中文摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3页 |
第1章 文献综述 | 第7-15页 |
1.1 无融合生殖概述 | 第7-8页 |
1.1.1 无融合生殖的发展及定义 | 第7页 |
1.1.2 无融合生殖的分类 | 第7-8页 |
1.2 甜菜M14单体附加系的获得及进展 | 第8页 |
1.3 实验相关技术 | 第8-13页 |
1.3.1 RACE技术 | 第8-10页 |
1.3.2 染色体步移 | 第10-11页 |
1.3.3 TAIL-PCR | 第11-13页 |
1.4 生物信息学数据库及相关分析 | 第13-14页 |
1.5 实验目的及意义 | 第14-15页 |
第2章 材料与方法 | 第15-38页 |
2.1 实验材料 | 第15-16页 |
2.1.1 植物材料 | 第15页 |
2.1.2 试剂及试剂盒 | 第15页 |
2.1.3 质粒与菌株 | 第15页 |
2.1.4 引物的设计及合成 | 第15-16页 |
2.1.5 实验所需常用溶液、试剂及培养基的配制 | 第16页 |
2.2 实验方法 | 第16-38页 |
2.2.1 基因组DNA的提取及检测 | 第16-18页 |
2.2.2 利用TAIL-PCR进行杂交种花期特异性表达片段的扩增 | 第18-20页 |
2.2.3 杂交种M14花器官总RNA的提取 | 第20-21页 |
2.2.4 总RNA的检测 | 第21页 |
2.2.5 总RNA的纯化 | 第21-22页 |
2.2.6 杂交种M14花期特异性表达片段3’端的扩增 | 第22-25页 |
2.2.7 杂交种M14花期特异性表达片段5’端的扩增 | 第25-29页 |
2.2.8 以cDNA为模板的全长cDNA的扩增 | 第29-30页 |
2.2.9 以基因组DNA为模板的PCR验证 | 第30-31页 |
2.2.10 目的片段的回收及纯化 | 第31-32页 |
2.2.11 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
2.2.12 目的片段的连接及转化 | 第33-34页 |
2.2.13 阳性克隆的菌液PCR鉴定 | 第34-35页 |
2.2.14 甜菜M14特异基因的全长cDNA序列的生物信息学分析 | 第35-38页 |
第3章 结果 | 第38-89页 |
3.1 甜菜杂交种基因组DNA的提取 | 第38页 |
3.2 TAIL-PCR方法对甜菜特异性表达片段进行扩增 | 第38页 |
3.3 甜菜杂交种花蕾总RNA的提取 | 第38-39页 |
3.4 cDNA第一链的合成 | 第39-40页 |
3.5 杂交种花期特异性表达3’端的片段扩增 | 第40页 |
3.6 杂交种花期特异性表达5’端的片段扩增 | 第40-41页 |
3.7 杂交种花期特异性表达全长cDNA的获得 | 第41-42页 |
3.8 杂交种特异性表达基因的PCR验证 | 第42页 |
3.9 特异性表达基因的全长cDNA序列的生物信息学分析 | 第42-89页 |
3.9.1 基因TF75-1F的生物信息学分析 | 第42-59页 |
3.9.2 杂交种M14特异性表达基因TAA2-1F的生物信息学分析 | 第59-74页 |
3.9.3 杂交种M14特异性表达基因TDA2-2F的生物信息学分析 | 第74-89页 |
第4章 讨论 | 第89-91页 |
4.1 基因TF75-1F | 第89页 |
4.2 基因TAA2-1F和TDA2-2F | 第89-91页 |
第5章 结论 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-100页 |
附录1 | 第100-102页 |
附录2 | 第102-104页 |
致谢 | 第104-105页 |