摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-19页 |
1.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒概论 | 第12-15页 |
1.1.1 PRRSV病原学特征 | 第12-14页 |
1.1.2 PRRSV致病机制 | 第14页 |
1.1.3 PRRSV免疫学应答特性 | 第14-15页 |
1.1.4 PRRSV鉴别诊断及预防控制 | 第15页 |
1.2 长链非编码RNA概论 | 第15-18页 |
1.2.1 LncRNA发现和分类 | 第16-17页 |
1.2.2 LncRNA调控病毒感染的免疫反应 | 第17-18页 |
1.3 研究目的与意义 | 第18-19页 |
第二章 LncRNA TCONS_00179042 基因克隆与序列分析 | 第19-29页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 细胞和病毒株 | 第19页 |
2.1.2 主要仪器和设备 | 第19页 |
2.1.3 主要试剂材料 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20-25页 |
2.2.1 PAM细胞制备及培养 | 第20页 |
2.2.2 PAM细胞总RNA提取 | 第20页 |
2.2.3 PRRSV感染后LncRNA TCONS_00179042 的表达丰度变化 | 第20-22页 |
2.2.4 LncRNA TCONS_00179042 基因序列测定 | 第22-24页 |
2.2.5 LncRNA TCONS_00179042 基因序列分析 | 第24-25页 |
2.3 实验结果 | 第25-28页 |
2.3.1 PRRSV感染后LncRNA TCONS_00179042 表达丰度变化 | 第25页 |
2.3.2 LncRNA TCONS_00179042 基因RT-PCR扩增 | 第25-26页 |
2.3.3 重组质粒T1-TCONS_00179042 鉴定 | 第26页 |
2.3.4 LncRNA TCONS_00179042 基因序列分析 | 第26-28页 |
2.4 讨论 | 第28-29页 |
第三章 LncRNA TCONS_00179042 对PRRSV复制的影响 | 第29-42页 |
3.1 实验材料 | 第29页 |
3.1.1 细胞和载体 | 第29页 |
3.1.2 主要仪器和设备 | 第29页 |
3.1.3 主要试剂材料 | 第29页 |
3.2 实验方法 | 第29-35页 |
3.2.1 LncRNA TCONS_00179042 过表达载体构建 | 第29-32页 |
3.2.2 过表达载体转染Marc-145 细胞 | 第32页 |
3.2.3 引物设计合成 | 第32-33页 |
3.2.4 实时荧光定量PCR检测转染结果 | 第33页 |
3.2.5 实时荧光定量PCR检测PRRSV RNA的变化 | 第33页 |
3.2.6 Western blotting检测PRRSV的N蛋白表达量 | 第33-34页 |
3.2.7 TCID50检测PRRSV的病毒滴度 | 第34页 |
3.2.8 PAM细胞核质组分分离及LncRNA TCONS_00179042 半定量分析 | 第34-35页 |
3.2.9 LncRNA TCONS_00179042 靶基因预测 | 第35页 |
3.2.10 数据分析 | 第35页 |
3.3 实验结果 | 第35-40页 |
3.3.1 LncRNA TCONS_00179042 过表达载体构建 | 第35-36页 |
3.3.2 实时荧光定量PCR检测LncRNA TCONS_00179042 的表达变化 | 第36-37页 |
3.3.3 LncRNA TCONS_00179042 对PRRSV复制的影响 | 第37-38页 |
3.3.4 半定量分析LncRNA TCONS_00179042 在细胞内的分布情况 | 第38-39页 |
3.3.5 LncRNA TCONS_00179042 靶基因预测 | 第39-40页 |
3.4 讨论 | 第40-42页 |
第四章 全文结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |