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LIPUS联合iPSCs-NCSCs修复损伤周围神经的力学生物学机制

中文摘要第3-6页
英文摘要第6-8页
英汉缩略词对照表第12-16页
1 绪论第16-26页
    1.1 问题的提出第16页
    1.2 国内外研究现状第16-23页
        1.2.1 LIPUS的物理作用机制第16-17页
        1.2.2 LIPUS对干细胞生物学行为的影响第17-21页
        1.2.3 LIPUS促进干细胞分化的信号通路第21-22页
        1.2.4 LIPUS对细胞因子分泌的影响第22-23页
    1.3 本文研究的目的、意义及主要内容第23-26页
        1.3.1 本文研究目的及意义第23页
        1.3.2 本文研究的主要内容第23-24页
        1.3.3 本文研究的主要创新点第24-25页
        1.3.4 技术路线第25-26页
2 基因表达谱分析LIPUS对IPSCS-NCSCS基因表达的影响第26-54页
    2.1 引言第26页
    2.2 实验材料与试剂第26-29页
        2.2.1 实验细胞第26页
        2.2.2 主要实验仪器及耗材第26-28页
        2.2.3 主要实验试剂第28页
        2.2.4 主要试剂的配制第28-29页
    2.3 实验方法第29-33页
        2.3.1 细胞培养第29-30页
        2.3.2 体外LIPUS处理第30页
        2.3.3 文库构建和Illumina测序第30-31页
        2.3.4 RNA-seq数据分析第31-32页
        2.3.5 实时定量PCR分析第32-33页
        2.3.6 数据分析第33页
    2.4 实验结果第33-49页
        2.4.1 iPSCs-NCSCs的培养和外形特征第33-34页
        2.4.2 RNA提取及其质量鉴定第34-35页
        2.4.3 原始测序数据质控第35页
        2.4.4 测序数据质量剪切、统计和参考基因组比较第35-38页
        2.4.5 RNA-seq整体质量评估第38-40页
        2.4.6 表达差异分析第40-49页
    2.5 分析与讨论第49-51页
    2.6 本章小结第51-54页
3 LIPUS促进IPSCS-NCSCS增殖和分化的力学信号转导通路第54-74页
    3.1 引言第54-55页
    3.2 实验材料与试剂第55-57页
        3.2.1 实验细胞第55页
        3.2.2 主要实验仪器及耗材第55页
        3.2.3 主要实验试剂第55-56页
        3.2.4 主要试剂的配制第56-57页
    3.3 实验方法第57-61页
        3.3.1 MTS检测第57页
        3.3.2 定量PCR检测第57-59页
        3.3.3 免疫荧光检测第59页
        3.3.4 Western blot检测第59-61页
        3.3.5 数据分析第61页
    3.4 实验结果第61-70页
        3.4.1 MTS检测LIPUS、FAK和ERK1/2 抑制剂对iPSCs-NCSCs增殖的影响第61页
        3.4.2 LIPUS、FAK和ERK1/2 抑制剂对iPSCs-NCSCs分化的影响第61-63页
        3.4.3 LIPUS、FAK抑制剂和ERK1/2 抑制剂对iPSCs-NCSCs细胞骨架的影响第63-65页
        3.4.4 LIPUS、FAK抑制剂和ERK1/2 抑制剂对FAK-ERK1/2 力学转导通路的影响第65-70页
    3.5 分析与讨论第70-72页
    3.6 本章小结第72-74页
4 GDF5对LIPUS联合IPSCS-NCSCS修复周围神经损伤的影响第74-96页
    4.1 引言第74-75页
    4.2 实验材料与试剂第75-76页
        4.2.1 实验细胞和实验动物第75页
        4.2.2 主要实验仪器及耗材第75页
        4.2.3 主要实验试剂第75-76页
        4.2.4 主要试剂的配制第76页
    4.3 实验方法第76-81页
        4.3.1 MTS检测第76-77页
        4.3.2 定量PCR检测第77页
        4.3.3 脱细胞坐骨神经制备第77页
        4.3.4 石蜡切片第77-78页
        4.3.5 脱细胞坐骨神经表征第78页
        4.3.6 再细胞化-脱细胞坐骨神经导管制备第78-79页
        4.3.7 动物实验设计与分组第79页
        4.3.8 大鼠坐骨神经损伤模型的建立第79页
        4.3.9 超声刺激第79页
        4.3.10 大体观察第79页
        4.3.11 坐骨神经损伤恢复评价第79-81页
        4.3.12 数据分析第81页
    4.4 实验结果第81-91页
        4.4.1 定量PCR检测GDF5对iPSCs-NCSCs基因表达的影响第81-82页
        4.4.2 MTS检测PFTBA对iPSCs-NCSCs细胞活性的影响第82-83页
        4.4.3 脱细胞坐骨神经表征第83-85页
        4.4.4 损伤模型的观察第85-86页
        4.4.5 坐骨神经功能指数检测第86-87页
        4.4.6 神经传导速度检测第87-88页
        4.4.7 免疫荧光染色结果第88-89页
        4.4.8 免疫组化染色结果第89-90页
        4.4.9 HE染色结果第90-91页
        4.4.10 Masson染色结果第91页
    4.5 分析与讨论第91-93页
    4.6 本章小结第93-96页
5 结论与展望第96-98页
    5.1 主要结论第96页
    5.2 后续研究工作展望第96-98页
致谢第98-100页
参考文献第100-110页
附录第110页
    A. 作者在攻读学位期间发表的论文目录第110页
    B. 作者在攻读学位期间参加的科研项目目录第110页

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