中文摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
符号说明 | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-22页 |
1 禽源大肠杆菌的耐药现状 | 第9-10页 |
2 耐药性的产生与影响因素 | 第10-11页 |
3 喹诺酮类药物的研究进展 | 第11-13页 |
3.1 喹诺酮类药物的应用发展 | 第11页 |
3.2 喹诺酮类药物的作用机理 | 第11-13页 |
4 细菌对喹诺酮类药物的耐药机制 | 第13-19页 |
4.1 药物作用靶位基因的突变 | 第13页 |
4.2 主动外排作用 | 第13-14页 |
4.3 膜通透性改变 | 第14-15页 |
4.4 质粒介导的喹诺酮类耐药 | 第15-19页 |
5 细菌耐药质粒消除的研究进展 | 第19-21页 |
5.1 物理方法消除耐药质粒 | 第19页 |
5.2 化学方法消除耐药质粒 | 第19-20页 |
5.3 药物法消除耐药质粒 | 第20页 |
5.4 中药法消除耐药质粒 | 第20-21页 |
6 本研究的目的意义 | 第21-22页 |
第二章 质粒介导的氟喹诺酮类耐药基因的检测及体外抑菌试验 | 第22-37页 |
1 材料 | 第22-23页 |
1.1 仪器与设备 | 第22-23页 |
1.2 主要试剂 | 第23页 |
1.3 试验菌株 | 第23页 |
2 试验方法 | 第23-29页 |
2.1 培养基的制备 | 第23-24页 |
2.2 细菌的复苏和保存 | 第24页 |
2.3 PMQR基因的检测 | 第24-27页 |
2.4 qnrD基因的TA克隆 | 第27页 |
2.5 恩诺沙星对大肠杆菌MIC测定 | 第27-29页 |
3 结果与分析 | 第29-35页 |
3.1 PMQR基因检测结果 | 第29-32页 |
3.2 耐药基因qnrD的TA克隆 | 第32页 |
3.3 体外抑菌试验结果 | 第32-35页 |
4 讨论 | 第35-36页 |
5 小结 | 第36-37页 |
第三章 中药对质粒介导耐药性的消除作用及耐药基因表达量的影响 | 第37-53页 |
1 材料 | 第37-39页 |
1.1 仪器与设备 | 第37-38页 |
1.2 主要试剂 | 第38页 |
1.3 试验菌株 | 第38-39页 |
2 试验方法 | 第39-43页 |
2.1 中药提取液的制备 | 第39页 |
2.2 含SDS LB肉汤培养基的制备 | 第39页 |
2.3 含药LB琼脂培养基的制备 | 第39页 |
2.4 微量肉汤稀释法测定中药MIC | 第39-40页 |
2.5 细菌的耐药性消除培养 | 第40页 |
2.6 消除菌的筛选与鉴定 | 第40页 |
2.7 耐药基因消除菌的筛选 | 第40-41页 |
2.8 RT-qPCR检测耐药基因表达量的变化 | 第41-43页 |
3 结果与分析 | 第43-50页 |
3.1 不同中药对大肠杆菌MIC测定结果 | 第43-44页 |
3.2 大肠杆菌耐药性的消除率 | 第44-47页 |
3.3 耐药性消除菌PMQR基因的消除率 | 第47-49页 |
3.4 耐药基因aac(6’)-Ib-cr表达量的变化 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
4.1 中药对禽源大肠杆菌的抑菌效果 | 第50页 |
4.2 中药对大肠杆菌耐药性的消除作用 | 第50页 |
4.3 耐药基因的消除效果 | 第50-51页 |
4.4 消除前后耐药基因表达量的变化 | 第51页 |
4.5 中药消除耐药性的作用机理 | 第51-52页 |
5 小结 | 第52-53页 |
全文结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
在读期间发表的文章 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |