| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 第一章 引言 | 第12-20页 |
| 1.1 布鲁菌病的概述 | 第12页 |
| 1.1.1 布鲁菌病的流行 | 第12页 |
| 1.1.2 布鲁菌病原学特征 | 第12页 |
| 1.2 布鲁菌致病机制的研究进展 | 第12-19页 |
| 1.2.1 布鲁菌逃避宿主免疫监视 | 第12-13页 |
| 1.2.2 布鲁菌的胞内移行途径 | 第13-15页 |
| 1.2.3 布鲁菌主要的毒力因子简述 | 第15-17页 |
| 1.2.4 布鲁菌的效应分子 | 第17-18页 |
| 1.2.5 胞内菌碳代谢与毒力关系的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 布鲁菌pyk缺失株的构建及其生物学特性分析 | 第20-32页 |
| 2.1 材料与方法 | 第20-25页 |
| 2.1.1 菌种与主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第20页 |
| 2.1.3 主要溶液的配制 | 第20-21页 |
| 2.1.4 引物设计 | 第21页 |
| 2.1.5 自杀质粒和互补质粒的构建 | 第21-22页 |
| 2.1.6 缺失株和互补株的构建 | 第22页 |
| 2.1.7 Western blot实验 | 第22-23页 |
| 2.1.8 细菌RNA的提取及qRT-PCR的分析 | 第23页 |
| 2.1.9 TSB培养基和基础培养基中生长曲线的测定 | 第23页 |
| 2.1.10 耐受性实验 | 第23-24页 |
| 2.1.11 间接免疫荧光实验 | 第24页 |
| 2.1.12 胞内存活实验 | 第24-25页 |
| 2.1.13 对小鼠致病力分析 | 第25页 |
| 2.2 结果 | 第25-30页 |
| 2.2.1 质粒构建结果 | 第25-26页 |
| 2.2.2 缺失株和回复株构建结果 | 第26页 |
| 2.2.3 TSB培养基和基础培养基中生长曲线测定结果 | 第26-27页 |
| 2.2.4 胞内存活能力测定 | 第27-28页 |
| 2.2.5 间接免疫荧光实验结果 | 第28-29页 |
| 2.2.6 耐受性实验结果 | 第29页 |
| 2.2.7 对小鼠致病力分析结果 | 第29-30页 |
| 2.3 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 布鲁菌ppdk缺失株的构建及生物学特性分析 | 第32-39页 |
| 3.1 材料与方法 | 第32-34页 |
| 3.1.1 质粒、菌种及试剂 | 第32页 |
| 3.1.2 引物设计 | 第32页 |
| 3.1.3 自杀质粒构建 | 第32-33页 |
| 3.1.4 缺失株的构建 | 第33页 |
| 3.1.5 细菌RNA的提取及qRT-PCR分析 | 第33页 |
| 3.1.6 生长曲线测定 | 第33页 |
| 3.1.7 耐受性实验 | 第33-34页 |
| 3.1.8 胞内存活试验 | 第34页 |
| 3.1.9 小鼠致病力分析 | 第34页 |
| 3.2 结果 | 第34-37页 |
| 3.2.1 质粒构建 | 第34-35页 |
| 3.2.2 缺失株构建 | 第35页 |
| 3.2.3 生长曲线测定结果 | 第35-36页 |
| 3.2.4 胞内存活试验分析 | 第36页 |
| 3.2.5 耐受性试验结果 | 第36-37页 |
| 3.2.6 缺失株对小鼠的致病力分析 | 第37页 |
| 3.3 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 全文结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简历 | 第51页 |
