| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 1. 引言 | 第14-32页 |
| ·原肠形态发生运动的模式 | 第14-16页 |
| ·形态发生运动的各种细胞运动方式 | 第14-15页 |
| ·脊椎动物形态发生运动的运动模式 | 第15-16页 |
| ·组织者的形成及在原肠形态发生和形体模式形成中的作用 | 第16-23页 |
| ·组织者的形成 | 第16-17页 |
| ·组织者在原肠形态发生和形体模式形成中的基因调控 | 第17-21页 |
| ·组织者在原肠形态发生和形体模式形成中的作用 | 第21-23页 |
| ·原肠形态发生运动的调控 | 第23-25页 |
| ·papc在原肠形态发生中的作用及机制 | 第25-26页 |
| ·flh对papc表达时空模式的调控及其在了解原肠形态发生运动中的意义 | 第26-27页 |
| ·vsx1对胚胎形体模式发育的影响 | 第27-29页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第29-32页 |
| 2. VSX1在flh启动子上作用位点的确定 | 第32-58页 |
| ·前言 | 第32-33页 |
| ·实验材料和方法 | 第33-50页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·溶液和试剂 | 第33-35页 |
| ·斑马鱼flh基因启动子的克隆 | 第35-39页 |
| ·不同长度的斑马鱼flh基因启动子控制的绿色荧光蛋白报告基因质粒的构建 | 第39-42页 |
| ·vsx1 capped mRNA的转录 | 第42-49页 |
| ·不同长度的flh启动子报告基因与vsx1 capped mRNA共注射 | 第49-50页 |
| ·实验结果 | 第50-55页 |
| ·VSX1可有效抑制flh启动子所控制的报告基因 | 第50-54页 |
| ·flh启动子上的TAATTG位点是VSX1或其下游基因编码的蛋白作用的特异位点 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| 3 VSX1直接结合flh启动子的体外证据 | 第58-88页 |
| ·前言 | 第58-59页 |
| ·材料和方法 | 第59-76页 |
| ·溶液和试剂 | 第59-62页 |
| ·pGEX4T-1+HD质粒的构建 | 第62-64页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第64页 |
| ·质粒的提取 | 第64页 |
| ·构建好的表达质粒转BL21及鉴定 | 第64页 |
| ·融合蛋白的诱导表达和SDS-PAGE检测 | 第64-66页 |
| ·表达的融合蛋白的可溶性分析 | 第66页 |
| ·GST+VSX1 HD融合蛋白的大量表达 | 第66-67页 |
| ·GST融合蛋白的纯化 | 第67-68页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第68-69页 |
| ·蛋白的鉴定 | 第69-71页 |
| ·凝胶阻滞实验原理和步骤 | 第71-76页 |
| ·实验结果 | 第76-84页 |
| ·包含VSX1 HD的多肽的诱导表达 | 第76-82页 |
| ·体外实验表明VSX1蛋白能够结合到flh启动子上 | 第82-84页 |
| ·讨论 | 第84-88页 |
| ·VSX1 HD 融合蛋白的表达 | 第84-86页 |
| ·EMSA凝胶阻滞分析 | 第86-88页 |
| 4 VSX1与flh启动子结合的体内证据 | 第88-126页 |
| ·前言 | 第88-89页 |
| ·材料和方法 | 第89-104页 |
| ·实验材料 | 第89页 |
| ·溶液和试剂 | 第89-93页 |
| ·表达质粒的构建 | 第93-96页 |
| ·诱导表达条件的选择和SDS-PAGE检测 | 第96-97页 |
| ·GST+VSX1 74AA与GST+VSX1 118AA融合蛋白可溶性分析 | 第97页 |
| ·GST+VSX1 74AA与GST+VSX1 118AA融合蛋白的大量表达 | 第97页 |
| ·GST+VSX1 74AA融合蛋白的纯化和透析 | 第97页 |
| ·GST+VSX1 118AA融合蛋白的纯化与透析 | 第97-98页 |
| ·免疫小鼠 | 第98-99页 |
| ·对照血清的制备 | 第99-100页 |
| ·抗体效价检测 | 第100页 |
| ·抗体特异性检测 | 第100-101页 |
| ·染色质免疫共沉淀 | 第101-104页 |
| ·实验结果 | 第104-121页 |
| ·成功制备了VSX1抗体 | 第104-117页 |
| ·体内分析表明VSX1作用于flh启动子包含TAATTG序列的位点上 | 第117-121页 |
| ·讨论 | 第121-125页 |
| ·VSX1蛋白表达片段的选择 | 第121-122页 |
| ·免疫前的抗原准备 | 第122页 |
| ·蛋白的纯化及应用 | 第122-123页 |
| ·抗体的特异性 | 第123页 |
| ·染色质免疫共沉淀分析ChIP | 第123-125页 |
| ·研究小结 | 第125-126页 |
| 5. 本研究的主要结论和进一步的研究设想 | 第126-128页 |
| 参考文献 | 第128-139页 |
| 作者简历 | 第139页 |
