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提高Schizochytrium DHA产量的诱变筛选方法研究及高产机理解析

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
缩略词第11-13页
第一章 绪论第13-24页
    1.1 DHA概述第13-15页
        1.1.1 DHA的结构及理化性质第13页
        1.1.2 DHA的生理功能第13-14页
        1.1.3 工业化生产DHA方法第14-15页
    1.2 裂殖壶菌产DHA的概述第15-22页
        1.2.1 裂殖壶菌形态、生理特征第15-16页
        1.2.2 裂殖壶菌DHA合成研究进展第16-19页
        1.2.3 DHA的β氧化降解第19页
        1.2.4 裂殖壶菌提高DHA产率的诱变育种研究第19-20页
        1.2.5 裂殖壶菌产DHA的发酵研究第20-22页
    1.3 立题依据与主要研究内容第22-24页
        1.3.1 立题依据与研究意义第22页
        1.3.2 本文主要研究内容第22-24页
第二章 Schizochytrium sp.S31细胞形态与DHA合成的关联性研究第24-35页
    2.1 前言第24页
    2.2 材料与方法第24-26页
        2.2.1 菌株第24页
        2.2.2 培养基第24-25页
        2.2.3 培养条件第25页
        2.2.4 细胞显微结构观察第25页
        2.2.5 生物量与生化检测方法第25-26页
    2.3 结果与讨论第26-34页
        2.3.1 Schizochytrium sp.S31发酵过程中细胞形态与发酵过程参数的关联研究第26-29页
        2.3.2 发酵过程中胞内脂质体形态变化与油脂积累的规律研究第29-30页
        2.3.3 调整培养基碳氮浓度对细胞形态与脂质积累的影响第30-31页
        2.3.4 不同发酵阶段脂肪酸组分变化规律的研究第31-34页
    2.4 小结第34-35页
第三章 常压室温等离子体(ARTP)法诱变Schizochytrium sp.S31及理性筛选方法研究第35-50页
    3.1 前言第35页
    3.2 材料与方法第35-38页
        3.2.1 菌株第35-36页
        3.2.2 培养基第36页
        3.2.3 培养条件第36页
        3.2.4 试剂配制第36页
        3.2.5 裂殖壶菌突变株制备第36-37页
        3.2.6 分析方法第37-38页
    3.3 结果与讨论第38-49页
        3.3.1 UV、EMS和ARTP对Schizochytrium sp.31诱变效果的比较研究第38-42页
        3.3.2 ARTP诱变及丙二酸(MA)筛选高含油量突变株第42-45页
        3.3.3 第二轮ARTP诱变及zeocin筛选DHA高产株第45-49页
    3.4 小结第49-50页
第四章 变异株Schizochytrium sp.mz-17高产DHA机理的转录组学解析第50-67页
    4.1 前言第50页
    4.2 材料与方法第50-53页
        4.2.1 菌株第50页
        4.2.2 培养基第50-51页
        4.2.3 培养条件第51页
        4.2.4 RNA-seq测序及分析第51-52页
        4.2.5 实时荧光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qRT-PCR)验证.第52-53页
        4.2.6 分析方法第53页
    4.3 结果与讨论第53-66页
        4.3.1 用于RNA-seq测序的菌株及发酵节点的选择依据第53-54页
        4.3.2 细胞RNA-seq测序及功能基因注释结果第54-58页
        4.3.3 高产株mz-17与出发菌株DHA合成相关代谢途径的DEG研究第58-64页
        4.3.4 qRT-PCR验证结果分析及提示第64-66页
    4.4 小结第66-67页
第五章 基于mz-17代谢变化与转录组学分析提高DHA发酵得率第67-80页
    5.1 前言第67-68页
    5.2 材料与方法第68-69页
        5.2.1 菌株第68页
        5.2.2 培养基第68页
        5.2.3 培养条件第68页
        5.2.4 试剂配置第68页
        5.2.5 分析方法第68-69页
    5.3 结果与讨论第69-78页
        5.3.1 分步添加Fe2+以提高发酵DHA产率的研究第69-71页
        5.3.2 根据细胞生理与DHA合成机理设置的两阶段pH控制发酵策略第71-74页
        5.3.3 基于mz-17氧化磷酸化水平减弱下调溶氧水平以提高DHA发酵产量第74-78页
    5.4 小结第78-80页
主要结论与展望第80-82页
    主要结论第80-81页
    展望第81-82页
论文创新点第82-83页
致谢第83-84页
参考文献第84-92页
附录一:作者在攻读博士学位期间发表的论文第92-93页
附录二:本课题项目支持第93-94页
附录三:qRT-PCR中相关基因序列第94-104页

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