摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩略词 | 第11-13页 |
第一章 绪论 | 第13-24页 |
1.1 DHA概述 | 第13-15页 |
1.1.1 DHA的结构及理化性质 | 第13页 |
1.1.2 DHA的生理功能 | 第13-14页 |
1.1.3 工业化生产DHA方法 | 第14-15页 |
1.2 裂殖壶菌产DHA的概述 | 第15-22页 |
1.2.1 裂殖壶菌形态、生理特征 | 第15-16页 |
1.2.2 裂殖壶菌DHA合成研究进展 | 第16-19页 |
1.2.3 DHA的β氧化降解 | 第19页 |
1.2.4 裂殖壶菌提高DHA产率的诱变育种研究 | 第19-20页 |
1.2.5 裂殖壶菌产DHA的发酵研究 | 第20-22页 |
1.3 立题依据与主要研究内容 | 第22-24页 |
1.3.1 立题依据与研究意义 | 第22页 |
1.3.2 本文主要研究内容 | 第22-24页 |
第二章 Schizochytrium sp.S31细胞形态与DHA合成的关联性研究 | 第24-35页 |
2.1 前言 | 第24页 |
2.2 材料与方法 | 第24-26页 |
2.2.1 菌株 | 第24页 |
2.2.2 培养基 | 第24-25页 |
2.2.3 培养条件 | 第25页 |
2.2.4 细胞显微结构观察 | 第25页 |
2.2.5 生物量与生化检测方法 | 第25-26页 |
2.3 结果与讨论 | 第26-34页 |
2.3.1 Schizochytrium sp.S31发酵过程中细胞形态与发酵过程参数的关联研究 | 第26-29页 |
2.3.2 发酵过程中胞内脂质体形态变化与油脂积累的规律研究 | 第29-30页 |
2.3.3 调整培养基碳氮浓度对细胞形态与脂质积累的影响 | 第30-31页 |
2.3.4 不同发酵阶段脂肪酸组分变化规律的研究 | 第31-34页 |
2.4 小结 | 第34-35页 |
第三章 常压室温等离子体(ARTP)法诱变Schizochytrium sp.S31及理性筛选方法研究 | 第35-50页 |
3.1 前言 | 第35页 |
3.2 材料与方法 | 第35-38页 |
3.2.1 菌株 | 第35-36页 |
3.2.2 培养基 | 第36页 |
3.2.3 培养条件 | 第36页 |
3.2.4 试剂配制 | 第36页 |
3.2.5 裂殖壶菌突变株制备 | 第36-37页 |
3.2.6 分析方法 | 第37-38页 |
3.3 结果与讨论 | 第38-49页 |
3.3.1 UV、EMS和ARTP对Schizochytrium sp.31诱变效果的比较研究 | 第38-42页 |
3.3.2 ARTP诱变及丙二酸(MA)筛选高含油量突变株 | 第42-45页 |
3.3.3 第二轮ARTP诱变及zeocin筛选DHA高产株 | 第45-49页 |
3.4 小结 | 第49-50页 |
第四章 变异株Schizochytrium sp.mz-17高产DHA机理的转录组学解析 | 第50-67页 |
4.1 前言 | 第50页 |
4.2 材料与方法 | 第50-53页 |
4.2.1 菌株 | 第50页 |
4.2.2 培养基 | 第50-51页 |
4.2.3 培养条件 | 第51页 |
4.2.4 RNA-seq测序及分析 | 第51-52页 |
4.2.5 实时荧光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qRT-PCR)验证. | 第52-53页 |
4.2.6 分析方法 | 第53页 |
4.3 结果与讨论 | 第53-66页 |
4.3.1 用于RNA-seq测序的菌株及发酵节点的选择依据 | 第53-54页 |
4.3.2 细胞RNA-seq测序及功能基因注释结果 | 第54-58页 |
4.3.3 高产株mz-17与出发菌株DHA合成相关代谢途径的DEG研究 | 第58-64页 |
4.3.4 qRT-PCR验证结果分析及提示 | 第64-66页 |
4.4 小结 | 第66-67页 |
第五章 基于mz-17代谢变化与转录组学分析提高DHA发酵得率 | 第67-80页 |
5.1 前言 | 第67-68页 |
5.2 材料与方法 | 第68-69页 |
5.2.1 菌株 | 第68页 |
5.2.2 培养基 | 第68页 |
5.2.3 培养条件 | 第68页 |
5.2.4 试剂配置 | 第68页 |
5.2.5 分析方法 | 第68-69页 |
5.3 结果与讨论 | 第69-78页 |
5.3.1 分步添加Fe2+以提高发酵DHA产率的研究 | 第69-71页 |
5.3.2 根据细胞生理与DHA合成机理设置的两阶段pH控制发酵策略 | 第71-74页 |
5.3.3 基于mz-17氧化磷酸化水平减弱下调溶氧水平以提高DHA发酵产量 | 第74-78页 |
5.4 小结 | 第78-80页 |
主要结论与展望 | 第80-82页 |
主要结论 | 第80-81页 |
展望 | 第81-82页 |
论文创新点 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
参考文献 | 第84-92页 |
附录一:作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第92-93页 |
附录二:本课题项目支持 | 第93-94页 |
附录三:qRT-PCR中相关基因序列 | 第94-104页 |