| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 1 序言 | 第9-26页 |
| ·极端微生物简介 | 第9-11页 |
| ·极端微生物的主要生物类群 | 第9-10页 |
| ·嗜热微生物和嗜冷微生物 | 第9页 |
| ·嗜酸微生物和嗜碱微生物 | 第9-10页 |
| ·嗜盐微生物 | 第10页 |
| ·嗜压微生物 | 第10页 |
| ·极端微生物的应用 | 第10-11页 |
| ·嗜盐菌的研究概况 | 第11-16页 |
| ·嗜盐菌的定义和分类 | 第11-12页 |
| ·嗜盐菌栖息的盐域环境 | 第12页 |
| ·嗜盐古菌的研究历史 | 第12页 |
| ·中度嗜盐菌的研究历史 | 第12-13页 |
| ·嗜盐菌的研究热点 | 第13-16页 |
| ·嗜盐菌的分类学 | 第13页 |
| ·嗜盐菌的系统发育多样性 | 第13-14页 |
| ·嗜盐菌的应用 | 第14-16页 |
| ·嗜盐菌的生理学 | 第16页 |
| ·嗜盐微生物的盐适应机制 | 第16-23页 |
| ·通过提高胞质缓冲力来适应高盐环境 | 第17页 |
| ·次级钠泵系统 | 第17-23页 |
| ·大肠杆菌中的Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第17-20页 |
| ·耐盐菌和嗜盐菌中的Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第20-21页 |
| ·嗜碱菌中的Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第21页 |
| ·其它类型微生物中的Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第21-22页 |
| ·NhaD Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第22-23页 |
| ·Na~+/H~+逆向转运蛋白的应用前景 | 第23页 |
| ·微生物Na~+/H~+逆向转运蛋白亟待研究的问题 | 第23-24页 |
| ·本研究的指导思想、目的和意义 | 第24页 |
| ·本研究的技术路线 | 第24-26页 |
| 2 新疆达坂盐湖沉积土壤嗜盐细菌的多样性分析 | 第26-37页 |
| ·材料和方法 | 第26-31页 |
| ·样品的采集和处理 | 第26页 |
| ·主要仪器和实验用品 | 第26页 |
| ·菌株和载体 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·DNA提取试剂 | 第27页 |
| ·电泳相关缓冲液 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-31页 |
| ·嗜盐菌的定向富集 | 第27-28页 |
| ·总基因组DNA的提取与纯化 | 第28页 |
| ·DNA浓度和纯度的测定 | 第28页 |
| ·PCR反应体系和条件 | 第28-29页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第29页 |
| ·连接 | 第29-30页 |
| ·热激感受态的制备 | 第30页 |
| ·热激转化 | 第30页 |
| ·菌落PCR | 第30页 |
| ·DNA序列测定 | 第30页 |
| ·16S rRNA的系统发育分析 | 第30-31页 |
| ·核苷酸序列登录号 | 第31页 |
| ·结果与分析 | 第31-36页 |
| ·总基因组DNA的提取 | 第31页 |
| ·嗜盐富集培养物16S rRNA基因多样性及其系统发育分析 | 第31-36页 |
| ·嗜盐富集培养物16S rRNA基因系列扩增 | 第31-32页 |
| ·嗜盐富集培养物16S rRNA基因克隆文库的构建与多样性分析 | 第32-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 3 微生物钠离子输出相关基因的克隆与功能研究 | 第37-55页 |
| ·材料与方法 | 第37-43页 |
| ·样品的采集和处理 | 第37页 |
| ·菌株、质粒和引物 | 第37-38页 |
| ·主要仪器和实验用品 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·碱法提取质粒所需主要试剂 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-43页 |
| ·总基因组DNA提取、纯化及浓度测定 | 第38页 |
| ·总基因组DNA的部分酶切 | 第38-39页 |
| ·载体的酶切和去磷酸化 | 第39页 |
| ·载体与总基因组DNA部分酶切片段的连接 | 第39-40页 |
| ·连接产物纯化 | 第40页 |
| ·电转化感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| ·电激转化 | 第41页 |
| ·质粒的快速检测 | 第41页 |
| ·质粒提取 | 第41-42页 |
| ·钠离子输出相关基因的亚克隆 | 第42-43页 |
| ·基因序列的生物信息学分析 | 第43页 |
| ·重组子在不同条件下的生长能力测试 | 第43页 |
| ·结果和分析 | 第43-53页 |
| ·总基因组DNA的部分酶切 | 第43-44页 |
| ·阳性克隆子的筛选 | 第44页 |
| ·重组质粒携带外源基因的序列分析 | 第44-51页 |
| ·Na~+输出相关基因的亚克隆 | 第51-52页 |
| ·E.coli KNabc/pMDtetR-smrL的耐盐性实验 | 第52页 |
| ·E.coli KNabc/pMDtetR-smrL对碱性pH的抗性 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-65页 |
| 缩略词一览表 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 项目资助与论文发表情况 | 第67页 |
