摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
目录 | 第6-8页 |
第1章 绪论 | 第8-18页 |
·甘蓝型油菜生物学特征 | 第8页 |
·甘蓝型油菜分子生物学研究进展 | 第8-9页 |
·植物赤霉素合成代谢及信号传导途径研究进展 | 第9-13页 |
·植物赤霉素生物合成和代谢途径 | 第9-11页 |
·赤霉素2-氧化酶基因的研究进展 | 第11页 |
·AtGA2ox8基因的结构及蛋白质序列信息 | 第11-12页 |
·植物赤霉素信号传导途径 | 第12-13页 |
·木质素的研究概况 | 第13-16页 |
·木质素分子生物学特征 | 第13-14页 |
·木质素的生物合成途径 | 第14-16页 |
·木质素生物合成的调控研究 | 第16页 |
·本论文工作设想 | 第16-18页 |
第2章 拟南芥赤霉素2氧化酶基因克隆及pEGAD-AtGA2ox8表达载体构建 | 第18-26页 |
·材料与方法 | 第18页 |
·实验材料与试剂 | 第18页 |
·植物材料 | 第18页 |
·菌株和质粒 | 第18页 |
·酶和试剂 | 第18页 |
·实验方法 | 第18-24页 |
·材料处理 | 第18-19页 |
·总RNA提取及去除基因组DNA | 第19页 |
·cDNA第一链的合成 | 第19页 |
·质粒DNA的提取 | 第19-20页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第20-21页 |
·农杆菌感受态细胞制备 | 第21页 |
·热激法转化大肠杆菌 | 第21页 |
·冻融法转化大肠杆菌 | 第21-22页 |
·电激法转化农杆菌 | 第22页 |
·AtGA2ox8 CDS片段克隆 | 第22-24页 |
·结果与讨论 | 第24-26页 |
第3章 拟南芥赤霉素2氧化酶在甘蓝型油菜中表达及其表型分析 | 第26-40页 |
·材料与方法 | 第26-30页 |
· | 第26页 |
·植物材料 | 第26页 |
·酶与试剂 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-30页 |
·农杆菌介导的花序浸染遗传转化法 | 第26-27页 |
·AtGA2ox8转基因油菜株系的筛选及检测 | 第27页 |
·叶绿素及花青素含量测定方法 | 第27-28页 |
·半定量RT-PCR(Semiquantitative RT-PCR) | 第28-29页 |
·Southern Bloting检测方法 | 第29-30页 |
·不同光照下种子萌发实验方法 | 第30页 |
·结果与分析 | 第30-40页 |
·AtGA2ox8转基因株系筛选及Bar基因PCR鉴定 | 第30-31页 |
·转基因油菜表达绿色荧光蛋白及GFP-PCR检测分析 | 第31-32页 |
·RT-PCR检测分析AtGA2ox8在突变体中的表达量 | 第32-33页 |
·AtGA2ox8基因在甘蓝型油菜中表达对叶绿素及花青素合成影响 | 第33-35页 |
·AtGA2ox8基因对甘蓝型油菜籽萌发影响 | 第35-36页 |
·AtGA2ox8对甘蓝型油菜表型特征和生物质积累的影响 | 第36-40页 |
第4章 AtGA2ox8对木质素生物合成的影响 | 第40-46页 |
·材料与方法 | 第40-42页 |
·实验材料 | 第40页 |
·植物材料 | 第40页 |
·酶和试剂 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-42页 |
·木质素含量测定 | 第40-41页 |
·间苯三酚染色及组织切片制作方法 | 第41页 |
·外源赤霉素GA_3处理方法 | 第41页 |
·总RNA提取及cDNA的合成参照(2.2.2-2.2.3) | 第41页 |
·半定量RT-PCR | 第41-42页 |
·结果与分析 | 第42-46页 |
·表达AtGA2ox8导致甘蓝型油菜中木质素含量降低 | 第42-44页 |
·木质素生物合成途径中部分关键酶基因的表达量分析 | 第44-46页 |
结论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
附录A 攻读硕士学位期间获奖情况及所发表的学术论文 | 第52页 |
附录B 英文缩写词 | 第52-54页 |
致谢 | 第54页 |