·缝隙连接的总体功能 | 第30-32页 |
| 参考文献 | 第32-46页 |
| 第二章 ZO-1 蛋白第二个 PDZ 结构域的溶液结构和功能 | 第46-94页 |
| ·ZO-1 蛋白及PDZ 结构域介绍 | 第46-53页 |
| ·ZO-1 蛋白 | 第46-47页 |
| ·ZO‐1 蛋白的组成 | 第46页 |
| ·ZO‐1 蛋白的功能 | 第46-47页 |
| ·PDZ 结构域 | 第47-53页 |
| ·PDZ 结构域的结构 | 第47-49页 |
| ·PDZ 结构域与其配基复合物中配基的特点 | 第49-51页 |
| ·PDZ 结构域与其配基复合物中残基间的相互作用 | 第51-52页 |
| ·PDZ 蛋白的分类 | 第52-53页 |
| ·实验材料与方法 | 第53-74页 |
| ·目的基因的获得 | 第53-55页 |
| ·人ZO‐1?PDZ2 与ZO‐2?PDZ2 基因的获得 | 第53页 |
| ·人ZO‐3?PDZ2 基因的获得 | 第53-55页 |
| ·表达质粒的构建 | 第55-56页 |
| ·突变表达质粒的构建 | 第56-58页 |
| ·共表达菌株的构建 | 第58页 |
| ·重组蛋白的表达与纯化 | 第58-60页 |
| ·蛋白的表达 | 第58-59页 |
| ·蛋白的纯化 | 第59-60页 |
| ·蛋白质分子量的鉴定 | 第60-63页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS‐PAGE) | 第60-62页 |
| ·质谱 | 第62-63页 |
| ·快速液相色谱FPLC | 第63页 |
| ·超速离心AUC | 第63页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第63-64页 |
| ·Pull-down 实验 | 第64页 |
| ·细胞培养和转染 | 第64页 |
| ·免疫印迹 | 第64-65页 |
| ·免疫荧光（Immunofluorescence） | 第65页 |
| ·钙转换（Calcium switch）和跨细胞上皮电阻值(TER)的测量 | 第65页 |
| ·小肽的合成与纯化 | 第65页 |
| ·等温量热(ITC)实验 | 第65-66页 |
| ·NMR 化学位移扰动实验 | 第66-67页 |
| ·NMR 化学位移扰动实验 | 第66页 |
| ·实验结果分析 | 第66-67页 |
| ·NMR 结构测定 | 第67-74页 |
| ·NMR 实验 | 第67-70页 |
| ·NMR 数据处理 | 第70页 |
| ·NMR 谱峰认证 | 第70-72页 |
| ·二级结构预测 | 第72页 |
| ·结构计算 | 第72-74页 |
| ·实验结果和讨论 | 第74-88页 |
| ·Z01PDZ2 结构域的溶液结构解析 | 第74-88页 |
| ·Z01PDZ2 的化学位移认证 | 第74-75页 |
| ·Z01PDZ2 的溶液结构 | 第75-78页 |
| ·插入突变将Z01PDZ2 由二聚体突变成单体 | 第78-81页 |
| ·Z01PDZ2 与连接子蛋白Cx25, Cx40, Cx43, Cx45 和 Cx59 的相互作用 | 第81-83页 |
| ·Z01PD2i1155 结合Cx43CT | 第83-84页 |
| ·Z01PDZ 的突变体不能同Z01PDZ2 及Z02PDZ2 相互作用 | 第84页 |
| ·Z03PDZ2 同Z01PDZ2 及Z02PDZ2 相互作用 | 第84-85页 |
| ·Z01PDZ2 的结构域交换对于紧密连接的建立是必须的 | 第85-88页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 附录 核磁谱图解析方法 | 第94-122页 |
| 谱图处理 | 第94-100页 |
| 核磁滴定实验结果分析 | 第100-101页 |
| 主链认证 | 第101-107页 |
| 侧链认证 | 第107-110页 |
| NOESY 认证及结构计算 | 第110-117页 |
| ~(15)N 主链迟豫实验 | 第117-120页 |
| NMR 相关软件在linux 系统下的安装 | 第120-122页 |
| NMRPipe 安装 | 第120页 |
| Talos+安装 | 第120页 |
| csi2.0 安装 | 第120页 |
| 5parky 3.112 安装 | 第120页 |
| Chimera 安装 | 第120-121页 |
| CNS 1.2 安装 | 第121页 |
| Cyana 安装 | 第121页 |
| Procheck_NMR 安装 | 第121页 |
| Molmol2K2 安装 | 第121-122页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第122-124页 |
| 致谢 | 第124-126页 |
