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组蛋白单泛素化E3连接酶、mediator complex亚基和维生素B6合成途径在番茄对灰霉病抗性反应中的功能研究

致谢第5-9页
摘要第9-12页
ABSTRACT第12-14页
第一章 文献综述和研究背景第15-33页
    1.1 植物与Botrytis cinerea互作机制研究进展第15-19页
        1.1.1 B.cinerea的侵染机制简介第15页
        1.1.2 植物细胞壁和角质层对B.cinerea的抗性研究第15-16页
        1.1.3 植物中ETI和PTI对B.cinerea的抗性研究第16-17页
        1.1.4 植物细胞坏死调节机制对B.cinerea的抗性研究第17-18页
        1.1.5 植物中激素调节作用对B.cinerea的抗性研究第18-19页
    1.2 RING家族E3泛素连接酶研究进展第19-23页
        1.2.1 泛素化途径简介第19-20页
        1.2.2 RING家族E3泛素连接酶的结构和特点第20页
        1.2.3 RING家族E3连接酶在非生物逆境中的作用第20-21页
        1.2.4 RING家族E3连接酶在抗病性中的作用第21-23页
    1.3 组蛋白单泛素化途径第23-26页
        1.3.1 组蛋白泛素化第23页
        1.3.2 组蛋白单泛素化产生的机制第23-24页
        1.3.3 组蛋白H2B单泛素化及脱泛素化相关的酶第24-25页
        1.3.4 组蛋白H2B单泛素化的作用第25页
        1.3.5 组蛋白H2B单泛素化的调控机制第25-26页
    1.4 Mediator complex在拟南芥中的研究进展第26-30页
        1.4.1 Mediator complex结构及特点第26-27页
        1.4.2 Mediator complex参与植物生长发育过程第27页
        1.4.3 Mediator complex参与植物对非生物逆境的响应第27-28页
        1.4.4 Mediator complex参与植物对生物逆境胁迫的响应第28-29页
        1.4.5 Mediator complex参与植物细胞内的其他生命活动第29-30页
    1.5 维生素B6研究进展第30-32页
        1.5.1 维生素B6简介第30页
        1.5.2 维生素B6合成途径第30页
        1.5.3 植物中维生素B6合成途径的相关基因第30-31页
        1.5.4 维生素B6在植物中的作用第31-32页
    1.6 本研究的目的意义及主要内容第32-33页
第二章 材料与方法第33-40页
    2.1 植物材料和生长条件第33页
    2.2 植物总RNA的提取第33页
    2.3 基因克隆鉴定第33-34页
    2.4 qRT-PCR表达分析第34页
    2.5 B.cinerea接种处理及病菌生长量测定第34页
    2.6 B.cinerea接种处理后基因表达分析第34页
    2.7 外源信号分子诱导处理第34-35页
    2.8 VIGS试验第35页
    2.9 活性氧检测第35页
    2.10 维生素B6含量测定第35-36页
    2.11 酵母转化试验第36页
    2.12 酵母互补试验第36页
    2.13 抗氧化物质检测第36-37页
    2.14 酵母双杂交试验第37页
    2.15 原核表达试验第37页
    2.16 蛋白复性试验第37页
    2.17 Western blot第37-38页
    2.18 组蛋白单泛素化活性体外测定试验第38页
    2.19 胼胝体染色试验第38-39页
    2.20 电镜观察细胞壁第39页
    2.21 失水率测定第39-40页
第三章 组蛋白单泛素化E3连接酶SIHUB1/SIHUB2在番茄对B.cinerea抗性反应中的功能研究第40-57页
    摘要第40-41页
    3.1 结果第41-54页
        3.1.1 番茄组蛋白单泛素化E3连接酶的克隆鉴定第41-42页
        3.1.2 S1HUB1和S1HUB2具有E3连接酶活性参与组蛋白单泛素化第42-43页
        3.1.3 SlHUB1和SlHUB2沉默后增加了番茄植株对B.cinerea的敏感性第43-44页
        3.1.4 SlHUB1和SlHUB2在激素处理或病害接种后的表达谱分析第44-45页
        3.1.5 S1MED21不参与S1HUB1对B.cinerea的抗性作用第45-47页
        3.1.6 SlHUB1和SlHUB2沉默后减弱了细胞壁对B.cinerea的抗性作用第47-48页
        3.1.7 SlHUB1和SlHUB2沉默植株接种B.cinerea后活性氧和胼胝体积累增加第48-51页
        3.1.8 SlHUB1和SlHUB2沉默后改变了B.cinerea诱导的多种途径基因的表达第51-54页
    3.2 讨论第54-57页
第四章 Mediator complex亚基在番茄对B.cinerea抗性反应中的功能研究第57-71页
    摘要第57-58页
    4.1 结果第58-68页
        4.1.1 番茄mediator complex亚基基因的组分鉴定及其在染色体上的定位第58-59页
        4.1.2 SlMED基因的表达模式分析第59-61页
        4.1.3 SlMED基因沉默后导致了番茄植株生长缺陷第61-63页
        4.1.4 SlMED基因沉默后改变了番茄对B.cinerea的抗性第63-68页
    4.2 总结讨论第68-71页
第五章 维生素B6合成途径在番茄对B.cinerea抗性反应中的功能研究第71-83页
    摘要第71-72页
    5.1 结果第72-80页
        5.1.1 维生素B6合成途径基因的克隆鉴定第72-73页
        5.1.2 SlPDX1.2和SlPDX1.3基因沉默植株对B.cinerea的抗性下降第73-76页
        5.1.3 B.cinerea侵染后维生素B6合成基因的表达分析第76页
        5.1.4 SlPDX1.2和SlPDX1.3沉默后降低了B.cinerea诱导的维生素B6的合成第76-77页
        5.1.5 SlPDX1.2和SlPDX1.3基因沉默植株在B.cinerea侵染后活性氧增加第77-79页
        5.1.6 SlPDX1.2和SlPDX1.3基因沉默后减弱了植株中超氧阴离子的清除能力第79页
        5.1.7 SlPDX1.2和SlPDX1.3沉默植株在B.cinerea侵染后其它抗氧化物质变化第79-80页
    5.2 讨论第80-83页
第六章 全文小结第83-86页
    6.1 主要结论第83页
    6.2 创新点第83-84页
    6.3 展望第84-86页
参考文献第86-112页
附表第112-118页
    附表1 第三章实验所用引物列表第112-114页
    附表2 第四章实验所用引物列表第114-117页
    附表3 第五章实验所用引物列表第117-118页

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