摘要 | 第7-10页 |
ABSTRACT | 第10-13页 |
第一章 文献综述 | 第14-22页 |
1.1 基因表达调控概述 | 第14-16页 |
1.1.1 顺式调控元件 | 第14-16页 |
1.1.2 反式作用因子 | 第16页 |
1.2 启动子研究和应用 | 第16-18页 |
1.2.1 启动子的基本结构和分类 | 第16-17页 |
1.2.2 启动子的研究方法和应用 | 第17-18页 |
1.3 Hox基因的研究 | 第18-20页 |
1.3.1 Hox基因的结构和表达特征 | 第18-19页 |
1.3.2 Hox基因在昆虫中的研究 | 第19-20页 |
1.4 Shx基因研究 | 第20-22页 |
第二章 引言 | 第22-24页 |
2.1 研究背景与目的意义 | 第22页 |
2.2 主要研究内容 | 第22-23页 |
2.3 技术路线 | 第23-24页 |
第三章 家蚕ShxA、ShxC1基因启动子的克隆及鉴定分析 | 第24-52页 |
3.1 实验材料与相关试剂 | 第24-26页 |
3.1.1 材料 | 第24页 |
3.1.2 主要试剂及溶液配制 | 第24-26页 |
3.1.3 主要仪器 | 第26页 |
3.2 主要实验方法及步骤 | 第26-40页 |
3.2.1 家蚕卵巢组织解剖处理 | 第26页 |
3.2.2 家蚕卵巢组织RNA提取及cDNA的合成 | 第26-29页 |
3.2.3 BmshxA、BmshxC1启动子驱动DsRed转基因载体构建 | 第29-35页 |
3.2.4 家蚕受精卵显微注射与荧光筛选 | 第35-36页 |
3.2.5 转基因个体插入位点检测 | 第36-38页 |
3.2.6 转基因个体表达水平检测 | 第38-40页 |
3.3 结果与分析 | 第40-49页 |
3.3.1 家蚕ShxA、ShxC1基因上游转录因子结合位点分析 | 第40-42页 |
3.3.2 家蚕ShxA、ShxC1基因启动子驱动DsRed转基因载体构建 | 第42-43页 |
3.3.3 转基因阳性个体筛选 | 第43-44页 |
3.3.4 转基因系插入位点检测 | 第44-45页 |
3.3.5 转基因系卵巢中DsRed的表达检测 | 第45-49页 |
3.3.6 转基因个体卵巢组织荧光观察 | 第49页 |
3.4 小结与讨论 | 第49-52页 |
第四章 家蚕ShxA基因上游反式因子筛选和表达调控研究 | 第52-68页 |
4.1 实验材料与相关试剂 | 第52-53页 |
4.1.1 实验材料 | 第52页 |
4.1.2 主要试剂及溶液配制 | 第52-53页 |
4.1.3 主要仪器 | 第53页 |
4.2 主要实验与方法 | 第53-57页 |
4.2.1 DNAPulldown | 第53-54页 |
4.2.2 蛋白质检测—MS | 第54页 |
4.2.3 qRT-PCR 检测质谱鉴定基因蛹期至化蛾一天表达模式 | 第54-55页 |
4.2.4 dsRNA(双链)干涉 | 第55-56页 |
4.2.5 双链干涉后基因表达检测 | 第56-57页 |
4.3 结果与分析 | 第57-65页 |
4.3.1 DNApulldown实验钓取家蚕ShxA基因上游结合蛋白 | 第57-59页 |
4.3.2 质谱鉴定钓取BmshxA基因上游结合蛋白 | 第59-60页 |
4.3.3 钓取家蚕ShxA基因上游结合蛋白功能分析 | 第60-61页 |
4.3.4 BmshxA基因上游钓取蛋白编码基因表达分析以及与BmshxA基因表基因表达关联性分析 | 第61-63页 |
4.3.5 双链干涉复制蛋白A大亚基基因、核转运蛋白α亚基基因 | 第63-65页 |
4.4 小结与讨论 | 第65-68页 |
第五章 综合与结论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
附录 | 第76-78页 |
在读期间发表论文及参研课题 | 第78-80页 |
致谢 | 第80-81页 |