| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 前言 | 第9-18页 |
| 1.1 植物CLC 通道研究概况 | 第9-11页 |
| 1.1.1 烟草CLC | 第10页 |
| 1.1.2 拟南芥CLC | 第10页 |
| 1.1.3 水稻CLC | 第10-11页 |
| 1.1.3 大豆CLC | 第11页 |
| 1.2 CLC 通道结构和特性 | 第11-12页 |
| 1.3 RACE 技术原理与应用 | 第12-16页 |
| 1.3.1 RACE 技术原理 | 第13-14页 |
| 1.3.2 一些新型RACE 技术 | 第14-16页 |
| 1.3.3 RACE 技术在植物研究中的应用 | 第16页 |
| 1.4 本研究背景和意义 | 第16-18页 |
| 第二章 蚕豆CLC 基因片段的克隆 | 第18-36页 |
| 2.1 材料与方法 | 第18-28页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.2 简并引物的设计 | 第19-20页 |
| 2.1.3 蚕豆叶片总RNA 的提取 | 第20-22页 |
| 2.1.4 以蚕豆叶片总RNA 为模板进行反转录反应 | 第22-23页 |
| 2.1.5 梯度PCR 扩增 | 第23-24页 |
| 2.1.6 切胶回收PCR 产物中的目的片段 | 第24-25页 |
| 2.1.7 目的DNA 的克隆（TA 克隆） | 第25-28页 |
| 2.1.8 测定目的DNA 片段的序列 | 第28页 |
| 2.2 实验结果与分析 | 第28-36页 |
| 2.2.1 设计合成的引物序列 | 第28-29页 |
| 2.2.2 提取的RNA 质量检测 | 第29-30页 |
| 2.2.3 梯度RT-PCR 产物电泳 | 第30页 |
| 2.2.4 胶回收目的片段电泳 | 第30-31页 |
| 2.2.5 TA 克隆转化结果 | 第31-32页 |
| 2.2.6 菌落PCR 扩增 | 第32-33页 |
| 2.2.7 质粒PCR 扩增 | 第33-34页 |
| 2.2.8 cDNA 片段测序结果 | 第34页 |
| 2.2.9 cDNA 片段的序列分析 | 第34-36页 |
| 第三章 蚕豆CLC 基因3’端序列的克隆 | 第36-53页 |
| 3.1 材料与方法 | 第36-44页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 3.1.2 3’RACE 引物设计 | 第37页 |
| 3.1.3 反转录反应 | 第37-38页 |
| 3.1.4 套式PCR 反应 | 第38-39页 |
| 3.1.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第39页 |
| 3.1.6 套式PCR 产物回收 | 第39-40页 |
| 3.1.7 目的DNA 的克隆（TA 克隆） | 第40-43页 |
| 3.1.8 目的DNA 片段测序 | 第43页 |
| 3.1.9 DNA 序列的生物信息学分析 | 第43-44页 |
| 3.2 实验结果与分析 | 第44-53页 |
| 3.2.1 PCR 产物电泳检测 | 第44-45页 |
| 3.2.2 菌落PCR 扩增 | 第45-46页 |
| 3.2.3 质粒PCR 扩增 | 第46页 |
| 3.2.4 测序结果 | 第46-48页 |
| 3.2.5 序列分析结果 | 第48-53页 |
| 第四章 结论与展望 | 第53-54页 |
| 4.1 结论 | 第53页 |
| 4.2 展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 附录 | 第57-61页 |
| 缩略词表 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |