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MAPK信号途径调控小菜蛾Bt Cry1Ac毒素抗性的分子机制研究

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一章 引言第16-37页
    1.1 小菜蛾及其抗药性概况第16-17页
        1.1.1 小菜蛾形态特征和生活习性第16页
        1.1.2 小菜蛾的为害状况和治理第16-17页
        1.1.3 小菜蛾抗药性研究进展第17页
    1.2 苏云金芽胞杆菌Bt及其杀虫晶体概况第17-20页
        1.2.1 Bt概况第17页
        1.2.2 Bt杀虫晶体的分类和结构第17-18页
        1.2.3 Bt杀虫晶体的作用机制第18-20页
    1.3 昆虫对Bt抗性的研究进展第20-22页
        1.3.1 昆虫对Bt抗性现状第20-21页
        1.3.2 昆虫对Bt的抗性机制第21-22页
    1.4 MAPK信号途径概况第22-32页
        1.4.1 MAPK信号途径构成第22-25页
        1.4.2 MAPK信号途径在哺乳动物中的生物学功能研究第25-27页
        1.4.3 MAPK信号途径在非哺乳动物中的研究第27页
        1.4.4 MAPK信号途径在昆虫的生物学功能研究第27-31页
        1.4.5 MAPK信号途径在成孔毒素中的研究第31-32页
    1.5 磷酸化蛋白质组学第32-36页
        1.5.1 磷酸化蛋白质组学概况第32-35页
        1.5.2 磷酸化蛋白质组学在农业昆虫生物学研究的应用第35-36页
    1.6 本研究的基本内容、目的和意义第36-37页
        1.6.1 本研究的基本内容第36页
        1.6.2 本研究的目的和意义第36-37页
第二章 小菜蛾MAPK信号途径基因注释第37-67页
    2.1 材料与方法第37-45页
        2.1.1 供试小菜蛾种群第37-38页
        2.1.2 小菜蛾MAPK信号途径基因第38页
        2.1.3 其他相关节肢动物MAPK信号途径基因第38-39页
        2.1.4 RNA的提取和cDNA的合成第39-41页
        2.1.5 小菜蛾MAPK信号途径基因克隆和序列测定第41页
        2.1.6 基因序列的生物信息学分析和进化树的构建第41页
        2.1.7 进化选择压分析第41-42页
        2.1.8 基于转录组数据定量分析MAPK信号途径基因的表达量第42-45页
    2.2 结果与分析第45-65页
        2.2.1 小菜蛾MAPK信号途径基因第45-60页
        2.2.2 节肢动物MAPK信号途径基因的分布第60-61页
        2.2.3 进化树构建第61-63页
        2.2.4 进化选择压分析第63页
        2.2.5 表达量分析第63-65页
    2.3 讨论第65-67页
第三章 MAPK信号途径基因定量分析和功能初步验证第67-80页
    3.1 材料与方法第67-73页
        3.1.1 供试小菜蛾种群第67-68页
        3.1.2 RNA的提取和cDNA的合成第68页
        3.1.3 MAPK信号途径基因qRCR引物设计和筛选第68-70页
        3.1.4 实时荧光定量PCR分析第70页
        3.1.5 p38、ERK和JNK抗体选择第70页
        3.1.6 蛋白含量检测第70-72页
        3.1.7 特异性抑制剂选择第72页
        3.1.8 特异性抑制剂处理实验第72-73页
        3.1.9 小菜蛾毒力生物测定第73页
    3.2 结果与分析第73-78页
        3.2.1 MAPK信号途径基因表达量分析第73页
        3.2.2 抗敏种群p38、ERK和JNK蛋白水平和磷酸化水平分析第73-75页
        3.2.3 抑制剂验证p38、ERK和JNK途径调控抗性相关基因功能第75-78页
    3.3 讨论第78-80页
第四章 磷酸化蛋白质组学分析第80-115页
    4.1 材料与方法第80-83页
        4.1.1 供试小菜蛾种群第80页
        4.1.2 中肠样品准备第80页
        4.1.3 中肠蛋白提取和定量第80页
        4.1.4 中肠蛋白酶切第80-81页
        4.1.5 中肠蛋白标记第81页
        4.1.6 中肠蛋白磷酸化肽段富集第81页
        4.1.7 质谱分析和鉴定第81-82页
        4.1.8 质谱数据分析第82-83页
    4.2 结果与分析第83-114页
        4.2.1 磷酸化蛋白质组学分析基本情况第83-84页
        4.2.2 磷酸化差异蛋白分析第84-114页
    4.3 讨论第114-115页
第五章 MAPK信号途径功能验证第115-123页
    5.1 材料与方法第115-117页
        5.1.1 供试小菜蛾种群第115页
        5.1.2 RNA的提取和cDNA的合成第115页
        5.1.3 dsRNA引物筛选和dsRNA的合成第115页
        5.1.4 RNAi功能性分析第115-117页
        5.1.5 蛋白含量检测第117页
        5.1.6 实时荧光定量PCR分析第117页
        5.1.7 小菜蛾毒力生物测定第117页
    5.2 结果与分析第117-120页
    5.3 讨论第120-123页
第六章 全文结论第123-125页
参考文献第125-142页
附录第142-143页
致谢第143-145页
作者简历第145-146页

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