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基于转录组测序的沙葱萤叶甲成虫夏滞育分子机理的研究

摘要第3-5页
abstract第5-7页
缩略语表第14-15页
1 前言第15-34页
    1.1 沙葱萤叶甲第15-16页
        1.1.1 沙葱萤叶甲的发生危害第15页
        1.1.2 沙葱萤叶甲形态及生物学特性第15页
        1.1.3 沙葱萤叶甲国内外研究进展第15-16页
    1.2 昆虫滞育研究进展第16-30页
        1.2.1 滞育概述第16-17页
        1.2.2 滞育类型第17-18页
        1.2.3 外界环境对于昆虫滞育的影响第18-21页
        1.2.4 滞育昆虫的生理生化特点第21-25页
        1.2.5 滞育调控机理第25-30页
    1.3 转录组学第30-33页
        1.3.1 转录组学概述第30-32页
        1.3.2 转录组学在昆虫滞育研究中的应用第32-33页
    1.4 本研究的目的意义、主要内容及技术路线第33-34页
        1.4.1 目的意义第33页
        1.4.2 研究内容第33页
        1.4.3 技术路线第33-34页
2 沙葱萤叶甲成虫夏滞育不同阶段糖类、蛋白及脂肪含量的变化第34-40页
    2.1 实验材料第35-36页
        2.1.1 材料第35页
        2.1.2 主要试剂与仪器第35-36页
    2.2 实验方法第36页
        2.2.1 沙葱萤叶甲脂肪及含水量的测定第36页
        2.2.2 沙葱萤叶甲体内总糖、海藻糖和糖原含量测定第36页
        2.2.3 总蛋白含量测定第36页
        2.2.4 数据分析第36页
    2.3 结果与分析第36-38页
        2.3.1 沙葱萤叶甲成虫不同滞育阶段的含水量和脂肪含量第36-37页
        2.3.2 沙葱萤叶甲成虫不同滞育阶段的总糖、海藻糖及糖原含量第37-38页
        2.3.3 沙葱萤叶甲成虫不同滞育阶段的总蛋白含量第38页
    2.4 讨论第38-40页
3 沙葱萤叶甲成虫夏滞育的转录组学研究第40-60页
    3.1 实验材料第40-42页
        3.1.1 实验样品的收集和储存第40页
        3.1.2 主要试剂与仪器第40-41页
        3.1.3 实验引物第41-42页
    3.2 实验方法第42-45页
        3.2.1 供试材料总RNA的提取第42页
        3.2.2 转录组测序第42-43页
        3.2.3 生物信息学分析第43-45页
    3.3 结果与分析第45-56页
        3.3.1 测序结果与序列组装第45-46页
        3.3.2 mRNA片段化随机性检测第46页
        3.3.3 插入片段长度检测第46-47页
        3.3.4 转录组测序数据饱和度检测第47-48页
        3.3.5 Unigene注释第48-53页
        3.3.6 不同滞育阶段基因表达谱分析第53-54页
        3.3.7 差异基因GO、KEGG富集分析第54-55页
        3.3.8 定量验证第55-56页
    3.4 讨论第56-60页
        3.4.1 滞育相关基因分析第57-58页
        3.4.2 热激蛋白第58页
        3.4.3 新陈代谢第58-59页
        3.4.4 能量储存与代谢第59页
        3.4.5 细胞骨架第59-60页
4 沙葱萤叶甲海藻糖酶基因GdTre1的克隆、分子特性和表达分析第60-71页
    4.1 材料与方法第61-64页
        4.1.1 供试材料第61页
        4.1.2 主要试剂与仪器第61页
        4.1.3 RNA的提取及cDNA第1链的合成第61页
        4.1.4 海藻糖酶基因中间片段的克隆第61-62页
        4.1.5 海藻糖酶基因cDNA5′和3′RACE扩增及全长基因的获取第62页
        4.1.6 海藻糖酶基因的生物信息学分析第62-63页
        4.1.7 沙葱萤叶甲海藻糖酶基因的表达谱分析第63页
        4.1.8 海藻糖酶活性测定第63-64页
        4.1.9 数据统计与分析第64页
    4.2 结果与分析第64-69页
        4.2.1 沙葱萤叶甲海藻糖酶基因的克隆及序列分析第64-66页
        4.2.2 GdTre1的同源比对和系统发育关系分析第66-67页
        4.2.3 GdTre1在沙葱萤叶甲不同发育阶段的表达分析第67-68页
        4.2.4 GdTre1在沙葱萤叶甲不同日龄成虫组织中的表达分析第68页
        4.2.5 温度胁迫对GdTre1表达的影响第68-69页
        4.2.6 沙葱萤叶甲不同日龄成虫中海藻糖酶活性的测定第69页
    4.3 讨论第69-71页
5 沙葱萤叶甲热激蛋白基因GdHsp10a的克隆、分子特征与表达分析第71-79页
    5.1 材料与方法第72-73页
        5.1.1 供试材料第72页
        5.1.2 主要试剂与仪器第72页
        5.1.3 RNA的提取及cDNA第1链的合成第72页
        5.1.4 GdHsp10a基因中间片段的克隆第72页
        5.1.5 GdHsp10acDNA5'和3'RACE扩增及全长基因的获取第72页
        5.1.6 GdHsp10a的生物信息学分析第72-73页
        5.1.7 GdHsp10a基因qRT-PCR定量分析第73页
        5.1.8 数据统计与分析第73页
    5.2 结果与分析第73-77页
        5.2.1 沙葱萤叶甲GdHsp10a基因的克隆及序列分析第73-74页
        5.2.2 生物信息学分析第74页
        5.2.3 Gdhsp10a的同源比对和系统发育关系分析第74-75页
        5.2.4 Gdhsp10a在沙葱萤叶甲不同发育阶段的表达分析第75-76页
        5.2.5 Gdhsp10a在沙葱萤叶甲不同日龄成虫组织中的表达分析第76页
        5.2.6 GdHsp10a在不同温度下的表达分析第76-77页
    5.3 讨论第77-79页
6 沙葱萤叶甲保幼激素结合蛋白GdJHBP基因的克隆、分子特性和表达分析第79-87页
    6.1 材料与方法第79-81页
        6.1.1 材料第79-80页
        6.1.2 主要试剂与仪器第80页
        6.1.3 RNA的提取及cDNA第1链的合成第80页
        6.1.4 GdJHBP基因序列的筛选及验证第80页
        6.1.5 GdJHBP基因cDNA5′和3′RACE扩增及全长基因序列的获取第80页
        6.1.6 GdJHBP基因的生物信息学分析第80-81页
        6.1.7 GdJHBP的表达谱分析第81页
        6.1.8 数据统计与分析第81页
    6.2 结果与分析第81-86页
        6.2.1 沙葱萤叶甲GdJHBP基因的克隆及生物信息学分析第81-83页
        6.2.2 GdJHBP的同源性比对及系统发育关系分析第83-84页
        6.2.3 GdJHBP在沙葱萤叶甲不同发育阶段的表达分析第84-85页
        6.2.4 GdJHBP在沙葱萤叶甲不同日龄成虫的组织中的表达分析第85页
        6.2.5 GdJHBP在高温胁迫下的表达分析第85-86页
    6.3 讨论第86-87页
7 全文总结第87-89页
    7.1 主要结果第87-88页
    7.2 创新点第88页
    7.3 研究展望第88-89页
致谢第89-91页
参考文献第91-116页
附录第116-141页
作者简介第141页

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