摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
1 引言 | 第12-26页 |
1.1 土壤盐渍化对农作物产量的影响 | 第12-13页 |
1.1.1 土壤盐渍化概况 | 第12页 |
1.1.2 盐胁迫对植物的伤害及产量的影响 | 第12-13页 |
1.2 植物对盐胁迫的响应及其防御机制 | 第13-22页 |
1.2.1 渗透胁迫信号与相关基因的表达 | 第13-16页 |
1.2.2 ABA依赖的信号转导通路及相关基因 | 第16-17页 |
1.2.3 盐胁迫响应的转录因子 | 第17-22页 |
1.3 番茄耐盐性研究进展 | 第22-23页 |
1.4 课题的提出与研究目的及意义 | 第23-25页 |
1.5 课题的技术路线 | 第25页 |
1.6 课题的创新点 | 第25-26页 |
2 超表达和沉默SlSTE1基因的转基因番茄幼苗对盐胁迫的敏感性分析 | 第26-32页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第26-27页 |
2.1.1 实验材料 | 第26页 |
2.1.2 实验试剂 | 第26-27页 |
2.1.3 实验仪器 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-28页 |
2.2.1 番茄种子的消毒 | 第27-28页 |
2.2.2 番茄幼苗的盐处理和培养 | 第28页 |
2.3 结果分析 | 第28-30页 |
2.3.1 盐胁迫对野生型、SlSTE1超表达和沉默转基因番茄幼苗表型的影响 | 第28-29页 |
2.3.2 盐胁迫下野生型、SlSTE1超表达和沉默转基因番茄幼苗茎和根的长度统计 | 第29-30页 |
2.4 小结 | 第30-32页 |
3 超表达和沉默SlSTE1基因的番茄植株对盐胁迫的耐受性分析 | 第32-40页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第32页 |
3.1.1 实验材料 | 第32页 |
3.1.2 实验试剂 | 第32页 |
3.1.3 实验仪器 | 第32页 |
3.2 实验方法 | 第32-35页 |
3.2.1 番茄种子的消毒 | 第32页 |
3.2.2 番茄的培养、处理和取样 | 第32-33页 |
3.2.3 叶绿素含量的测定 | 第33页 |
3.2.4 丙二醛含量的测定 | 第33-34页 |
3.2.5 超氧化物歧化酶含量的测定 | 第34页 |
3.2.6 过氧化氢酶含量的测定 | 第34-35页 |
3.3 结果分析 | 第35-38页 |
3.3.1 WT、超表达和沉默SlSTE1基因的转基因番茄在盐胁迫下的表型变化 | 第35-36页 |
3.3.2 WT、超表达和沉默SlSTE1基因的番茄植株在盐胁迫下叶绿素含量的变化 | 第36页 |
3.3.3 WT、超表达和沉默SlSTE1基因的番茄植株在盐胁迫下丙二醛含量的变化 | 第36-37页 |
3.3.4 WT、超表达和沉默SlSTE1基因的番茄植株在盐胁迫下超氧化物歧化酶活性的变化 | 第37-38页 |
3.3.5 WT、超表达和沉默SlSTE1基因的番茄植株在盐胁迫下过氧化氢酶活性的变化 | 第38页 |
3.4 小结 | 第38-40页 |
4 超表达和沉默SlSTE1基因的转基因番茄幼苗对ABA的敏感性分析 | 第40-48页 |
4.1 实验材料与试剂 | 第40-41页 |
4.1.1 实验材料 | 第40页 |
4.1.2 实验试剂 | 第40页 |
4.1.3 实验仪器 | 第40-41页 |
4.2 实验方法 | 第41-43页 |
4.2.1 番茄种子的消毒 | 第41页 |
4.2.2 番茄幼苗的ABA处理和培养 | 第41页 |
4.2.3 番茄叶中RNA的提取 | 第41-42页 |
4.2.4 cDNA的合成 | 第42页 |
4.2.5 ABA相关基因的表达特异性分析 | 第42-43页 |
4.3 数据统计及结果分析 | 第43-47页 |
4.3.1 ABA对野生型、超表达和沉默SlSTE1基因的转基因番茄幼苗表型的影响 | 第43-44页 |
4.3.2 盐胁迫下野生型、超表达和沉默SlSTE1基因的转基因番茄幼苗茎和根的长度统计 | 第44-45页 |
4.3.3 番茄叶中RNA的提取与鉴定 | 第45-46页 |
4.3.4 ABA相关基因的表达 | 第46-47页 |
4.4 小结 | 第47-48页 |
5 SlSTE1蛋白与ABA信号途径相关蛋白的互作分析 | 第48-64页 |
5.1 实验材料和试剂 | 第48-49页 |
5.1.1 实验材料 | 第48页 |
5.1.2 实验试剂 | 第48-49页 |
5.2 实验方法 | 第49-56页 |
5.2.1 番茄总RNA的提取 | 第49页 |
5.2.2 cDNA的合成 | 第49-50页 |
5.2.3 SlSTE1、SlPYLs基因的克隆 | 第50-51页 |
5.2.4 SlSTE1与pGAKT-7和pGBKT-7载体的连接与转化 | 第51-52页 |
5.2.5 SlPYLs与pGBKT-7载体的连接与转化 | 第52页 |
5.2.6 菌落PCR | 第52-53页 |
5.2.7 质粒的提取 | 第53页 |
5.2.8 酵母菌感受态的制备 | 第53-54页 |
5.2.9 诱饵载体、猎物载体和对照载体的酵母转化 | 第54-55页 |
5.2.10 酵母的结合转移和蛋白间互作 | 第55-56页 |
5.3 结果分析 | 第56-63页 |
5.3.1 SlSTE1与pGAKT-7和pGBKT-7载体的连接 | 第56页 |
5.3.2 SlPYLs与pGBKT-7载体的连接 | 第56-62页 |
5.3.3 SlSTE1蛋白与ABA受体SlPYLs和正调控因子SlSnRK2s之间的蛋白互作分析 | 第62-63页 |
5.4 小结 | 第63-64页 |
6 超表达SlSTE1基因的转基因番茄植株的转录组分析 | 第64-82页 |
6.1 实验材料和试剂 | 第64页 |
6.1.1 实验材料 | 第64页 |
6.1.2 实验试剂 | 第64页 |
6.2 实验方法 | 第64-66页 |
6.2.1 番茄的培养、处理和取样 | 第64页 |
6.2.2 番茄根和叶RNA的提取 | 第64页 |
6.2.3 cDNA的合成 | 第64页 |
6.2.4 盐胁迫下表达上调的转录因子的定量RT-PCR引物的设计 | 第64-66页 |
6.2.5 盐胁迫下表达上调的胁迫相关基因的定量RT-PCR引物的设计 | 第66页 |
6.2.6 盐胁迫下表达上调相关基因的表达特性分析 | 第66页 |
6.3 结果分析 | 第66-79页 |
6.3.1 转录组测序 | 第66-69页 |
6.3.2 番茄根和叶RNA的提取与鉴定 | 第69-70页 |
6.3.3 在转录组测序中获得的盐胁迫下上调或下降的转录因子 | 第70-71页 |
6.3.4 在转录组测序中获得的盐胁迫下表达上调的胁迫相关基因 | 第71-76页 |
6.3.5 在转录组测序中获得的盐胁迫下植物激素代谢和信号转导相关的差异表达基因 | 第76-78页 |
6.3.6 盐胁迫下SlSTE1超表达番茄中上调的胁迫相关基因表达特性分析 | 第78页 |
6.3.7 盐胁迫下SlSTE1超表达番茄中上调的转录因子的表达特性分析 | 第78-79页 |
6.4 小结 | 第79-82页 |
7 讨论与展望 | 第82-86页 |
7.1 讨论 | 第82-84页 |
7.2 展望 | 第84-86页 |
参考文献 | 第86-98页 |
致谢 | 第98-100页 |
作者简历 | 第100-102页 |
学位论文数据集 | 第102页 |