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基于qRT-PCR终点法的FMDV快速中和试验的建立

摘要第5-6页
Abstract第6页
英文缩略表第10-11页
第一章 引言第11-16页
    1.1 口蹄疫第11-12页
        1.1.1 FMDV基因组结构第11页
        1.1.2 FMD的临床症状第11-12页
        1.1.3 FMD的危害第12页
    1.2 FMD疫苗配比检测技术的概述第12-14页
        1.2.1 疫苗配比检测方法第12-13页
        1.2.2 疫苗配比检测方法的研究进展第13-14页
    1.3 荧光定量PCR技术的概述第14-15页
        1.3.1 SYBR Green染料法和探针法qPCR第14-15页
        1.3.2 其他qPCR方法第15页
    1.4 研究目的及意义第15-16页
第二章 建立定量检测FMDV的qRT-PCR方法第16-24页
    2.1 试验材料与方法第16-19页
        2.1.1 3D序列第16页
        2.1.2 使用试剂第16-17页
        2.1.3 使用仪器第17页
        2.1.4 体外转录第17-18页
        2.1.5 qRT-PCR第18页
        2.1.6 qRT-PCR应用分析第18-19页
        2.1.7 特异性检测第19页
    2.2 试验结果第19-22页
        2.2.1 标准品cRNA拷贝浓度第19页
        2.2.2 标准曲线的建立第19-21页
        2.2.3 qRT-PCR敏感性检测第21页
        2.2.4 qRT-PCR特异性检测第21-22页
    2.3 讨论第22-24页
第三章 建立FMDV在IBRS-2 细胞上的复制曲线第24-29页
    3.1 材料与方法第24-26页
        3.1.1 使用试剂第24页
        3.1.2 使用仪器第24页
        3.1.3 病毒与细胞来源第24页
        3.1.4 细胞传代培养第24-25页
        3.1.5 制备96孔细胞板第25页
        3.1.6 FMDV在IBRS-2 细胞中的病毒滴度检测(TCID50)第25页
        3.1.7 病毒接种与裂解产物收集第25-26页
        3.1.8 提纯裂解产物中的RNA第26页
        3.1.9 qRT-PCR检测第26页
    3.2 试验结果第26-28页
        3.2.1 病毒的滴度检测(TCID50)第26-27页
        3.2.2 建立病毒复制曲线第27-28页
    3.3 讨论第28-29页
第四章 建立基于qRT-PCR终点法的VNT方法第29-41页
    4.1 材料与方法第29-33页
        4.1.1 使用试剂第29页
        4.1.2 使用仪器第29页
        4.1.3 细胞培养第29-30页
        4.1.4 病毒传代第30页
        4.1.5 血清来源第30-31页
        4.1.6 VNT第31-32页
        4.1.7 qRT-PCR-VNT第32页
        4.1.8 qRT-PCR-VNT特异性检测第32-33页
    4.2 结果第33-38页
        4.2.1 VNT检测结果第33页
        4.2.2 qRT-PCR-VNT方法的检测结果第33-35页
        4.2.3 qRT-PCR-VNT终点法判断标准的建立第35-37页
        4.2.4 qRT-PCR-VNT在不同血清型间的特异性检测第37-38页
    4.3 讨论第38-41页
第五章 全文结论第41-42页
参考文献第42-47页
致谢第47-48页
作者简介第48页

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