| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 红曲霉概述 | 第13-15页 |
| 1.1 红曲霉 | 第13页 |
| 1.2 红曲霉的次级代谢产物 | 第13-14页 |
| 1.3 红曲霉的应用 | 第14-15页 |
| 2 红曲色素 | 第15-21页 |
| 2.1 微生物天然色素 | 第15页 |
| 2.2 红曲色素的种类与性质 | 第15-17页 |
| 2.3 红曲色素的生理活性 | 第17-18页 |
| 2.4 红曲色素的代谢途径 | 第18-19页 |
| 2.5 红曲色素基因研究 | 第19-21页 |
| 3 丝状真菌基因功能的研究 | 第21-23页 |
| 3.1 研究思路 | 第21页 |
| 3.2 基因敲除技术的应用 | 第21-22页 |
| 3.3 丝状真菌的遗传转化方法 | 第22-23页 |
| 4 研究意义和内容 | 第23-25页 |
| 4.1 研究的意义 | 第23页 |
| 4.2 研究的主要内容 | 第23-25页 |
| 第二章 高产色素低产桔霉素红曲霉菌株的筛选与鉴定 | 第25-37页 |
| 1 材料 | 第25-26页 |
| 1.1 实验材料 | 第25页 |
| 1.2 主要试剂与仪器设备 | 第25-26页 |
| 1.3 培养基 | 第26页 |
| 2 实验方法 | 第26-30页 |
| 2.1 红曲霉菌株的分离与纯化 | 第27页 |
| 2.2 红曲色素色价的检测 | 第27页 |
| 2.3 桔霉素含量的检测 | 第27-28页 |
| 2.4 高产色素低产桔霉素红曲霉菌株的鉴定 | 第28-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-36页 |
| 3.1 红曲霉菌株的菌落形态 | 第30-32页 |
| 3.2 红曲色素色价检测结果 | 第32-33页 |
| 3.3 桔霉素含量检测结果 | 第33-34页 |
| 3.4 高产色素低产桔霉素红曲霉菌株的鉴定结果 | 第34-36页 |
| 4 小结与讨论 | 第36-37页 |
| 第三章 红曲霉PigE基因的克隆及敲除载体的构建 | 第37-49页 |
| 1 材料 | 第37-38页 |
| 1.1 实验材料 | 第37-38页 |
| 1.2 主要试剂与仪器设备 | 第38页 |
| 1.3 培养基 | 第38页 |
| 2 实验方法 | 第38-44页 |
| 2.1 红曲霉PigE基因的克隆 | 第38-39页 |
| 2.2 构建PigE基因敲除盒 | 第39-42页 |
| 2.3 构建PigE基因敲除载体 | 第42-44页 |
| 2.4 敲除载体转化农杆菌 | 第44页 |
| 3 实验结果 | 第44-48页 |
| 3.1 PigE基因的PCR扩增结果与序列分析 | 第44-45页 |
| 3.2 PigE基因敲除盒的构建结果 | 第45-46页 |
| 3.3 农杆菌转化菌株的制备 | 第46-48页 |
| 4 小结与讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 PigE基因的敲除及基因缺失突变株的筛选 | 第49-60页 |
| 1 材料 | 第49-51页 |
| 1.1 菌种 | 第49页 |
| 1.2 主要试剂与仪器设备 | 第49-50页 |
| 1.3 培养基 | 第50-51页 |
| 2 实验方法 | 第51-54页 |
| 2.1 基于同源重组原理的基因敲除 | 第51-52页 |
| 2.2 根癌农杆菌介导的红曲霉转化 | 第52-53页 |
| 2.3 基因缺失突变株的筛选与验证 | 第53-54页 |
| 3 实验结果 | 第54-58页 |
| 3.1 紫色红曲霉M-21菌株潮霉素耐受性分析 | 第54页 |
| 3.2 农杆菌转化子的筛选与分析 | 第54-58页 |
| 4 小结与讨论 | 第58-60页 |
| 第五章 △PigE突变株生长代谢分析 | 第60-73页 |
| 1 材料 | 第60-61页 |
| 1.1 菌种 | 第60页 |
| 1.2 主要试剂与仪器设备 | 第60-61页 |
| 1.3 培养基 | 第61页 |
| 2 实验方法 | 第61-64页 |
| 2.1 △PigE突变株菌落形态及显微结构观察 | 第61-62页 |
| 2.2 △PigE突变株生长速率分析 | 第62页 |
| 2.3 △PigE突变株产红曲色素分析 | 第62-63页 |
| 2.4 △PigE突变株发酵液桔霉素含量检测 | 第63页 |
| 2.5 △PigE突变株中PigE基因表达分析 | 第63-64页 |
| 3 实验结果 | 第64-72页 |
| 3.1 △PigE突变株菌落形态及显微结构特征观察结果 | 第64-66页 |
| 3.2 △PigE突变株菌落直径和生物量变化分析 | 第66-67页 |
| 3.3 △PigE突变株产红曲色素种类变化分析 | 第67-70页 |
| 3.4 △PigE突变株产红曲色素色价变化分析 | 第70页 |
| 3.5 △PigE突变株发酵液桔霉素含量变化分析 | 第70-71页 |
| 3.6 △PigE突变株中PigE基因表达变化分析 | 第71-72页 |
| 4 小结与讨论 | 第72-73页 |
| 第六章 红曲色素的稳定性和抑菌性分析 | 第73-83页 |
| 1 材料 | 第73-74页 |
| 1.1 菌种 | 第73页 |
| 1.2 主要试剂与仪器设备 | 第73-74页 |
| 1.3 培养基 | 第74页 |
| 2 实验方法 | 第74-76页 |
| 2.1 红曲色素的提取 | 第74页 |
| 2.2 红曲色素的稳定性分析 | 第74-75页 |
| 2.3 红曲色素的抑菌性分析 | 第75-76页 |
| 3 实验结果 | 第76-82页 |
| 3.1 红曲色素的稳定性分析结果 | 第76-79页 |
| 3.2 红曲色素的抑菌性分析结果 | 第79-82页 |
| 4 小结与讨论 | 第82-83页 |
| 第七章 结论与建议 | 第83-85页 |
| 1 结论 | 第83-84页 |
| 2 建议 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-94页 |
| 附录 | 第94-96页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-99页 |