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丹参SmbHLH7转录因子的克隆与功能初探

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
缩写词表第8-12页
第一章 文献综述第12-23页
    1.1 丹参简介第12页
    1.2 丹参药用活性成分第12-18页
        1.2.1 脂溶性的丹参酮第12-16页
        1.2.2 水溶性丹酚酸第16-18页
    1.3 bHLH转录因子第18-20页
        1.3.1 bHLH转录因子概述第18-19页
        1.3.2 bHLH转录因子的结构特点第19页
        1.3.3 bHLH转录因子的生物学功能及研究进展第19-20页
    1.4 丹参次生代谢工程第20-22页
        1.4.1 茉莉酸信号通路及其对丹参次生代谢的影响第20-21页
        1.4.2 丹参次生代谢工程的研究进展第21-22页
    1.5 本课题研究的意义第22-23页
第二章 实验材料与方法第23-52页
    2.1 实验材料第23-28页
        2.1.1 植物材料及培养方法第23页
        2.1.2 菌种与质粒第23-24页
        2.1.3 仪器设备第24-25页
        2.1.4 试剂及药品第25-26页
        2.1.5 常用培养基及试剂的配制第26-28页
    2.2 实验方法第28-52页
        2.2.1 丹参无菌苗的扩大繁殖第28页
        2.2.2 丹参SmbHLH7转录因子的筛选第28-29页
        2.2.3 丹参SmbHLH7基因的克隆及测序分析第29-31页
        2.2.4 SmbHLH7生物信息学分析第31-32页
        2.2.5 SmbHLH7表达模式分析第32-36页
        2.2.6 SmbHLH7亚细胞定位第36-40页
        2.2.7 植物表达载体的构建第40页
        2.2.8 农杆菌C58C1介导的植物表达载体遗传转化第40-41页
        2.2.9 转基因毛状根的阳性鉴定第41-42页
        2.2.10 SmbHLH7丹参转基因毛状根qRT-PCR分析第42-43页
        2.2.11 SmbHLH7转基因丹参毛状根含量检测第43-45页
        2.2.12 酵母单杂交实验第45-48页
        2.2.13 Dual-LuciferaseAssays第48-49页
        2.2.14 酵母双杂交实验第49-50页
        2.2.15 双分子免疫荧光互补实验(BiFC)第50-52页
第三章 结果与讨论第52-80页
    3.1 SmbHLH7基因的筛选及MJ与YE诱导热图分析第52-53页
    3.2 SmbHLH7基因的克隆第53-54页
    3.3 SmbHLH7序列的生物信息学分析第54-56页
    3.4 SmbHLH7表达模式分析第56-62页
        3.4.1 组织表达谱分析:第56-57页
        3.4.2 SmbHLH7诱导表达谱分析第57-59页
        3.4.3 SmbHLH7亚细胞定位第59-62页
    3.5 SmbHLH7植物表达载体的构建第62-63页
    3.6 SmbHLH7转基因毛状根的获得第63-65页
        3.6.1 发根农杆菌C58C1介导的丹参外植体转化第63页
        3.6.2 SmbHLH7转基因丹参毛状根阳性鉴定第63-65页
    3.7 SmbHLH7转基因丹参毛状根阳性克隆的qRT-PCR分析第65-71页
        3.7.1 SmbHLH7转基因丹参毛状根转录水平检测第65-66页
        3.7.2 SmbHLH7转基因丹参毛状根丹参酮关键酶基因表达水平检测第66-69页
        3.7.3 SmbHLH7转基因丹参毛状根丹酚酸关键酶基因表达水平检测第69-71页
    3.8 SmbHLH7转基因丹参毛状根含量检测第71-75页
        3.8.1 SmbHLH7转基因丹参毛状根表形观察及生物量检测第71-72页
        3.8.2 SmbHLH7转基因丹参毛状根丹参酮含量检测第72-74页
        3.8.3 SmbHLH7转基因丹参毛状根丹参酮含量检测第74-75页
    3.9 酵母单杂交实验第75-76页
    3.10 Dual-luciferaseassays第76-78页
    3.11 酵母双杂交实验第78页
    3.12 BiFC实验第78-80页
第四章 总结与展望第80-83页
    4.1 研究总结第80-81页
    4.2 研究展望第81-83页
参考文献第83-87页
致谢第87-88页
已发表论文第88-90页
附件第90页

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