摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩写词表 | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-23页 |
1.1 丹参简介 | 第12页 |
1.2 丹参药用活性成分 | 第12-18页 |
1.2.1 脂溶性的丹参酮 | 第12-16页 |
1.2.2 水溶性丹酚酸 | 第16-18页 |
1.3 bHLH转录因子 | 第18-20页 |
1.3.1 bHLH转录因子概述 | 第18-19页 |
1.3.2 bHLH转录因子的结构特点 | 第19页 |
1.3.3 bHLH转录因子的生物学功能及研究进展 | 第19-20页 |
1.4 丹参次生代谢工程 | 第20-22页 |
1.4.1 茉莉酸信号通路及其对丹参次生代谢的影响 | 第20-21页 |
1.4.2 丹参次生代谢工程的研究进展 | 第21-22页 |
1.5 本课题研究的意义 | 第22-23页 |
第二章 实验材料与方法 | 第23-52页 |
2.1 实验材料 | 第23-28页 |
2.1.1 植物材料及培养方法 | 第23页 |
2.1.2 菌种与质粒 | 第23-24页 |
2.1.3 仪器设备 | 第24-25页 |
2.1.4 试剂及药品 | 第25-26页 |
2.1.5 常用培养基及试剂的配制 | 第26-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-52页 |
2.2.1 丹参无菌苗的扩大繁殖 | 第28页 |
2.2.2 丹参SmbHLH7转录因子的筛选 | 第28-29页 |
2.2.3 丹参SmbHLH7基因的克隆及测序分析 | 第29-31页 |
2.2.4 SmbHLH7生物信息学分析 | 第31-32页 |
2.2.5 SmbHLH7表达模式分析 | 第32-36页 |
2.2.6 SmbHLH7亚细胞定位 | 第36-40页 |
2.2.7 植物表达载体的构建 | 第40页 |
2.2.8 农杆菌C58C1介导的植物表达载体遗传转化 | 第40-41页 |
2.2.9 转基因毛状根的阳性鉴定 | 第41-42页 |
2.2.10 SmbHLH7丹参转基因毛状根qRT-PCR分析 | 第42-43页 |
2.2.11 SmbHLH7转基因丹参毛状根含量检测 | 第43-45页 |
2.2.12 酵母单杂交实验 | 第45-48页 |
2.2.13 Dual-LuciferaseAssays | 第48-49页 |
2.2.14 酵母双杂交实验 | 第49-50页 |
2.2.15 双分子免疫荧光互补实验(BiFC) | 第50-52页 |
第三章 结果与讨论 | 第52-80页 |
3.1 SmbHLH7基因的筛选及MJ与YE诱导热图分析 | 第52-53页 |
3.2 SmbHLH7基因的克隆 | 第53-54页 |
3.3 SmbHLH7序列的生物信息学分析 | 第54-56页 |
3.4 SmbHLH7表达模式分析 | 第56-62页 |
3.4.1 组织表达谱分析: | 第56-57页 |
3.4.2 SmbHLH7诱导表达谱分析 | 第57-59页 |
3.4.3 SmbHLH7亚细胞定位 | 第59-62页 |
3.5 SmbHLH7植物表达载体的构建 | 第62-63页 |
3.6 SmbHLH7转基因毛状根的获得 | 第63-65页 |
3.6.1 发根农杆菌C58C1介导的丹参外植体转化 | 第63页 |
3.6.2 SmbHLH7转基因丹参毛状根阳性鉴定 | 第63-65页 |
3.7 SmbHLH7转基因丹参毛状根阳性克隆的qRT-PCR分析 | 第65-71页 |
3.7.1 SmbHLH7转基因丹参毛状根转录水平检测 | 第65-66页 |
3.7.2 SmbHLH7转基因丹参毛状根丹参酮关键酶基因表达水平检测 | 第66-69页 |
3.7.3 SmbHLH7转基因丹参毛状根丹酚酸关键酶基因表达水平检测 | 第69-71页 |
3.8 SmbHLH7转基因丹参毛状根含量检测 | 第71-75页 |
3.8.1 SmbHLH7转基因丹参毛状根表形观察及生物量检测 | 第71-72页 |
3.8.2 SmbHLH7转基因丹参毛状根丹参酮含量检测 | 第72-74页 |
3.8.3 SmbHLH7转基因丹参毛状根丹参酮含量检测 | 第74-75页 |
3.9 酵母单杂交实验 | 第75-76页 |
3.10 Dual-luciferaseassays | 第76-78页 |
3.11 酵母双杂交实验 | 第78页 |
3.12 BiFC实验 | 第78-80页 |
第四章 总结与展望 | 第80-83页 |
4.1 研究总结 | 第80-81页 |
4.2 研究展望 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
已发表论文 | 第88-90页 |
附件 | 第90页 |