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家蚕ShxA、ShxC1基因启动子鉴定及表达调控研究

摘要第7-10页
ABSTRACT第10-13页
第一章 文献综述第14-22页
    1.1 基因表达调控概述第14-16页
        1.1.1 顺式调控元件第14-16页
        1.1.2 反式作用因子第16页
    1.2 启动子研究和应用第16-18页
        1.2.1 启动子的基本结构和分类第16-17页
        1.2.2 启动子的研究方法和应用第17-18页
    1.3 Hox基因的研究第18-20页
        1.3.1 Hox基因的结构和表达特征第18-19页
        1.3.2 Hox基因在昆虫中的研究第19-20页
    1.4 Shx基因研究第20-22页
第二章 引言第22-24页
    2.1 研究背景与目的意义第22页
    2.2 主要研究内容第22-23页
    2.3 技术路线第23-24页
第三章 家蚕ShxA、ShxC1基因启动子的克隆及鉴定分析第24-52页
    3.1 实验材料与相关试剂第24-26页
        3.1.1 材料第24页
        3.1.2 主要试剂及溶液配制第24-26页
        3.1.3 主要仪器第26页
    3.2 主要实验方法及步骤第26-40页
        3.2.1 家蚕卵巢组织解剖处理第26页
        3.2.2 家蚕卵巢组织RNA提取及cDNA的合成第26-29页
        3.2.3 BmshxA、BmshxC1启动子驱动DsRed转基因载体构建第29-35页
        3.2.4 家蚕受精卵显微注射与荧光筛选第35-36页
        3.2.5 转基因个体插入位点检测第36-38页
        3.2.6 转基因个体表达水平检测第38-40页
    3.3 结果与分析第40-49页
        3.3.1 家蚕ShxA、ShxC1基因上游转录因子结合位点分析第40-42页
        3.3.2 家蚕ShxA、ShxC1基因启动子驱动DsRed转基因载体构建第42-43页
        3.3.3 转基因阳性个体筛选第43-44页
        3.3.4 转基因系插入位点检测第44-45页
        3.3.5 转基因系卵巢中DsRed的表达检测第45-49页
        3.3.6 转基因个体卵巢组织荧光观察第49页
    3.4 小结与讨论第49-52页
第四章 家蚕ShxA基因上游反式因子筛选和表达调控研究第52-68页
    4.1 实验材料与相关试剂第52-53页
        4.1.1 实验材料第52页
        4.1.2 主要试剂及溶液配制第52-53页
        4.1.3 主要仪器第53页
    4.2 主要实验与方法第53-57页
        4.2.1 DNAPulldown第53-54页
        4.2.2 蛋白质检测—MS第54页
        4.2.3 qRT-PCR 检测质谱鉴定基因蛹期至化蛾一天表达模式第54-55页
        4.2.4 dsRNA(双链)干涉第55-56页
        4.2.5 双链干涉后基因表达检测第56-57页
    4.3 结果与分析第57-65页
        4.3.1 DNApulldown实验钓取家蚕ShxA基因上游结合蛋白第57-59页
        4.3.2 质谱鉴定钓取BmshxA基因上游结合蛋白第59-60页
        4.3.3 钓取家蚕ShxA基因上游结合蛋白功能分析第60-61页
        4.3.4 BmshxA基因上游钓取蛋白编码基因表达分析以及与BmshxA基因表基因表达关联性分析第61-63页
        4.3.5 双链干涉复制蛋白A大亚基基因、核转运蛋白α亚基基因第63-65页
    4.4 小结与讨论第65-68页
第五章 综合与结论第68-70页
参考文献第70-76页
附录第76-78页
在读期间发表论文及参研课题第78-80页
致谢第80-81页

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