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基于多重微滴PCR偶联荧光分光光度法生物基因定性、定量、高通量检测技术研究

摘要第2-4页
abstract第4-6页
第一章 绪论第10-21页
    1.1 转基因植物研究进展第10-12页
        1.1.1 转基因植物发展现状第10页
        1.1.2 国内外转基因植物产业化现状第10-11页
        1.1.3 转基因植物安全性第11-12页
    1.2 食源性病原微生物第12-16页
        1.2.1 食源性病原微生物危害第12-13页
        1.2.2 四种主要食源性病原菌介绍第13-16页
            1.2.2.1 沙门氏菌第13-14页
            1.2.2.2 单增李斯特菌第14-15页
            1.2.2.3 大肠杆菌O157:H第15页
            1.2.2.4 金黄色葡萄球菌第15-16页
    1.3 核酸检测技术第16-18页
        1.3.1 定性传统 PCR 检测技术第16-17页
        1.3.2 定量PCR检测技术第17-18页
        1.3.3 基因芯片技术第18页
    1.4 研究的目的和意义第18-21页
第二章 微滴 PCR 偶联荧光分光光度法高通量检测转基因玉米第21-40页
    2.1 材料与方法第21-30页
        2.1.1 材料第21-22页
        2.1.2 试剂第22页
        2.1.3 主要仪器设备第22-23页
        2.1.4 实验方法第23-30页
            2.1.4.1 引物设计第23页
            2.1.4.2 荧光基团的选择第23-24页
            2.1.4.3 植物基因组DNA的提取和纯化第24页
            2.1.4.4 四种转基因玉米旁临序列扩增第24-25页
            2.1.4.5 PCR产物胶回收第25-26页
            2.1.4.7 阳性克隆鉴定及测序第26页
            2.1.4.8 质粒的抽提和纯化第26页
            2.1.4.9 微滴PCR偶联分光光度法方法的建立第26-30页
    2.2 结果与分析第30-38页
        2.2.1 微滴PCR偶联分光光度法设计原理第30-31页
        2.2.2 基因组 DNA 的提取结果第31页
        2.2.3 菌落PCR鉴定结果第31-32页
        2.2.4 温度优化结果第32-33页
        2.2.5 特异性实验结果第33-34页
        2.2.6 单重灵敏度实验结果第34-35页
        2.2.7 建立单重标准曲线实验结果第35页
        2.2.8 多重特异性实验结果第35-36页
        2.2.9 多重灵敏度检测实验结果第36页
        2.2.10 建立多重检测标准曲线实验结果第36-37页
        2.2.11 重复性实验结果第37页
        2.2.12 模拟样品检测结果第37-38页
    2.3 讨论第38-40页
第三章 微滴PCR偶联分光光度法检测四种食源性病原菌第40-45页
    3.1 材料与方法第40-42页
        3.1.1 材料第40页
        3.1.2 实验方法第40-42页
            3.1.2.1 引物的序列与合成第40-41页
            3.1.2.2 微滴PCR反应体系第41页
            3.1.2.3 特异性实验第41页
            3.1.2.4 建立标准曲线第41页
            3.1.2.5 重复性实验第41-42页
    3.2 结果与分析第42-43页
        3.2.1 特异性实验第42页
        3.2.2 建立多重标准曲线实验第42-43页
        3.2.3 重复性实验第43页
    3.3 讨论第43-45页
第四章 全文总结第45-48页
参考文献第48-52页
攻读学位期间取得的研究成果第52-53页
致谢第53-54页

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