摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第15-42页 |
1.1 真菌毒素 | 第15-21页 |
1.1.1 真菌毒素的历史 | 第15-18页 |
1.1.2 常见的真菌毒素 | 第18-21页 |
1.2 食物和饲料中的ZEA | 第21-23页 |
1.2.1 欧洲国家ZEA污染情况 | 第21-22页 |
1.2.2 非洲国家ZEA污染情况 | 第22页 |
1.2.3 亚洲国家ZEA污染情况 | 第22-23页 |
1.2.4 北美洲国家ZEA污染情况 | 第23页 |
1.2.5 南美洲国家ZEA污染情况 | 第23页 |
1.2.6 大洋洲ZEA污染情况 | 第23页 |
1.3 体内ZEA的吸收、分布、代谢和排泄 | 第23-25页 |
1.4 ZEA的毒性 | 第25-27页 |
1.5 ZEA限量标准 | 第27-28页 |
1.6 策略和降解方法 | 第28-31页 |
1.7 ZEA的提取和检测方法 | 第31-36页 |
1.7.1 ZEA的提取 | 第31-34页 |
1.7.2 ZEA检测方法 | 第34-36页 |
1.8 ABC转运蛋白和过氧化物酶 | 第36-39页 |
1.9 研究目的与意义 | 第39-40页 |
1.10 技术路线 | 第40-42页 |
1.10.1 试验一CK1菌降解饲料中ZEA的研究 | 第40页 |
1.10.2 试验二CK1菌降解的ZEA污染饲料对仔猪的影响 | 第40-41页 |
1.10.3 试验三CK1菌中prx31基因的克隆、表达及功能研究 | 第41-42页 |
试验部分 | 第42-99页 |
第二章 CK1菌降解饲料中ZEA的研究 | 第42-54页 |
2.1 材料 | 第43-44页 |
2.1.1 毒素与菌株 | 第43页 |
2.1.2 主要试剂与耗材 | 第43页 |
2.1.3 主要仪器与设备 | 第43页 |
2.1.4 培养基及主要试剂的配制 | 第43-44页 |
2.2 方法 | 第44-48页 |
2.2.1 菌株的复苏和鉴定 | 第44页 |
2.2.2 菌株CK1毒性检测 | 第44-46页 |
2.2.3 玉米赤霉烯酮污染日粮的制备 | 第46页 |
2.2.4 地衣芽胞杆菌CK1发酵种子液的制备 | 第46页 |
2.2.5 地衣芽胞杆菌CK1降解饲料中玉米赤霉烯酮 | 第46页 |
2.2.6 饲料中玉米赤霉烯酮的提取和纯化 | 第46-47页 |
2.2.7 玉米赤霉烯酮标准曲线的绘制 | 第47页 |
2.2.8 高效液相色谱检测条件 | 第47页 |
2.2.9 玉米赤霉烯酮浓度的计算 | 第47-48页 |
2.3 结果 | 第48-52页 |
2.3.1 菌株CK1的形态观察和革兰氏染色鉴定 | 第48-49页 |
2.3.2 菌株CK116SrRNA分子生物学鉴定 | 第49-50页 |
2.3.3 菌株CK1溶血环的检测 | 第50页 |
2.3.4 菌株CK1溶血素基因检测结果 | 第50-51页 |
2.3.5 标准曲线和回归方程 | 第51页 |
2.3.6 玉米赤霉烯酮在不同处理饲料中的含量 | 第51-52页 |
2.4 讨论 | 第52-53页 |
2.5 小结 | 第53-54页 |
第三章 CK1菌降解的ZEA污染饲料对仔猪的影响 | 第54-75页 |
3.1 材料 | 第55-56页 |
3.1.1 毒素与菌株 | 第55页 |
3.1.2 主要试剂和耗材 | 第55页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第55页 |
3.1.4 主要试剂配制 | 第55页 |
3.1.5 引物合成及序列 | 第55-56页 |
3.2 方法 | 第56-62页 |
3.2.1 试验动物与管理 | 第56页 |
3.2.2 试验日粮与试验设计 | 第56-58页 |
3.2.3 生产性能的测定 | 第58页 |
3.2.4 仔猪阴户的观察、测定和计算 | 第58页 |
3.2.5 屠宰和样品采集 | 第58-59页 |
3.2.6 血清性激素水平的测定 | 第59页 |
3.2.7 组织病理学检测 | 第59页 |
3.2.8 阴道、子宫和卵巢中相关基因表达水平的测定 | 第59-61页 |
3.2.9 雌激素受体β蛋白表达量的检测 | 第61-62页 |
3.2.10 数据统计分析 | 第62页 |
3.3 结果 | 第62-69页 |
3.3.1 生产性能 | 第62页 |
3.3.2 阴户面积 | 第62-64页 |
3.3.3 器官相对重量 | 第64页 |
3.3.4 血清性激素水平 | 第64-65页 |
3.3.5 组织病理学检测结果分析 | 第65-66页 |
3.3.6 基因表达结果 | 第66-69页 |
3.3.7 雌激素受体β蛋白表达水平 | 第69页 |
3.4 讨论 | 第69-74页 |
3.5 小结 | 第74-75页 |
第四章 CK1菌中prx31基因的克隆、表达及功能研究 | 第75-98页 |
4.1 材料 | 第75-77页 |
4.1.1 毒素与菌株 | 第75-76页 |
4.1.2 主要试剂与耗材 | 第76页 |
4.1.3 主要仪器与设备 | 第76页 |
4.1.4 培养基及主要试剂配制 | 第76页 |
4.1.5 质粒、引物合成与序列 | 第76-77页 |
4.2 方法 | 第77-88页 |
4.2.1 引物设计思路 | 第77-78页 |
4.2.2 构建含有目的基因的克隆载体 | 第78-80页 |
4.2.3 目的基因的生物信息学分析 | 第80页 |
4.2.4 重组表达质粒的构建 | 第80-83页 |
4.2.5 目的蛋白的表达与纯化 | 第83-85页 |
4.2.6 高效液相色谱检测条件 | 第85页 |
4.2.7 ZEA降解率的测定 | 第85页 |
4.2.8 重组蛋白在不同条件下对ZEA降解效果的研究 | 第85-87页 |
4.2.9 ZEA降解产物对MCF-7细胞增殖率的影响 | 第87页 |
4.2.10 统计分析 | 第87-88页 |
4.3 结果 | 第88-95页 |
4.3.1 过氧化物酶基因的扩增与克隆 | 第88页 |
4.3.2 过氧化物酶的生物信息学分析 | 第88-90页 |
4.3.3 表达载体的构建和验证 | 第90-91页 |
4.3.4 过氧化物酶的表达和纯化 | 第91-92页 |
4.3.5 重组过氧化物酶降解ZEA的效果 | 第92-93页 |
4.3.6 重组过氧化物酶在不同条件下对ZEA的降解 | 第93-95页 |
4.3.7 ZEA降解产物对MCF-7细胞增殖率的测定 | 第95页 |
4.4 讨论 | 第95-97页 |
4.5 小结 | 第97-98页 |
第五章 结论与创新点 | 第98-99页 |
5.1 研究结论 | 第98页 |
5.2 创新点 | 第98页 |
5.3 下一步研究课题 | 第98-99页 |
参考文献 | 第99-116页 |
附录 | 第116-128页 |
缩略词 | 第128-131页 |
致谢 | 第131-132页 |
作者简介 | 第132页 |