| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 1 前言 | 第7-26页 |
| 1.1 研究问题由来 | 第7页 |
| 1.2 骨骼肌发育过程及其分子基础研究现状 | 第7-14页 |
| 1.2.1 骨骼肌的发育过程 | 第7-10页 |
| 1.2.2 骨骼肌结构特点 | 第10-11页 |
| 1.2.3 骨骼肌发育分子基础研究成果 | 第11-14页 |
| 1.3 MICRORNA研究进展 | 第14-21页 |
| 1.3.1 miRNA的发现及命名 | 第14-15页 |
| 1.3.2 miRNA的分子特征 | 第15-16页 |
| 1.3.3 miRNA的生物发生过程及作用机制 | 第16-18页 |
| 1.3.4 miRNA的表达调控 | 第18-19页 |
| 1.3.5 肌发育相关miRNAs的研究概况 | 第19-21页 |
| 1.4 miR-483研究进展 | 第21-23页 |
| 1.5 miRNA靶基因的预测与验证 | 第23-24页 |
| 1.5.1 miRNA模拟物和抑制物 | 第23页 |
| 1.5.2 miRNA靶基因的预测与验证 | 第23-24页 |
| 1.6 研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 1.7 研究的初步结果 | 第25-26页 |
| 2 材料和方法 | 第26-41页 |
| 2.1 材料 | 第26-28页 |
| 2.1.1 实验样品 | 第26页 |
| 2.1.2 细胞系 | 第26页 |
| 2.1.3 miRNA模拟物和抑制物 | 第26页 |
| 2.1.4 荧光素酶报告基因载体 | 第26-27页 |
| 2.1.5 抗体 | 第27-28页 |
| 2.2 方法 | 第28-41页 |
| 2.2.1 本研究技术路线 | 第28页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第28-29页 |
| 2.2.3 细胞RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第29-30页 |
| 2.2.4 miRNA的表达分析 | 第30-31页 |
| 2.2.5 xCELLigence系统对细胞增殖的实时监测 | 第31-32页 |
| 2.2.6 CCK-8法分析miRNA对C2C12细胞增殖的影响 | 第32页 |
| 2.2.7 免疫荧光观察转染miRNA对C2C12细胞分化的影响 | 第32-33页 |
| 2.2.8 肌肉分化标志(marker)基因的表达检测 | 第33页 |
| 2.2.9 miRNA靶基因的预测 | 第33-34页 |
| 2.2.10 荧光素酶报告基因试验 | 第34-36页 |
| 2.2.11 Western免疫印迹(Western blot) | 第36-38页 |
| 2.2.12 micrON agomiR注射小鼠的后的组织形态学检测 | 第38-41页 |
| 3 结果 | 第41-56页 |
| 3.1 小鼠miR-483-3p的克隆 | 第41页 |
| 3.2 miR-483-3p在小鼠中的组织表达情况 | 第41-42页 |
| 3.3 miR-483-3p在出生后小鼠腿肌中的表达情况 | 第42-43页 |
| 3.4 miR-483-3p在C2C12细胞分化过程中的表达情况 | 第43页 |
| 3.5 miR-483-3p在C2C12细胞增殖和分化中的作用 | 第43-47页 |
| 3.5.1 miR-483-3p mimics在C2C12细胞中的过表达效果 | 第43-44页 |
| 3.5.2 miR-483-3p对C2C12细胞增殖的影响 | 第44-45页 |
| 3.5.3 miR-483-3p对C2C12细胞分化的影响 | 第45-47页 |
| 3.6 miRNAs靶基因预测和验证结果 | 第47-52页 |
| 3.6.1 miRNAs靶基因的预测结果 | 第47页 |
| 3.6.2 荧光素酶报告基因实验结果 | 第47-49页 |
| 3.6.3 SRF在C2C12细胞分化期间的表达变化 | 第49-50页 |
| 3.6.4 过表达miR-483-3p抑制SRF的表达 | 第50-52页 |
| 3.7 miR-483-3p抑制分化状态中C2C12细胞肌管形成 | 第52-53页 |
| 3.8 micrON agomiR 483-3p小鼠肌肉注射后形态学观察 | 第53-56页 |
| 3.8.1 石蜡切片HE染色后显微镜下观察 | 第54-55页 |
| 3.8.2 超薄切片透射电镜下观察 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| 5 结论 | 第59页 |
| 6 有待进一步研究的问题 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 个人简历 | 第69-70页 |
