| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-22页 |
| ·概述 | 第12-13页 |
| ·国内外研究进展 | 第13-19页 |
| ·土壤杆菌31749 简介 | 第13页 |
| ·热凝胶研究进展 | 第13-14页 |
| ·氮源代谢调控系统简介 | 第14-15页 |
| ·氮代谢双组分系统NtrB-NtrC 研究进展 | 第15-17页 |
| ·热凝胶合成过程中能量代谢研究进展 | 第17-19页 |
| ·主要研究内容 | 第19-22页 |
| ·目前存在的问题 | 第19页 |
| ·主要研究内容 | 第19-22页 |
| 第二章 土壤杆菌31749 应答氮源限制环境的机理分析 | 第22-38页 |
| ·前言 | 第22-24页 |
| ·材料与方法 | 第24-28页 |
| ·菌种 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·培养方法 | 第25页 |
| ·RT-qPCR 实验方法 | 第25-26页 |
| ·蛋白质二维电泳及质谱鉴定实验方法 | 第26-27页 |
| ·热凝胶产量测定方法 | 第27-28页 |
| ·发酵液氮源含量测定方法 | 第28页 |
| ·发酵液生物量测定方法 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-34页 |
| ·热凝胶分批发酵过程分析 | 第28-29页 |
| ·RT-qPCR 实验结果 | 第29-32页 |
| ·氮源限制条件下土壤杆菌31749 蛋白质表达差异鉴定结果 | 第32-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| ·氮源代谢相关基因应答环境氮源含量变化 | 第34-35页 |
| ·碳源和热凝胶合成相关基因应答环境氮源含量变化 | 第35页 |
| ·碳源代谢和氮源代谢之间的联系 | 第35页 |
| ·从蛋白质表达水平变化分析菌体对氮源限制条件的应答机制 | 第35-36页 |
| ·本章小结 | 第36-38页 |
| 第三章 土壤杆菌31749 氮代谢调控系统ntrC 基因的敲除 | 第38-58页 |
| ·前言 | 第38页 |
| ·材料与方法 | 第38-43页 |
| ·菌株和质粒 | 第38-39页 |
| ·酶和引物 | 第39页 |
| ·培养基和相关溶液 | 第39页 |
| ·热凝胶产量测定 | 第39页 |
| ·生物量测定 | 第39页 |
| ·发酵液氮源含量测定方法 | 第39-40页 |
| ·发酵液葡萄糖含量测定方法 | 第40页 |
| ·新聚合物粗分离提取方法 | 第40页 |
| ·红外光谱测定多糖结构 | 第40页 |
| ·新聚合物单糖组成分析 | 第40-41页 |
| ·蛋白质二维电泳方法 | 第41页 |
| ·菌体形态变化速度观察方法 | 第41页 |
| ·分子生物学实验操作 | 第41-42页 |
| ·重组自杀载体的构建策略 | 第42-43页 |
| ·三亲接合转化和ΔntrC 筛选 | 第43页 |
| ·结果 | 第43-55页 |
| ·ntrC 基因的扩增和测序以及kana 基因的扩增 | 第43-44页 |
| ·同源重组质粒构建和ntrC 基因突变株筛选 | 第44-46页 |
| ·ΔntrC 菌体形态变化分析 | 第46页 |
| ·ΔntrC 热凝胶发酵特性分析 | 第46-48页 |
| ·ΔntrC 对多种氮源利用分析 | 第48-49页 |
| ·新聚合物产量及基本特性分析 | 第49-50页 |
| ·新聚合物结构及单糖组成分析 | 第50-51页 |
| ·ΔntrC 解除氮源限制情况分析 | 第51-52页 |
| ·ΔntrC 与野生菌在氮源充足条件下蛋白质表达差异分析 | 第52-53页 |
| ·野生菌及ΔntrC 部分差异蛋白质的质谱分析 | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-56页 |
| ·NtrC 调控土壤杆菌31749 应答氮源限制环境 | 第55页 |
| ·NtrC 调控土壤杆菌31749 对不同种类氮源的利用 | 第55-56页 |
| ·NtrC 调控土壤杆菌31749 合成新胞外聚合物 | 第56页 |
| ·NtrC 调控土壤杆菌31749 在氮源限制条件下蛋白质表达 | 第56页 |
| ·本章小结 | 第56-58页 |
| 第四章 土壤杆菌31749 氮代谢调控系统ntrB 基因的敲除 | 第58-72页 |
| ·前言 | 第58页 |
| ·材料与方法 | 第58-62页 |
| ·菌株和质粒 | 第58-59页 |
| ·酶和引物 | 第59页 |
| ·培养基和相关溶液 | 第59页 |
| ·热凝胶产量测定 | 第59页 |
| ·生物量测定 | 第59页 |
| ·发酵液葡萄糖含量测定方法 | 第59页 |
| ·发酵液氮源含量测定方法 | 第59-60页 |
| ·新聚合物粗分离提取方法 | 第60页 |
| ·菌体形态变化速度观察方法 | 第60页 |
| ·分子生物学实验操作 | 第60页 |
| ·重组自杀载体的构建策略 | 第60-61页 |
| ·三亲接合转化和ΔntrB 筛选 | 第61-62页 |
| ·结果 | 第62-68页 |
| ·ntrB 基因的扩增和测序及cat 基因的扩增 | 第62页 |
| ·同源重组质粒构建和ntrB 基因突变株筛选 | 第62-63页 |
| ·ΔntrB 菌体形态变化速度分析 | 第63-64页 |
| ·ΔntrB 热凝胶发酵特性分析 | 第64-65页 |
| ·ΔntrB 对多种氮源利用分析 | 第65-66页 |
| ·ΔntrB 产生新聚合物分析 | 第66-67页 |
| ·ΔntrB 解除氮源限制情况分析 | 第67-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| ·本章小结 | 第70-72页 |
| 第五章 低聚磷酸盐对热凝胶发酵的影响 | 第72-82页 |
| ·前言 | 第72-73页 |
| ·材料与方法 | 第73-75页 |
| ·菌种 | 第73页 |
| ·培养基 | 第73页 |
| ·培养方法 | 第73页 |
| ·主要试剂 | 第73-74页 |
| ·热凝胶产量测定 | 第74页 |
| ·生物量测定 | 第74页 |
| ·发酵液葡萄糖含量测定方法 | 第74页 |
| ·发酵液磷含量测定方法 | 第74页 |
| ·ppk 和ppx 基因的扩增和测序 | 第74页 |
| ·低聚磷酸盐添加方式和浓度 | 第74页 |
| ·有机酸测定方法 | 第74页 |
| ·数据分析 | 第74-75页 |
| ·结果 | 第75-80页 |
| ·ppk 和ppx 基因测序分析 | 第75页 |
| ·添加不同种类低聚磷酸盐对土壤杆菌31749 发酵生产热凝胶的影响 | 第75-76页 |
| ·添加不同种类和浓度低聚磷酸盐的发酵液有机酸含量分析 | 第76-77页 |
| ·添加不同浓度(NaP0_3)_6 对土壤杆菌31749 生长和热凝胶合成的影响 | 第77-78页 |
| ·无碳酸钙条件下低聚磷酸盐对热凝胶发酵的影响 | 第78页 |
| ·低聚磷酸盐和KH_2P0_4-K_2HP0_4 混合添加对热凝胶发酵的影响 | 第78-80页 |
| ·不同浓度和方式添加(NaP0_3)_6 对热凝胶产量的影响 | 第80页 |
| ·讨论 | 第80-81页 |
| ·本章小结 | 第81-82页 |
| 结论 | 第82-84页 |
| 论文创新点 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-100页 |
| 附录Ⅰ：作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第100-101页 |
| 附录Ⅱ：缩略语全称 | 第101-102页 |
