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甘蓝型油菜中表达AtGA2ox8的表型分析及其对木质素生物合成的影响

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
目录第6-8页
第1章 绪论第8-18页
   ·甘蓝型油菜生物学特征第8页
   ·甘蓝型油菜分子生物学研究进展第8-9页
   ·植物赤霉素合成代谢及信号传导途径研究进展第9-13页
     ·植物赤霉素生物合成和代谢途径第9-11页
     ·赤霉素2-氧化酶基因的研究进展第11页
     ·AtGA2ox8基因的结构及蛋白质序列信息第11-12页
     ·植物赤霉素信号传导途径第12-13页
   ·木质素的研究概况第13-16页
     ·木质素分子生物学特征第13-14页
     ·木质素的生物合成途径第14-16页
     ·木质素生物合成的调控研究第16页
   ·本论文工作设想第16-18页
第2章 拟南芥赤霉素2氧化酶基因克隆及pEGAD-AtGA2ox8表达载体构建第18-26页
   ·材料与方法第18页
     ·实验材料与试剂第18页
       ·植物材料第18页
       ·菌株和质粒第18页
       ·酶和试剂第18页
   ·实验方法第18-24页
     ·材料处理第18-19页
     ·总RNA提取及去除基因组DNA第19页
     ·cDNA第一链的合成第19页
     ·质粒DNA的提取第19-20页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备第20-21页
     ·农杆菌感受态细胞制备第21页
     ·热激法转化大肠杆菌第21页
     ·冻融法转化大肠杆菌第21-22页
     ·电激法转化农杆菌第22页
     ·AtGA2ox8 CDS片段克隆第22-24页
   ·结果与讨论第24-26页
第3章 拟南芥赤霉素2氧化酶在甘蓝型油菜中表达及其表型分析第26-40页
   ·材料与方法第26-30页
     ·第26页
       ·植物材料第26页
       ·酶与试剂第26页
     ·实验方法第26-30页
       ·农杆菌介导的花序浸染遗传转化法第26-27页
       ·AtGA2ox8转基因油菜株系的筛选及检测第27页
       ·叶绿素及花青素含量测定方法第27-28页
       ·半定量RT-PCR(Semiquantitative RT-PCR)第28-29页
       ·Southern Bloting检测方法第29-30页
       ·不同光照下种子萌发实验方法第30页
   ·结果与分析第30-40页
     ·AtGA2ox8转基因株系筛选及Bar基因PCR鉴定第30-31页
     ·转基因油菜表达绿色荧光蛋白及GFP-PCR检测分析第31-32页
     ·RT-PCR检测分析AtGA2ox8在突变体中的表达量第32-33页
     ·AtGA2ox8基因在甘蓝型油菜中表达对叶绿素及花青素合成影响第33-35页
     ·AtGA2ox8基因对甘蓝型油菜籽萌发影响第35-36页
     ·AtGA2ox8对甘蓝型油菜表型特征和生物质积累的影响第36-40页
第4章 AtGA2ox8对木质素生物合成的影响第40-46页
   ·材料与方法第40-42页
     ·实验材料第40页
       ·植物材料第40页
       ·酶和试剂第40页
     ·实验方法第40-42页
         ·木质素含量测定第40-41页
       ·间苯三酚染色及组织切片制作方法第41页
       ·外源赤霉素GA_3处理方法第41页
       ·总RNA提取及cDNA的合成参照(2.2.2-2.2.3)第41页
       ·半定量RT-PCR第41-42页
   ·结果与分析第42-46页
       ·表达AtGA2ox8导致甘蓝型油菜中木质素含量降低第42-44页
     ·木质素生物合成途径中部分关键酶基因的表达量分析第44-46页
结论第46-48页
参考文献第48-52页
附录A 攻读硕士学位期间获奖情况及所发表的学术论文第52页
附录B 英文缩写词第52-54页
致谢第54页

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