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基于新一代测序技术的生后小鼠卵巢发育过程中基因表达谱变化的研究

中文摘要第1-11页
Abstract第11-14页
引言第14-16页
第一章 文献综述第16-51页
   ·哺乳动物卵巢发育的研究背景第16-26页
     ·卵巢的结构及功能第16-18页
     ·卵泡分类第18-19页
     ·卵泡发育第19-21页
     ·卵泡早期发育的分子调控第21-25页
       ·原始卵泡的生长启动不受下丘脑-垂体轴的直接调节第21页
       ·抗谬勒氏管激素对原始卵泡发育的调控第21-22页
       ·Kl和Kit对原始卵泡发育的调控第22-23页
       ·Gdf9对原始卵泡发育的调节第23页
       ·Bmp15和Bmp4对原始卵泡发育的调节第23-24页
       ·Fgf7对原始卵泡发育的调节第24页
       ·Nobox对原始卵泡发育的调控作用第24-25页
       ·Fox12对原始卵泡发育的调控作用第25页
     ·卵泡的后期发育及闭锁退化第25-26页
   ·小鼠卵巢转录组学研究第26-28页
   ·转录组学的研究方法第28-51页
     ·EST表达序列标签第28-32页
       ·EST技术的形成和发展第28-29页
       ·EST技术原理第29-30页
       ·EST技术的应用第30-32页
       ·EST技术的不足第32页
     ·DNA微阵列第32-35页
       ·基因芯片的工作原理第32-33页
       ·基因芯片的技术流程第33-35页
       ·基因芯片技术的应用第35页
       ·基因芯片的缺点第35页
     ·SAGE基因表达系列分析第35-39页
       ·SAGE的理论基础第36页
       ·SAGE的技术流程第36-38页
       ·SAGE的优点和应用第38-39页
     ·大规模平行信号测序系统第39-40页
     ·上述各技术间的优缺点比较第40-41页
     ·RNA-seq技术及其应用第41-51页
       ·新一代测序技术发展概况第43页
       ·SOLiD关键技术及其原理第43-50页
       ·SOLiD测序技术的应用第50-51页
第二章 材料与方法第51-62页
   ·实验材料第51页
   ·主要化学试剂第51-52页
   ·试剂盒第52页
   ·实验方法第52-59页
     ·实验材料的处理第52-53页
     ·RNA提取第53-54页
     ·核糖体RNA的去除第54-55页
     ·角SOLiD~(TM) Whole Transcriptome Analysis Kit构建文库第55-59页
       ·rm-RNA的杂交以及反转录,具体实验步骤如下第55-57页
       ·cDNA片段选择第57-58页
       ·目的片段的扩增第58-59页
     ·进行SOLiD上机建库前步骤第59页
   ·数据分析方法第59-62页
     ·SOLiD序列在基因组上的注释第59-60页
     ·可变剪切数据集的构建第60-61页
     ·基因表达谱分析第61页
     ·差异表达基因的确定及功能分类第61页
     ·转录因子在三文库中表达情况的分析第61-62页
第三章 结果第62-106页
   ·转录组文库的构建第62-63页
   ·RNA-SEQ数据的性质第63-65页
     ·测序质量的检测第63-64页
     ·测序数据的注释第64-65页
   ·基因表达谱的分析第65-74页
     ·三文库中表达基因数量及种类的变化第65-67页
     ·RPKM值的计算及修正第67-71页
     ·mRNA编码基因的表达谱分析第71-74页
   ·基因内含子区域表达的分析第74-79页
   ·基因可变剪切的分析第79-81页
   ·三个文库表达基因的功能分类第81-83页
   ·三个文库差异表达基因的研究第83-98页
     ·差异表达基因的功能分析第84-91页
       ·幼年期小鼠卵巢与青春期小鼠卵巢差异表达的基因第84-88页
       ·青春期与成年期小鼠卵巢差异表达的基因第88-91页
     ·差异表达基因在细胞信号通路上的变化第91-98页
       ·差异表达基因在类固醇激素合成通路上的定位第92-94页
       ·差异表达基因在细胞凋亡通路上的定位第94-95页
       ·差异表达基因在MAPK信号通路上的定位第95-98页
   ·转录因子在不同发育时期卵巢中的表达第98-106页
第四章 讨论及后续工作计划第106-111页
   ·RNA-SEQ在研究整体转录组中的应用第106-107页
   ·小鼠卵巢转录组的特点第107-108页
   ·三个发育时期卵巢差异表达基因的研究第108-109页
   ·本文创新点第109页
   ·后续工作计划第109-111页
参考文献第111-119页
英文缩略词第119-120页
附录第120-128页
致谢第128页

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