| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-25页 |
| 1.1 鲤春病毒血症病毒的简介 | 第10页 |
| 1.2 SVC的流行病学特征 | 第10-11页 |
| 1.3 SVCV的分子结构特征 | 第11-13页 |
| 1.3.1 SVCV的基因组结构和特征 | 第11-12页 |
| 1.3.2 SVCV致病机制 | 第12-13页 |
| 1.4 弹状病毒糖蛋白与宿主蛋白相互作用的研究 | 第13-14页 |
| 1.5 蛋白间相互作用的研究方法 | 第14-20页 |
| 1.5.1 检测未知相互作用蛋白方法 | 第15-18页 |
| 1.5.2 检测已知相互作用蛋白方法 | 第18-20页 |
| 1.6 14-3-3蛋白家族研究进展 | 第20-21页 |
| 1.7 14-3-3蛋白家族的功能 | 第21-25页 |
| 1.7.1 细胞周期和凋亡中的14-3-3蛋白 | 第21-24页 |
| 1.7.2 蛋白转运中的14-3-3蛋白 | 第24-25页 |
| 2 研究目的和意义 | 第25-26页 |
| 3 实验材料与方法 | 第26-40页 |
| 3.1 实验材料 | 第26-30页 |
| 3.1.1 质粒、菌株 | 第26页 |
| 3.1.2 细胞、毒株 | 第26页 |
| 3.1.3 主要药品及试剂 | 第26-27页 |
| 3.1.4 主要培养基及其配制 | 第27-28页 |
| 3.1.5 主要缓冲液及其配制 | 第28-29页 |
| 3.1.6 主要实验仪器和设备 | 第29-30页 |
| 3.1.7 主要使用的生物学分析软件 | 第30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-40页 |
| 3.2.1 FHM细胞的培养与转染 | 第30-32页 |
| 3.2.2 SVCV在FHM细胞的增殖和感染 | 第32页 |
| 3.2.3 细胞样品的收集方法 | 第32-33页 |
| 3.2.4 蛋白免疫共沉淀实验(Co-IP assay) | 第33页 |
| 3.2.5 蛋白银染实验 | 第33-34页 |
| 3.2.6 基因克隆与质粒构建 | 第34-35页 |
| 3.2.7 荧光定量PCR实验 | 第35-36页 |
| 3.2.8 蛋白免疫印迹实验(Western blotting) | 第36-37页 |
| 3.2.9 免疫荧光实验 | 第37-38页 |
| 3.2.10 空斑实验(Plaque assay) | 第38页 |
| 3.2.11 串联亲和纯化(TAP) | 第38-40页 |
| 4 实验结果 | 第40-56页 |
| 4.1 利用串联亲和纯化法(TAP)筛选与SVCVG蛋白相互作用的宿主蛋白 | 第40-41页 |
| 4.2 疑似SVCV G蛋白相互作用的宿主蛋白的质谱结果与分析 | 第41-45页 |
| 4.3 SVCV G蛋白相互作用的宿主蛋白的序列分析 | 第45-47页 |
| 4.4 宿主蛋白14-3-3β/α-A的基因克隆与真核表达 | 第47-49页 |
| 4.5 SVCV G蛋白与宿主蛋白相互作用的验证 | 第49-51页 |
| 4.6 SVCV感染FHM细胞对14-3-3β/α-A有降解作用 | 第51-52页 |
| 4.7 过表达14-3-3β/α-A会促进SVCV对FHM细胞的黏附和入侵 | 第52-56页 |
| 5 讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-68页 |
| 附录 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
