| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 丹参的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.1.1 植物学特性研究 | 第10页 |
| 1.1.2 化学成分及其药理作用研究 | 第10-11页 |
| 1.1.3 丹参的指纹图谱研究和分子生物学研究 | 第11页 |
| 1.1.4 丹参的资源现状及其开发利用研究 | 第11页 |
| 1.2 植物非生物胁迫研究进展 | 第11-17页 |
| 1.2.1 非生物胁迫对植物的影响研究 | 第12-13页 |
| 1.2.2 植物对非生物胁迫的响应研究 | 第13-15页 |
| 1.2.3 非生物胁迫之间的相互影响研究 | 第15-17页 |
| 1.3 普遍胁迫蛋白研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3.1 普遍胁迫蛋白的发现与UspA结构域研究 | 第17-18页 |
| 1.3.2 普遍胁迫蛋白的功能研究 | 第18-19页 |
| 1.3.3 植物中的普遍胁迫蛋白的研究 | 第19页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第19-22页 |
| 第2章 基于丹参全基因组数据对SmUSP基因的分析及克隆 | 第22-34页 |
| 2.1 实验试剂与器材 | 第22-23页 |
| 2.1.1 植物材料与耗材 | 第22页 |
| 2.1.2 试剂与药品 | 第22-23页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第23页 |
| 2.1.4 实验数据库 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-26页 |
| 2.2.1 SmUSP基因检索与确认 | 第23页 |
| 2.2.2 生物信息学分析和进化树分析 | 第23-24页 |
| 2.2.3 总RNA提取及cDNA合成 | 第24页 |
| 2.2.4 引物设计、PCR反应 | 第24-25页 |
| 2.2.5 凝胶回收和T载体连接 | 第25-26页 |
| 2.3 实验结果分析 | 第26-32页 |
| 2.3.1 基因检索和确认 | 第26-27页 |
| 2.3.2 进化树、保守基序及多序列比对 | 第27-30页 |
| 2.3.3 外显子、内含子结构 | 第30-31页 |
| 2.3.4 基因克隆 | 第31-32页 |
| 2.4 讨论 | 第32-34页 |
| 第3章 丹参普遍胁迫蛋白基因的表达模式分析 | 第34-42页 |
| 3.1 实验试剂与器材 | 第34页 |
| 3.1.1 植物材料与耗材 | 第34页 |
| 3.1.2 试剂与药品 | 第34页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第34页 |
| 3.2 实验方法 | 第34-36页 |
| 3.2.1 启动子序列分析 | 第34-35页 |
| 3.2.2 丹参胁迫处理 | 第35页 |
| 3.2.3 总RNA提取及cDNA合成 | 第35页 |
| 3.2.4 定量引物设计 | 第35页 |
| 3.2.5 实时荧光定量PCR | 第35-36页 |
| 3.3 实验结果分析 | 第36-39页 |
| 3.3.1 普遍胁迫蛋白基因在丹参不同组织部位中的表达 | 第36-37页 |
| 3.3.2 启动子分析 | 第37页 |
| 3.3.3 普遍胁迫蛋白基因在胁迫条件下的表达 | 第37-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-42页 |
| 第4章 丹参普遍胁迫蛋白的原核表达分析和功能验证 | 第42-56页 |
| 4.1 实验试剂与器材 | 第42-44页 |
| 4.1.1 实验材料与耗材 | 第42-43页 |
| 4.1.2 实验试剂与药品 | 第43页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第43-44页 |
| 4.1.4 溶液配制 | 第44页 |
| 4.2 实验方法 | 第44-49页 |
| 4.2.1 基因克隆 | 第44-45页 |
| 4.2.2 原核表达载体的构建 | 第45-47页 |
| 4.2.3 蛋白表达结果检测 | 第47-48页 |
| 4.2.4 转基因大肠杆菌的抗性验证 | 第48-49页 |
| 4.3 实验结果分析 | 第49-54页 |
| 4.3.1 原核表达载体构建 | 第49-50页 |
| 4.3.2 考马斯亮蓝检测蛋白诱导 | 第50页 |
| 4.3.3 Western blot检测蛋白表达 | 第50-51页 |
| 4.3.4 固体培养基抗性验证 | 第51-53页 |
| 4.3.5 液体培养基抗性验证 | 第53-54页 |
| 4.4 讨论 | 第54-56页 |
| 第5章 结论与展望 | 第56-58页 |
| 5.1 结论 | 第56-57页 |
| 5.2 展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 附录 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第74页 |
