摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-9页 |
缩略词表 | 第10-21页 |
第一章 绪论 | 第21-31页 |
1.1 玉米赤霉烯酮概述 | 第21页 |
1.2 玉米赤霉烯酮危害 | 第21-24页 |
1.2.1 玉米赤霉烯酮的急性毒性 | 第22页 |
1.2.2 玉米赤霉烯酮的慢性毒性 | 第22-23页 |
1.2.3 玉米赤霉烯酮的生殖、发育毒性 | 第23页 |
1.2.4 玉米赤霉烯酮的免疫毒性 | 第23页 |
1.2.5 玉米赤霉烯酮的遗传毒性 | 第23页 |
1.2.6 玉米赤霉烯酮对人类危害 | 第23-24页 |
1.3 玉米赤霉烯酮的污染现状 | 第24-25页 |
1.4 玉米赤霉烯酮的限定 | 第25-26页 |
1.5 玉米赤霉烯酮的检测方法 | 第26-27页 |
1.5.1 薄层分析法(TLC) | 第26页 |
1.5.2 生物学方法 | 第26页 |
1.5.3 高效液相色谱检测法(HPLC) | 第26-27页 |
1.5.4 免疫吸附法 | 第27页 |
1.6 玉米赤霉烯酮的消减 | 第27-31页 |
1.6.1 物理法 | 第27-28页 |
1.6.2 化学法 | 第28-29页 |
1.6.3 生物法 | 第29-31页 |
第二章 玉米赤霉烯酮降解微生物的筛选与鉴定 | 第31-43页 |
2.1 实验材料 | 第31-34页 |
2.1.1 仪器设备 | 第31-32页 |
2.1.2 酶与试剂 | 第32页 |
2.1.3 菌株与质粒 | 第32-33页 |
2.1.4 培养基与抗生素 | 第33页 |
2.1.5 常用溶液与缓冲液 | 第33页 |
2.1.6 样品来源 | 第33-34页 |
2.2 实验方法 | 第34-37页 |
2.2.1 ZEN检测方法 | 第34-35页 |
2.2.2 降解微生物的筛选 | 第35页 |
2.2.3 降解微生物的鉴定 | 第35-37页 |
2.3 结果与分析 | 第37-41页 |
2.3.1 标准曲线的绘制 | 第37-38页 |
2.3.2 降解微生物的筛选 | 第38-39页 |
2.3.3 降解微生物的鉴定 | 第39-41页 |
2.4 本章小结 | 第41-43页 |
第三章 香茅醇假单胞ASAG16的ZEN降解特性 | 第43-51页 |
3.1 实验材料 | 第43-44页 |
3.1.1 主要仪器设备 | 第43页 |
3.1.2 培养基与试剂 | 第43-44页 |
3.2 实验方法 | 第44-45页 |
3.2.1 菌株ASAG16对ZEN的吸附 | 第44页 |
3.2.2 菌株ASAG16培养液对ZEN的降解 | 第44页 |
3.2.3 不同培养基对菌株ASAG16降解能力的影响 | 第44-45页 |
3.2.4 培养时间对菌株ASAG16降解ZEN能力的影响 | 第45页 |
3.2.5 初始pH值对菌株ASAG16降解ZEN能力的影响 | 第45页 |
3.2.6 接种量对菌株ASAG16降解ZEN能力的影响 | 第45页 |
3.2.7 金属离子和EDTA对菌株ASAG16降解ZEN能力的影响 | 第45页 |
3.3 结果与分析 | 第45-50页 |
3.3.1 ASAG16对ZEN的吸附 | 第45-46页 |
3.3.2 ASAG16培养液对ZEN的降解 | 第46页 |
3.3.3 不同培养基对菌株ASAG16降解ZEN能力的影响 | 第46-47页 |
3.3.4 培养时间对菌株ASAG16降解ZEN能力的影响 | 第47-48页 |
3.3.5 初始pH值对菌株ASAG16降解ZEN能力的影响 | 第48页 |
3.3.6 接种量对菌株ASAG16降解ZEN能力的影响 | 第48-49页 |
3.3.7 金属离子和EDTA对菌株ASAG16降解ZEN能力的影响 | 第49-50页 |
3.4 本章小结 | 第50-51页 |
第四章 降解机理初步解析 | 第51-59页 |
4.1 实验材料 | 第51页 |
4.1.1 主要仪器与设备 | 第51页 |
4.1.2 试剂与溶液 | 第51页 |
4.2 实验方法 | 第51-52页 |
4.2.1 ZEN降解降解产物液相色谱分析 | 第51页 |
4.2.2 ZEN降解降解产物质谱初步解析 | 第51-52页 |
4.3 结果与分析 | 第52-54页 |
4.3.1 降解样品液相分析 | 第52-53页 |
4.3.2 一级质谱结果分析 | 第53页 |
4.3.3 二级质谱结果分析 | 第53页 |
4.3.4 液相收集样品质谱分析 | 第53-54页 |
4.4 本章小结 | 第54-59页 |
第五章 转座突变体库的构建和突变子的筛选 | 第59-73页 |
5.1 实验材料 | 第59-62页 |
5.1.1 主要仪器与设备 | 第59页 |
5.1.2 酶与试剂 | 第59页 |
5.1.3 培养基、抗生素与溶液 | 第59-60页 |
5.1.4 菌株与质粒 | 第60-62页 |
5.2 实验方法 | 第62-67页 |
5.2.1 利用转座子获得相关基因的策略 | 第62-63页 |
5.2.2 香茅醇假单胞感受态的制备 | 第63页 |
5.2.3 香茅醇假单胞电击转化 | 第63页 |
5.2.4 转座菌株抗性验证 | 第63-64页 |
5.2.5 质粒提取验证验证 | 第64页 |
5.2.6 PCR鉴定 | 第64-65页 |
5.2.7 突变体库的筛选 | 第65-67页 |
5.3 结果与分析 | 第67-72页 |
5.3.1 质粒提取验证 | 第67页 |
5.3.2 转座菌株抗性验证 | 第67页 |
5.3.3 PCR鉴定 | 第67-68页 |
5.3.4 突变体库的筛选 | 第68-72页 |
5.3.5 功能缺陷型突变子筛选及降解特性 | 第72页 |
5.4 本章小结 | 第72-73页 |
第六章 目的基因的定位分析 | 第73-81页 |
6.1 实验材料 | 第73-74页 |
6.1.1 主要仪器与设备 | 第73页 |
6.1.2 酶与试剂 | 第73页 |
6.1.3 培养基、抗生素与溶液 | 第73-74页 |
6.2 实验方法 | 第74-77页 |
6.2.1 香茅醇假单胞ASAG16基因组的提取 | 第74页 |
6.2.2 大肠杆菌感受态的制备 | 第74页 |
6.2.3 基因组DNA的部分酶切 | 第74-75页 |
6.2.4 酶切产物的纯化 | 第75页 |
6.2.5 酶切产物的自连转化 | 第75页 |
6.2.6 大肠杆菌的转化 | 第75页 |
6.2.7 大肠杆菌质粒的提取 | 第75-76页 |
6.2.8 重组质粒的酶切验证 | 第76页 |
6.2.9 转座子侧翼序列的克隆 | 第76-77页 |
6.3 结果与分析 | 第77-79页 |
6.3.1 基因组部分酶切结果 | 第77页 |
6.3.2 大肠杆菌克隆子质粒的提取 | 第77-78页 |
6.3.3 重组质粒的酶切验证 | 第78页 |
6.3.4 侧翼序列的测定 | 第78-79页 |
6.4 本章小结 | 第79-81页 |
第七章 结论与建议 | 第81-83页 |
7.1 结论 | 第81-82页 |
7.2 建议 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-87页 |
附录 | 第87-91页 |
附录一 香茅醇假单胞AGSAG16的16S rDNA序列 | 第87-88页 |
附录二 斯氏假单胞AGSAG17的16S rDNA序列 | 第88-89页 |
附录三 侧翼序列基因序列 | 第89-91页 |
致谢 | 第91-93页 |
研究成果及发表的学术论文 | 第93-95页 |
作者和导师简介 | 第95-96页 |
附件 | 第96-97页 |