摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
缩略语表 | 第13-14页 |
1 文献综述 | 第14-31页 |
1.1 自交不亲和性概述 | 第14-16页 |
1.2 芸薹属自交不亲和的分子机理 | 第16-22页 |
1.2.1 自交不亲和识别基因的鉴定 | 第16-18页 |
1.2.2 S单倍型及其显隐性关系 | 第18-19页 |
1.2.3 芸薹属植物自交不亲和反应机制 | 第19-22页 |
1.3 以拟南芥作模式的自交不亲和研究 | 第22-23页 |
1.4 十字花科植物中花粉-柱头的互作研究 | 第23-27页 |
1.5 甘蓝型油菜中自交(不)亲和性的研究和应用 | 第27-30页 |
1.6 研究目的与意义 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-44页 |
2.1 实验材料 | 第31-32页 |
2.1.1 植物材料 | 第31页 |
2.1.2 载体和菌株 | 第31-32页 |
2.2 研究方法 | 第32-42页 |
2.2.1 油菜DNA提取 | 第32页 |
2.2.2 PCR反应及片段的克隆,测序 | 第32-34页 |
2.2.3 油菜各组织总RNA的抽提及检测 | 第34页 |
2.2.4 RT-PCR及Real time-PCR | 第34-35页 |
2.2.5 表达载体构建 | 第35-36页 |
2.2.6 农杆菌介导的油菜遗传转化 | 第36-38页 |
2.2.7 农杆菌介导的拟南芥遗传转化及阳性植株的筛选 | 第38-39页 |
2.2.8 GUS分析 | 第39-40页 |
2.2.9 花药半薄切片的制作 | 第40-41页 |
2.2.10 自交不亲和表型鉴定 | 第41页 |
2.2.11 花粉萌发观察 | 第41-42页 |
2.2.12 S单倍型与S位点基因的命名 | 第42页 |
2.3 数据分析 | 第42页 |
2.3.1 遗传分析 | 第42页 |
2.3.2 生物信息相关分析 | 第42页 |
2.4 转录组测序 | 第42-44页 |
2.4.1 cDNA文库构建和Solexa/Illumina测序 | 第42-43页 |
2.4.2 RNA-seq数据处理 | 第43页 |
2.4.3 DEGs(差异表达基因)的分析与注释 | 第43-44页 |
3 结果 | 第44-84页 |
3.1 自交不亲和系‘S-1300’的遗传特征 | 第44-52页 |
3.1.1 自交不亲和系‘S-1300’与恢复系‘10-9-10-9-8400’中S单倍型的组成 | 第44-46页 |
3.1.2 自交不亲和系‘S-1300’的遗传分析 | 第46-47页 |
3.1.3 BnSP11-1300与BnSRK-1300基因的克隆 | 第47-50页 |
3.1.4 BnSP11-1300与BnSRK-1300基因的表达分析 | 第50-52页 |
3.2 自交不亲和分子标记体系的建立 | 第52-57页 |
3.2.1 分析恢复系‘10-9-8400’中BnSRK-1与BnSP11-1基因的核酸序列 | 第52-53页 |
3.2.2 建立自交不亲和分子标记体系 | 第53-54页 |
3.2.3 调查父本的基因型及其与F_1表型的关系 | 第54-57页 |
3.3 ‘10-9-8400’与‘Westar’自交亲和性的研究 | 第57-71页 |
3.3.1 油菜中Helitron类转座子的发现及进化分析 | 第57-60页 |
3.3.2 BnSP11-1基因启动子分析 | 第60-66页 |
3.3.3 BnSP11-1基因的功能互补 | 第66-71页 |
3.4 基于RNA-seq技术的亲和/不亲和分子机理初探 | 第71-84页 |
3.4.1 差异表达基因的鉴定 | 第71-73页 |
3.4.2 差异表达基因的注释 | 第73-81页 |
3.4.3 RNA-seq数据的验证 | 第81-84页 |
4 讨论 | 第84-97页 |
4.1 ‘S-1300’的自交不亲和性 | 第84-85页 |
4.2 芸薹属S单倍型互作及显隐性关系 | 第85-86页 |
4.3 ‘S-1300’的遗传基础及在SI分子标记体系在育种中的应用 | 第86-88页 |
4.4 Helitrons在甘蓝型油菜的进化中起着关键的作用 | 第88-90页 |
4.5 BnSP11-1基因启动子的顺式元件 | 第90-91页 |
4.6 野生型‘Westar’柱头的授粉特性 | 第91页 |
4.7 亲和/不亲和的花粉-柱头互作具有一些共同的信号传导路径 | 第91-93页 |
4.8 亲和/不亲和授粉中一些可能的信号传导路径 | 第93-95页 |
4.9 总结与展望 | 第95-97页 |
参考文献 | 第97-113页 |
致谢 | 第113-114页 |
附录1 | 第114-122页 |
附录2 | 第122-126页 |
附录3 | 第126-127页 |
附录4 | 第127-131页 |
附录5 | 第131-132页 |