| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 符号说明 | 第9-11页 |
| 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 马立克氏病病毒病原学特征 | 第11-12页 |
| 1.1 马立克氏病病毒的形态结构和理化性质 | 第11页 |
| 1.2 马立克病毒的培养特性 | 第11-12页 |
| 2 马立克病毒的分型 | 第12页 |
| 3 马立克病毒的基因组结构、蛋白及相应功能 | 第12-15页 |
| 3.1 马立克病毒的基因组结构特征 | 第12-13页 |
| 3.2 马立克病毒的蛋白及其作用 | 第13-15页 |
| 3.2.1 马立克病毒的直接致瘤基因 | 第13-14页 |
| 3.2.2 马立克病毒的间接致瘤基因 | 第14-15页 |
| 3.2.3 马立克病毒的囊膜糖蛋白基因 | 第15页 |
| 4 马立克病毒的致病机理 | 第15-17页 |
| 4.1 早期溶细胞感染 | 第16页 |
| 4.2 潜伏期感染 | 第16页 |
| 4.3 二次溶细胞感染 | 第16-17页 |
| 4.4 增殖转化阶段 | 第17页 |
| 5 马立克病的诊断技术 | 第17-18页 |
| 5.1 马立克病的临床诊断 | 第17页 |
| 5.2 马立克病血清学诊断 | 第17-18页 |
| 5.2.1 琼脂扩散沉淀反应技术(AGP) | 第17-18页 |
| 5.2.2 免疫荧光技术(IFA) | 第18页 |
| 5.3 马立克病毒病原学诊断 | 第18页 |
| 5.3.1 马立克病毒的分离 | 第18页 |
| 5.3.2 特异性单抗及间接免疫荧光鉴定 | 第18页 |
| 5.3.3 核酸技术 | 第18页 |
| 5.3.4 1型MDV特异性单克隆抗体及免疫组织化学 | 第18页 |
| 6 马立克氏病的流行病学 | 第18-20页 |
| 6.1 马立克氏病的流行特征 | 第18-19页 |
| 6.2 马立克氏病的毒力进化 | 第19-20页 |
| 7 研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 研究内容一 马立克氏病病毒AH1410的致病性研究 | 第21-38页 |
| 1 实验材料 | 第21-22页 |
| 1.1 生物材料 | 第21页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第21页 |
| 1.3 实验动物 | 第21页 |
| 1.4 主要实验仪器 | 第21-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-28页 |
| 2.1 AH1410病毒的扩增和纯化 | 第22-23页 |
| 2.1.1 鸡胚成纤维细胞(CEF)的制备 | 第22页 |
| 2.1.2 AH1410扩增、纯化和PFU测定 | 第22-23页 |
| 2.1.3 间接免疫荧光鉴定(IFA) | 第23页 |
| 2.2 AH1410野毒株的致病性研究 | 第23-28页 |
| 2.2.1 动物及分组 | 第23页 |
| 2.2.2 病理组织学观察 | 第23-24页 |
| 2.2.3 羽髓和PBL总DNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.4 标准毒株RB1B和正常CEF DNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.5 MDV1型特异的FQ-PCR引物/探针设计 | 第24-25页 |
| 2.2.6 MDV阳性标准品的制备 | 第25-27页 |
| 2.2.7 荧光定量PCR检测 | 第27-28页 |
| 2.3 数据统计分析 | 第28页 |
| 2.3.1 体重变化及免疫组织器官体重百分比分析 | 第28页 |
| 2.3.2 肿瘤发生和死亡率统计分析 | 第28页 |
| 2.3.3 羽髓、外周血病毒载量统计分析 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-37页 |
| 3.1 AH1410病毒的扩增和纯化 | 第28-29页 |
| 3.1.1 AH1410病毒感染CEF细胞 | 第28页 |
| 3.1.2 纯化病毒的荧光鉴定 | 第28-29页 |
| 3.2 AH1410野毒株的致病性研究 | 第29-37页 |
| 3.2.1 人工感染病死鸡的剖检病变 | 第29-30页 |
| 3.2.2 MDV肿瘤分布统计 | 第30-31页 |
| 3.2.3 体重变化及免疫组织器官体重百分比 | 第31-32页 |
| 3.2.4 发病率和死亡率 | 第32-33页 |
| 3.2.5 组织学观察 | 第33-34页 |
| 3.2.6 羽髓和外周血淋巴细胞中MDV病毒载量的动态分析 | 第34-37页 |
| 4 讨论 | 第37-38页 |
| 研究内容二 马立克病毒AH1410的大片段基因测序分析 | 第38-59页 |
| 1 实验材料 | 第38页 |
| 1.1 病毒株和细胞 | 第38页 |
| 1.2 主要试剂和生物材料 | 第38页 |
| 1.3 主要仪器 | 第38页 |
| 2 方法 | 第38-44页 |
| 2.1 AH1410病毒的扩增和纯化 | 第38页 |
| 2.2 AH1410 DNA的提取: | 第38页 |
| 2.3 PCR引物设计 | 第38-42页 |
| 2.4 PCR分段扩增基因片段 | 第42页 |
| 2.5 目的片段的克隆 | 第42页 |
| 2.6 阳性质粒的测序 | 第42-43页 |
| 2.7 病毒的基因测序结果分析 | 第43-44页 |
| 2.7.1 序列的拼接 | 第43页 |
| 2.7.2 序列的分析 | 第43-44页 |
| 3 结果 | 第44-57页 |
| 3.1 AH1410毒株的PCR扩增和克隆 | 第44-45页 |
| 3.1.1 UL-IRL-IRS-US的PCR整体扩增结果 | 第44页 |
| 3.1.2 UL片段部分基因片段的克隆结果 | 第44-45页 |
| 3.2 AH1410测序分析 | 第45-57页 |
| 3.2.1 AH1410分离株基因组测序结果拼接与修订 | 第45-46页 |
| 3.2.2 遗传进化分析 | 第46-49页 |
| 3.2.3 AH1410分离株致瘤基因、部分重要ORF分析 | 第49-56页 |
| 3.2.4 AH1410分离毒株SNP分析 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-59页 |
| 全文总结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
