| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 乙烯的生理功能、生物合成和抗逆境胁迫调节 | 第10-11页 |
| 1.1.1 乙烯的生理功能 | 第10页 |
| 1.1.2 乙烯的生物合成 | 第10-11页 |
| 1.1.3 乙烯的抗逆境胁迫调节 | 第11页 |
| 1.2 ACS 基因的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.2.1 ACS 基因的克隆 | 第11页 |
| 1.2.2 ACS 基因的表达调控 | 第11-12页 |
| 1.2.3 ACC 合成酶的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3 实时定量 PCR 技术及研究进展 | 第13-15页 |
| 1.3.1 实时定量 PCR 技术原理 | 第13-14页 |
| 1.3.2 实时定量 PCR 技术方法 | 第14-15页 |
| 1.3.3 实时定量 PCR 类型 | 第15页 |
| 1.3.4 实时定量 PCR 的应用 | 第15页 |
| 1.4 农杆菌介导的植物遗传转化 | 第15-17页 |
| 1.4.1 农杆菌 | 第15-16页 |
| 1.4.2 农杆菌介导的遗传转化过程和方法 | 第16-17页 |
| 1.4.3 拟南芥浸花法遗传转化 | 第17页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 RNA 提取、ACS 基因克隆及序列分析 | 第18-30页 |
| 2.1 材料和仪器 | 第18页 |
| 2.2 方法 | 第18-23页 |
| 2.2.1 总 RNA 提取 | 第18-19页 |
| 2.2.2 cDNA 合成 | 第19-20页 |
| 2.2.3 葡萄 ACS 基因序列获得 | 第20页 |
| 2.2.4 基因克隆和序列分析 | 第20-23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-28页 |
| 2.3.1 总 RNA 的凝胶电泳检测 | 第23页 |
| 2.3.2 获得的序列 | 第23页 |
| 2.3.3 VvACS 基因的克隆结果 | 第23-24页 |
| 2.3.4 VvACS 基因的生物信息学分析 | 第24-28页 |
| 2.4 讨论 | 第28-30页 |
| 3 不同非生物胁迫处理后 VvACS5 的表达 | 第30-34页 |
| 3.1 材料处理 | 第30页 |
| 3.2 方法 | 第30-31页 |
| 3.2.1 RNA 的提取、纯化及 cDNA 的合成 | 第30页 |
| 3.2.2 引物设计 | 第30页 |
| 3.2.3 实时定量 PCR 检测 | 第30-31页 |
| 3.3 实验结果 | 第31-33页 |
| 3.3.1 葡萄总 RNA 电泳检测图 | 第31页 |
| 3.3.2 实时定量 PCR 结果 | 第31-33页 |
| 3.4 讨论 | 第33-34页 |
| 4 葡萄 ACS5 基因转化拟南芥的研究 | 第34-42页 |
| 4.1 材料 | 第34页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第34页 |
| 4.1.2 菌株与载体 | 第34页 |
| 4.2 方法 | 第34-37页 |
| 4.2.1 植物表达双元载体的构建 | 第34-35页 |
| 4.2.2 农杆菌感受态的制备、转化和检测 | 第35-36页 |
| 4.2.3 拟南芥的转化 | 第36-37页 |
| 4.2.4 阳性植株的筛选和鉴定 | 第37页 |
| 4.3 结果与分析 | 第37-40页 |
| 4.3.1 植物表达载体的构建 | 第37-38页 |
| 4.3.2 农杆菌的转化 | 第38页 |
| 4.3.3 转基因植株的鉴定 | 第38-40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 附录A 主要仪器和感受态制备液 | 第48-49页 |
| 附录B 2 种方法提取葡萄各组织总 RNA 的紫外吸收和得率 | 第49页 |
| 附录C VvACS 测序结果 | 第49-52页 |
| 附录D 氨基酸序列比对的保守区 | 第52-53页 |
| 附录E 培养基配方 | 第53-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |