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水稻磷酸盐转运体OsPht1;3和OsPht1;5的功能研究

致谢第10-11页
缩略语表第11-12页
摘要第12-13页
Abstract第13页
第一章 文献综述第14-19页
    引言第14页
    1 水稻中的PT家族分类第14-15页
    2 PHT1家族介绍第15-17页
    3 PHT2家族介绍第17页
    4 PHT3和PHT4家族介绍第17-19页
第二章 OsPht1;3和OsPht1;5超表达载体构建及转基因第19-24页
    1 材料第19页
        1.1 菌种第19页
        1.2 质粒第19页
        1.3 工具酶第19页
        1.4 转基因材料第19页
        1.5 实验仪器第19页
        1.6 分析软件第19页
    2 方法第19-23页
        2.1 OsPht1;3和OsPht1;5超表达载体构建第19-20页
        2.2 农杆菌介导的水稻转化第20-23页
            2.2.1 水稻成熟胚愈伤组织的准备第20-21页
            2.2.2 共培养和抗性愈伤组织的选择第21-22页
                2.2.2.1 农杆菌培养第21页
                2.2.2.2 感菌与共培养第21页
                2.2.2.3 选择培养第21-22页
            2.2.3 抗性愈伤组织的诱导分化和生根第22页
            2.2.4 转基因苗的锻炼和移栽第22页
            2.2.5 水稻营养液的配制第22-23页
    3 载体构建结果分析第23-24页
第三章 OsPht1;3和OsPht1;5超表达转基因材料后代分析第24-34页
    1 材料第24页
    2 方法第24-31页
        2.1 抗性基因检测方法第24-26页
            2.1.1 配制TPS提取液第24-25页
            2.1.2 水稻基因组DNA的微量DNA提取(TPS方法)第25页
            2.1.3 PCR鉴定第25-26页
        2.2 转基因水稻的RT-PCR的检测第26-28页
            2.2.1 植物总RNA的提取第26-27页
            2.2.2 逆转录及半定量RT-PCR第27-28页
        2.3 转基因水稻的SOUTHERN BLOT检测第28-31页
            2.3.1 植物基因组DNA的大量提取第28-30页
                2.3.1.1 基因组DNA提取液的配置第28-29页
                2.3.1.2 植物基因组DNA提取步骤第29-30页
            2.3.2 采用Hind Ⅲ对转基因水稻DNA样品进行以下操作第30-31页
    3 结果分析第31-34页
        3.1 潮霉素PCR鉴定结果第31-32页
        3.2 半定量RT-PCR鉴定结果第32页
        3.3 SOUTHERN BLOT鉴定结果第32-34页
第四章 OsPht1;3和OsPht1;5超表达转基因株系表型分析第34-42页
    1 材料第34页
    2 方法第34-36页
        2.1 有效磷含量的测定第34-36页
            2.1.1 试剂配制第34-35页
            2.1.2 操作步骤第35页
            2.1.3 磷标准曲线的制作第35-36页
        2.2 植物微波消解及ICP-OES测定元素方法第36页
    3 结果与分析第36-42页
        3.1 T_1代OsPht1;3和OsPht1;5超表达株系水培表型观察第36-38页
        3.2 T_1代OsPht1;3和OsPht1;5超表达株系有效磷含量的测定结果第38-39页
        3.3 OsPht1;3和OsPht1;5超表达株系全磷和其他元素的ICP测定结果第39-42页
结论第42-44页
参考文献第44-49页

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