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E2F1对MDM2-p53负反馈通路的影响

缩略语第1-13页
第一部分 文献综述第13-47页
   ·细胞凋亡及其信号转导第13-21页
     ·细胞凋亡的概念第13-14页
     ·细胞凋亡信号转导通路第14-21页
       ·外源性凋亡通路第14-17页
       ·内源性凋亡通路第17-21页
   ·E2F 家族蛋白极其研究现状第21-31页
     ·E2F 家族成员第22-26页
     ·cyclin-CDK-RB-E2F1 通路以及在癌症发生中的作用第26-28页
     ·E2F 蛋白家族与细胞增殖第28-29页
     ·E2F 蛋白家族与细胞凋亡第29-31页
   ·P53 蛋白极其研究现状第31-42页
     ·P53 的发现第31-34页
     ·P53 的基本结构第34-36页
     ·P53 的功能第36-38页
     ·P53 的翻译后修饰第38-41页
     ·MDM2-P53 负反馈调控通路第41-42页
   ·p53 与 E2F1 的相互影响第42-47页
     ·E2F1 与p53 通路的共同调控因子第42-44页
     ·E2F1 与P53 的相互影响第44-47页
第二部分 E2F1 抑制 MDM2 表达的能力依赖于p53第47-66页
 中文摘要第48-49页
 英文摘要第49-50页
   ·背景介绍第50-51页
   ·实验结果第51-60页
     ·E2F1 能够抑制MDM2 启动子活性第51-53页
     ·E2F1 能够结合到MDM2 启动子上第53-55页
     ·E2F1 抑制MDM2 启动子活性依赖于P53 的表达第55-58页
     ·DNA 损伤刺激下E2F1 抑制p53 对MDM2 启动子的激活第58-59页
     ·E2F1 通过抑制MDM2 促进细胞凋亡第59-60页
   ·实验讨论第60-66页
第三部分 p53 与其共转录激活因子 MYH9 的结合受到氧水平的调控第66-79页
 中文摘要第67-68页
 英文摘要第68-69页
   ·背景介绍第69-70页
   ·实验结果第70-76页
     ·MYH9 与P53 的结合受到氧浓度的调控第70-71页
     ·氧浓度对MYH9 与p53 的结合的调控并不是通过影响MYH9 蛋白水平或亚定位改变实现的第71-73页
     ·P53 与MYH9 在正常氧条件下在细胞核中结合第73页
     ·p53 与MYH9 蛋白N 端马达结构域结合第73-74页
     ·缺氧刺激诱导的P53 的磷酸化导致p53 与MYH9 的结合受到抑制第74-75页
     ·MYH9 作为一个 P53 的共转录激活因子调控 P53 转录活性第75-76页
   ·实验讨论第76-79页
第四部分 实验材料与方法第79-96页
   ·实验材料第79-81页
     ·试剂与抗体第79页
     ·质粒第79页
     ·引物第79-81页
   ·实验方法第81-96页
     ·质粒小量抽提第81页
     ·聚合酶链式反应第81-82页
     ·核酸凝胶电泳第82页
     ·从琼脂糖凝胶中回收目标DNA 片段第82-83页
     ·目的DNA 片段与载体连接第83页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第83页
     ·大肠杆菌感受态细胞转化第83-84页
     ·蛋白的原核表达第84页
     ·His-tag 融合蛋白的表达与纯化第84-85页
     ·SDS-PAGE 凝胶电泳第85-86页
     ·凝胶的考马斯亮蓝染色和脱色第86-87页
     ·Western Blotting第87-88页
     ·免疫共沉淀第88页
     ·细胞培养第88-89页
     ·细胞转染第89-91页
     ·染色质免疫共沉淀(ChIP)第91-92页
     ·细胞uv 照射第92页
     ·细胞缺氧处理第92页
     ·免疫荧光染色第92-93页
     ·流式细胞术第93页
     ·细胞凋亡率的测定第93-94页
     ·细胞核质分离第94页
     ·CIAP 酶处理细胞裂解液第94-96页
第五部分 参考文献第96-108页
致谢第108-109页
附录第109-111页
 攻读学位期间已发表及待发表的学术论文第109-110页
 学术论文复印件第110-111页

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