缩略语 | 第1-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-47页 |
·细胞凋亡及其信号转导 | 第13-21页 |
·细胞凋亡的概念 | 第13-14页 |
·细胞凋亡信号转导通路 | 第14-21页 |
·外源性凋亡通路 | 第14-17页 |
·内源性凋亡通路 | 第17-21页 |
·E2F 家族蛋白极其研究现状 | 第21-31页 |
·E2F 家族成员 | 第22-26页 |
·cyclin-CDK-RB-E2F1 通路以及在癌症发生中的作用 | 第26-28页 |
·E2F 蛋白家族与细胞增殖 | 第28-29页 |
·E2F 蛋白家族与细胞凋亡 | 第29-31页 |
·P53 蛋白极其研究现状 | 第31-42页 |
·P53 的发现 | 第31-34页 |
·P53 的基本结构 | 第34-36页 |
·P53 的功能 | 第36-38页 |
·P53 的翻译后修饰 | 第38-41页 |
·MDM2-P53 负反馈调控通路 | 第41-42页 |
·p53 与 E2F1 的相互影响 | 第42-47页 |
·E2F1 与p53 通路的共同调控因子 | 第42-44页 |
·E2F1 与P53 的相互影响 | 第44-47页 |
第二部分 E2F1 抑制 MDM2 表达的能力依赖于p53 | 第47-66页 |
中文摘要 | 第48-49页 |
英文摘要 | 第49-50页 |
·背景介绍 | 第50-51页 |
·实验结果 | 第51-60页 |
·E2F1 能够抑制MDM2 启动子活性 | 第51-53页 |
·E2F1 能够结合到MDM2 启动子上 | 第53-55页 |
·E2F1 抑制MDM2 启动子活性依赖于P53 的表达 | 第55-58页 |
·DNA 损伤刺激下E2F1 抑制p53 对MDM2 启动子的激活 | 第58-59页 |
·E2F1 通过抑制MDM2 促进细胞凋亡 | 第59-60页 |
·实验讨论 | 第60-66页 |
第三部分 p53 与其共转录激活因子 MYH9 的结合受到氧水平的调控 | 第66-79页 |
中文摘要 | 第67-68页 |
英文摘要 | 第68-69页 |
·背景介绍 | 第69-70页 |
·实验结果 | 第70-76页 |
·MYH9 与P53 的结合受到氧浓度的调控 | 第70-71页 |
·氧浓度对MYH9 与p53 的结合的调控并不是通过影响MYH9 蛋白水平或亚定位改变实现的 | 第71-73页 |
·P53 与MYH9 在正常氧条件下在细胞核中结合 | 第73页 |
·p53 与MYH9 蛋白N 端马达结构域结合 | 第73-74页 |
·缺氧刺激诱导的P53 的磷酸化导致p53 与MYH9 的结合受到抑制 | 第74-75页 |
·MYH9 作为一个 P53 的共转录激活因子调控 P53 转录活性 | 第75-76页 |
·实验讨论 | 第76-79页 |
第四部分 实验材料与方法 | 第79-96页 |
·实验材料 | 第79-81页 |
·试剂与抗体 | 第79页 |
·质粒 | 第79页 |
·引物 | 第79-81页 |
·实验方法 | 第81-96页 |
·质粒小量抽提 | 第81页 |
·聚合酶链式反应 | 第81-82页 |
·核酸凝胶电泳 | 第82页 |
·从琼脂糖凝胶中回收目标DNA 片段 | 第82-83页 |
·目的DNA 片段与载体连接 | 第83页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第83页 |
·大肠杆菌感受态细胞转化 | 第83-84页 |
·蛋白的原核表达 | 第84页 |
·His-tag 融合蛋白的表达与纯化 | 第84-85页 |
·SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第85-86页 |
·凝胶的考马斯亮蓝染色和脱色 | 第86-87页 |
·Western Blotting | 第87-88页 |
·免疫共沉淀 | 第88页 |
·细胞培养 | 第88-89页 |
·细胞转染 | 第89-91页 |
·染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第91-92页 |
·细胞uv 照射 | 第92页 |
·细胞缺氧处理 | 第92页 |
·免疫荧光染色 | 第92-93页 |
·流式细胞术 | 第93页 |
·细胞凋亡率的测定 | 第93-94页 |
·细胞核质分离 | 第94页 |
·CIAP 酶处理细胞裂解液 | 第94-96页 |
第五部分 参考文献 | 第96-108页 |
致谢 | 第108-109页 |
附录 | 第109-111页 |
攻读学位期间已发表及待发表的学术论文 | 第109-110页 |
学术论文复印件 | 第110-111页 |