摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-16页 |
1.1 口蹄疫 | 第11-12页 |
1.1.1 FMDV基因组结构 | 第11页 |
1.1.2 FMD的临床症状 | 第11-12页 |
1.1.3 FMD的危害 | 第12页 |
1.2 FMD疫苗配比检测技术的概述 | 第12-14页 |
1.2.1 疫苗配比检测方法 | 第12-13页 |
1.2.2 疫苗配比检测方法的研究进展 | 第13-14页 |
1.3 荧光定量PCR技术的概述 | 第14-15页 |
1.3.1 SYBR Green染料法和探针法qPCR | 第14-15页 |
1.3.2 其他qPCR方法 | 第15页 |
1.4 研究目的及意义 | 第15-16页 |
第二章 建立定量检测FMDV的qRT-PCR方法 | 第16-24页 |
2.1 试验材料与方法 | 第16-19页 |
2.1.1 3D序列 | 第16页 |
2.1.2 使用试剂 | 第16-17页 |
2.1.3 使用仪器 | 第17页 |
2.1.4 体外转录 | 第17-18页 |
2.1.5 qRT-PCR | 第18页 |
2.1.6 qRT-PCR应用分析 | 第18-19页 |
2.1.7 特异性检测 | 第19页 |
2.2 试验结果 | 第19-22页 |
2.2.1 标准品cRNA拷贝浓度 | 第19页 |
2.2.2 标准曲线的建立 | 第19-21页 |
2.2.3 qRT-PCR敏感性检测 | 第21页 |
2.2.4 qRT-PCR特异性检测 | 第21-22页 |
2.3 讨论 | 第22-24页 |
第三章 建立FMDV在IBRS-2 细胞上的复制曲线 | 第24-29页 |
3.1 材料与方法 | 第24-26页 |
3.1.1 使用试剂 | 第24页 |
3.1.2 使用仪器 | 第24页 |
3.1.3 病毒与细胞来源 | 第24页 |
3.1.4 细胞传代培养 | 第24-25页 |
3.1.5 制备96孔细胞板 | 第25页 |
3.1.6 FMDV在IBRS-2 细胞中的病毒滴度检测(TCID50) | 第25页 |
3.1.7 病毒接种与裂解产物收集 | 第25-26页 |
3.1.8 提纯裂解产物中的RNA | 第26页 |
3.1.9 qRT-PCR检测 | 第26页 |
3.2 试验结果 | 第26-28页 |
3.2.1 病毒的滴度检测(TCID50) | 第26-27页 |
3.2.2 建立病毒复制曲线 | 第27-28页 |
3.3 讨论 | 第28-29页 |
第四章 建立基于qRT-PCR终点法的VNT方法 | 第29-41页 |
4.1 材料与方法 | 第29-33页 |
4.1.1 使用试剂 | 第29页 |
4.1.2 使用仪器 | 第29页 |
4.1.3 细胞培养 | 第29-30页 |
4.1.4 病毒传代 | 第30页 |
4.1.5 血清来源 | 第30-31页 |
4.1.6 VNT | 第31-32页 |
4.1.7 qRT-PCR-VNT | 第32页 |
4.1.8 qRT-PCR-VNT特异性检测 | 第32-33页 |
4.2 结果 | 第33-38页 |
4.2.1 VNT检测结果 | 第33页 |
4.2.2 qRT-PCR-VNT方法的检测结果 | 第33-35页 |
4.2.3 qRT-PCR-VNT终点法判断标准的建立 | 第35-37页 |
4.2.4 qRT-PCR-VNT在不同血清型间的特异性检测 | 第37-38页 |
4.3 讨论 | 第38-41页 |
第五章 全文结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
作者简介 | 第48页 |