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番茄SlSTE1基因的耐盐功能研究及其调控机理探索

摘要第4-6页
abstract第6-7页
1 引言第12-26页
    1.1 土壤盐渍化对农作物产量的影响第12-13页
        1.1.1 土壤盐渍化概况第12页
        1.1.2 盐胁迫对植物的伤害及产量的影响第12-13页
    1.2 植物对盐胁迫的响应及其防御机制第13-22页
        1.2.1 渗透胁迫信号与相关基因的表达第13-16页
        1.2.2 ABA依赖的信号转导通路及相关基因第16-17页
        1.2.3 盐胁迫响应的转录因子第17-22页
    1.3 番茄耐盐性研究进展第22-23页
    1.4 课题的提出与研究目的及意义第23-25页
    1.5 课题的技术路线第25页
    1.6 课题的创新点第25-26页
2 超表达和沉默SlSTE1基因的转基因番茄幼苗对盐胁迫的敏感性分析第26-32页
    2.1 实验材料与试剂第26-27页
        2.1.1 实验材料第26页
        2.1.2 实验试剂第26-27页
        2.1.3 实验仪器第27页
    2.2 实验方法第27-28页
        2.2.1 番茄种子的消毒第27-28页
        2.2.2 番茄幼苗的盐处理和培养第28页
    2.3 结果分析第28-30页
        2.3.1 盐胁迫对野生型、SlSTE1超表达和沉默转基因番茄幼苗表型的影响第28-29页
        2.3.2 盐胁迫下野生型、SlSTE1超表达和沉默转基因番茄幼苗茎和根的长度统计第29-30页
    2.4 小结第30-32页
3 超表达和沉默SlSTE1基因的番茄植株对盐胁迫的耐受性分析第32-40页
    3.1 实验材料与试剂第32页
        3.1.1 实验材料第32页
        3.1.2 实验试剂第32页
        3.1.3 实验仪器第32页
    3.2 实验方法第32-35页
        3.2.1 番茄种子的消毒第32页
        3.2.2 番茄的培养、处理和取样第32-33页
        3.2.3 叶绿素含量的测定第33页
        3.2.4 丙二醛含量的测定第33-34页
        3.2.5 超氧化物歧化酶含量的测定第34页
        3.2.6 过氧化氢酶含量的测定第34-35页
    3.3 结果分析第35-38页
        3.3.1 WT、超表达和沉默SlSTE1基因的转基因番茄在盐胁迫下的表型变化第35-36页
        3.3.2 WT、超表达和沉默SlSTE1基因的番茄植株在盐胁迫下叶绿素含量的变化第36页
        3.3.3 WT、超表达和沉默SlSTE1基因的番茄植株在盐胁迫下丙二醛含量的变化第36-37页
        3.3.4 WT、超表达和沉默SlSTE1基因的番茄植株在盐胁迫下超氧化物歧化酶活性的变化第37-38页
        3.3.5 WT、超表达和沉默SlSTE1基因的番茄植株在盐胁迫下过氧化氢酶活性的变化第38页
    3.4 小结第38-40页
4 超表达和沉默SlSTE1基因的转基因番茄幼苗对ABA的敏感性分析第40-48页
    4.1 实验材料与试剂第40-41页
        4.1.1 实验材料第40页
        4.1.2 实验试剂第40页
        4.1.3 实验仪器第40-41页
    4.2 实验方法第41-43页
        4.2.1 番茄种子的消毒第41页
        4.2.2 番茄幼苗的ABA处理和培养第41页
        4.2.3 番茄叶中RNA的提取第41-42页
        4.2.4 cDNA的合成第42页
        4.2.5 ABA相关基因的表达特异性分析第42-43页
    4.3 数据统计及结果分析第43-47页
        4.3.1 ABA对野生型、超表达和沉默SlSTE1基因的转基因番茄幼苗表型的影响第43-44页
        4.3.2 盐胁迫下野生型、超表达和沉默SlSTE1基因的转基因番茄幼苗茎和根的长度统计第44-45页
        4.3.3 番茄叶中RNA的提取与鉴定第45-46页
        4.3.4 ABA相关基因的表达第46-47页
    4.4 小结第47-48页
5 SlSTE1蛋白与ABA信号途径相关蛋白的互作分析第48-64页
    5.1 实验材料和试剂第48-49页
        5.1.1 实验材料第48页
        5.1.2 实验试剂第48-49页
    5.2 实验方法第49-56页
        5.2.1 番茄总RNA的提取第49页
        5.2.2 cDNA的合成第49-50页
        5.2.3 SlSTE1、SlPYLs基因的克隆第50-51页
        5.2.4 SlSTE1与pGAKT-7和pGBKT-7载体的连接与转化第51-52页
        5.2.5 SlPYLs与pGBKT-7载体的连接与转化第52页
        5.2.6 菌落PCR第52-53页
        5.2.7 质粒的提取第53页
        5.2.8 酵母菌感受态的制备第53-54页
        5.2.9 诱饵载体、猎物载体和对照载体的酵母转化第54-55页
        5.2.10 酵母的结合转移和蛋白间互作第55-56页
    5.3 结果分析第56-63页
        5.3.1 SlSTE1与pGAKT-7和pGBKT-7载体的连接第56页
        5.3.2 SlPYLs与pGBKT-7载体的连接第56-62页
        5.3.3 SlSTE1蛋白与ABA受体SlPYLs和正调控因子SlSnRK2s之间的蛋白互作分析第62-63页
    5.4 小结第63-64页
6 超表达SlSTE1基因的转基因番茄植株的转录组分析第64-82页
    6.1 实验材料和试剂第64页
        6.1.1 实验材料第64页
        6.1.2 实验试剂第64页
    6.2 实验方法第64-66页
        6.2.1 番茄的培养、处理和取样第64页
        6.2.2 番茄根和叶RNA的提取第64页
        6.2.3 cDNA的合成第64页
        6.2.4 盐胁迫下表达上调的转录因子的定量RT-PCR引物的设计第64-66页
        6.2.5 盐胁迫下表达上调的胁迫相关基因的定量RT-PCR引物的设计第66页
        6.2.6 盐胁迫下表达上调相关基因的表达特性分析第66页
    6.3 结果分析第66-79页
        6.3.1 转录组测序第66-69页
        6.3.2 番茄根和叶RNA的提取与鉴定第69-70页
        6.3.3 在转录组测序中获得的盐胁迫下上调或下降的转录因子第70-71页
        6.3.4 在转录组测序中获得的盐胁迫下表达上调的胁迫相关基因第71-76页
        6.3.5 在转录组测序中获得的盐胁迫下植物激素代谢和信号转导相关的差异表达基因第76-78页
        6.3.6 盐胁迫下SlSTE1超表达番茄中上调的胁迫相关基因表达特性分析第78页
        6.3.7 盐胁迫下SlSTE1超表达番茄中上调的转录因子的表达特性分析第78-79页
    6.4 小结第79-82页
7 讨论与展望第82-86页
    7.1 讨论第82-84页
    7.2 展望第84-86页
参考文献第86-98页
致谢第98-100页
作者简历第100-102页
学位论文数据集第102页

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